大鼠腮腺主导管结扎损伤诱导腺体萎缩的组织学观察
本文关键词:大鼠腮腺主导管结扎损伤诱导腺体萎缩的组织学观察,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:研究Wistar大鼠腮腺主导管结扎损伤诱导腺体萎缩的组织学变化规律及其分子机制的探讨。方法:选用7周龄雄性Wistar大鼠60只,通过对Wistar大鼠右侧腮腺主导管用3-0医用丝线双重结扎,建立腮腺主导管结扎损伤诱导腺体组织萎缩的动物模型。分别于主导管结扎术后0、1、3、5、7、10、14、21和30天获取主导管结扎侧腮腺组织标本,常规组织固定、包埋等制取组织切片,采用苏木精—伊红(HE)、阿尔新蓝—过碘酸雪夫(AB-PAS)和Masson染色方法观察腺体的组织学变化,SP免疫组织化学法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)、细胞增殖标记蛋白(Ki-67)、钙调节蛋白(Calponin)的表达变化。结果:1、形态学观察:与假手术组相比,随主导管结扎时间的延长,腺体体积逐渐变小、皱缩,色泽加深,由淡黄色变为暗红色,质地由柔软逐渐变韧,纤维化明显;2、组织学观察:随主导管结扎时间的延长,大部分腺泡细胞萎缩、消失,酶原颗粒消失,导管样结构增多,至结扎30天时,正常腺体结构消失,可见明显扩张的导管样结构及在腺小叶的边缘残存少量的腺泡样细胞;免疫组织化学示Caspase3蛋白在结扎0d组低水平表达,3d组表达升高,5d组达峰值,7d组表达降低;Ki-67蛋白在结扎0d组散在表达,3d组达峰值,5d组表达降低;Calponin蛋白在结扎3d组表达升高,14d组达峰值,21d组表达降低,且呈“套圈样”围绕在扩张的导管样结构的周边。各实验组间Caspase3、Ki-67及Calponin蛋白表达水平差异有统计学意义(P0.05)。结论:腮腺主导管结扎后,腺体组织逐渐萎缩,唾液分泌功能逐渐降低;腮腺主导管结扎至30天时,大部分腺泡细胞萎缩、凋亡,唾液分泌功能丧失,腺小叶内可见明显扩张的导管样结构,但在腺小叶的边缘仍残存少量腺泡样细胞,推测可为腺体再生提供组织来源。
【关键词】:腮腺 主导管结扎 Caspase3 Ki-67 Calponin
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R781
【目录】:
- 摘要4-6
- Abstract6-8
- 英文缩略语对照表8-10
- 第1章 绪论10-14
- 第2章 实验部分14-33
- 2.1 实验材料14-17
- 2.1.1 实验动物14
- 2.1.2 实验器材14-15
- 2.1.3 主要仪器15
- 2.1.4 药品与试剂配制15-17
- 2.2 实验方法17-22
- 2.2.1 建立动物实验模型17-18
- 2.2.2 HE染色、AB-PAS染色和Masson染色18-20
- 2.2.3 免疫组织化学染色(IHC)20-21
- 2.2.4 观察指标21-22
- 2.2.5 统计分析22
- 2.3 实验结果22-30
- 2.3.1 Wistar大鼠腮腺主导管结扎后腺体形态学变化22
- 2.3.2 Wistar大鼠腮腺主导管结扎后腺体组织学(HE、AB-PAS及Masson染色)变化22-25
- 2.3.3 Wistar大鼠腮腺主导管结扎后腺体凋亡因子Caspase3、增殖因子Ki-67和Calponin蛋白表达变化25-30
- 2.4 讨论30-33
- 参考文献33-39
- 作者简介39-40
- 导师简介40-41
- 致谢41
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