IL-1β经NK-kB通路对牙周膜干细胞成骨成分调控的机制研究

发布时间：2024-02-27 18:09

　　目的:探讨IL-1β经NK-kB通路对炎症状态下牙周膜干细胞成骨成分调控机制。方法:从正常牙周组织和慢性牙周炎组织采用组织消化和有限稀释法获取不同来源的人牙周膜干细胞(hPDLSCs),采用免疫细胞化学法和流式细胞仪检测两种源细胞表面标志分子表达,采用MTT和细胞周期检测间充质干细胞增殖能力;间充质干细胞多向分化能力检测采用成骨和成脂分化诱导。构建IL-1β(l0ng/ml)模拟牙周炎症微环境模型,加入NF-kB信号通路抑制剂BAY 11-7082,研究牙周膜干细胞缺失性功能研究。结果:体外有限稀释法结果表明,两种来源间充质干细胞均具有自我更新能力,MTT和细胞周期检测表明牙周炎组干细胞增殖能力优于对照组,炎症因子IL-1β处理的正常组牙周膜干细胞可激活NF-kB通路,在IL-1β处理同时加入BAY 11-7082后成骨有关基因及蛋白表达水平增加。结论:炎症因子IL-1β可激活NF-kB信号通路,并且可抑制牙周膜干细胞向成骨分化;对NF-kB信号通路抑制后能够明显逆转IL-1β导致的干细胞成骨分化能力降低。

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 资料和方法
    1.1 主要试剂：
    1.2 样本收集：
    1.3 实验方法
        1.3.1 干细胞原代培养和克隆：
        1.3.2 干细胞表型分析
            1.3.2. 1 细胞免疫荧光法：
            1.3.2. 2 流式细胞仪分析：
            1.3.2. 3 MTT和周期分析：
            1.3.2. 4 干细胞诱导分化实验：
        1.3.3 Real-time RT-PCR检测和Western blot检测：
    1.4 NF-кB信号通路研究：
    1.5 统计学分析：
2 结果
    2.1 两种来源PDLSCs细胞形态学观察：
    2.2 两种来源PDLSCs细胞表型：
    2.3 两种来源PDLSCs细胞增殖能力比较：
    2.4 两种来源PDLSCs分化能力对比：
    2.5 炎症组PDLSCs成骨分化过程NF-кB信号通路激活增强：
    2.6 阻断NF-кB信号通路可促进hPDLSCs成骨分化：
    2.7 IL-1β体外模拟炎症微环境对PDLSCs成骨分化能力的影响：
    2.8 IL-1β对PDLSCs的NF-кB通路影响：
3 讨论



本文编号：3912777