TWIST/E2A/p21介导周期性张应力作用下BMMSCs成骨分化的机制研究

发布时间：2024-01-20 12:51

　　目的:正畸牙齿移动的生物学基础是骨改建,影响牙槽骨改建的因素很多,机械力是其中至关重要的因素之一。骨髓间充质干细胞(BMMSCs)受到机械力刺激后进行增殖和分化,其对正畸牙齿移动和正畸后保持具有重要意义。本实验从细胞分子水平着手,进一步探讨应力作用下介导大鼠骨髓间充质干细胞增殖分化的信号通路及其作用机制,为临床治疗寻求更加科学合理的正畸治疗手段提供理论依据。方法:1.全骨髓贴壁法获取大鼠原代骨髓间充质干细胞,细胞纯化后进行形态学观察,通过细胞计数绘制生长曲线,流式鉴定细胞表面抗原。2.构建大鼠BMMSCs体外培养-张应力加载模型,对BMMSCs加载频率为1Hz,应力拉伸变形幅度为5%的周期性张应力,分别持续0h、3h、6h、9h、12h。应用Western blot和q RT-PCR分别检测各组细胞在不同应力加载时间下成骨相关因子RUNX2、BMP2以及转录因子Twist、E2A、p21的蛋白和m RNA表达变化。3.针对大鼠p21基因序列设计合成四个sh RNA oligo序列和一个阴性对照序列,插入到慢病毒载体中构建慢病毒表达质粒,转化至感受态细胞进行测序鉴定。慢病毒包装后收集浓缩...

【文章页数】：121 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一章 分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
第二章 周期性张应力对大鼠BMMSCS转录因子表达及成骨分化的影响
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
第三章 TWIST/E2A/P21 对大鼠BMMSCS成骨分化的作用机制初探
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
参考文献
综述
    综述参考文献
病例展示
    病例一
    病例二
攻读硕士期间的研究成果
附录
致谢



本文编号：3880875