牙龈卟啉单胞菌对血管平滑肌细胞影响的实验研究

发布时间：2024-03-21 00:56

　　[目的]：探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, P. g)上清液对体外培养的兔血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells, VSMCs)增殖和迁移的影响以及对VSMCs合成分泌IL-1β、IL-6的影响,为研究牙周病与动脉粥样硬化的关系提供实验依据。 [方法]：采用组织贴块法进行VSMCs的原代培养,用α-Actin肌动蛋白免疫组化染色及透射电镜进行细胞鉴定,在培养细胞内加入原倍以及稀释1/2,1/4,1/8,1/16,1/32浓度的P.g上清液,MTT法检测不同浓度的P.g上清液对VSMCs增殖的影响。根据MTT结果选择浓度为4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VMSCs,在分别培养12h,24h,48h后,使用ELISA检测培养液上清中的IL-1β、IL-6水平。用4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VSMCs,在培养12h,24h,48h后,进行RT-PCR,观察IL-1β、IL-6的表达情况。用4.3×106CFU/ml的P.g上清刺激VSMCs,用爬片法检测7d内P.g上清对VSMCs迁移的影响。对结...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.P.g在BHI液中增菌24h后培养液变浑浊

图3.P.g在BHI液中增菌24h后培养液变浑浊。.原代培养的兔VSMCS的形态观察及细胞鉴定胞形态观察:原代取材sd一7d后在倒置显微镜下观察，可见组织块周围有细胞游形态为长梭形或多角形，细胞核位于细胞中央，可见2一3个核仁(见图续培养可见细胞复层分布，并向组织块周围扩散(见图....

图10.细胞爬片HE染色，细胞呈长梭形或多角

图10.细胞爬片HE染色，细胞呈长梭形或多角图11.细胞爬片HE染色，细胞胞浆内见大量丝状物质形，胞核圆，单核或双核(X100)(X200)免疫组化染色细胞来源鉴定结果见图12、图13:第3代细胞，抗肌动蛋白a一Actin染色，大部份细胞胞核为蓝色，长梭形胞浆染为棕色，为阳性反应....

图11.细胞爬片HE染色，细胞胞浆内见大量丝状物质形，胞核圆，单核或双核(X100)(X200)

图10.细胞爬片HE染色，细胞呈长梭形或多角图11.细胞爬片HE染色，细胞胞浆内见大量丝状物质形，胞核圆，单核或双核(X100)(X200)免疫组化染色细胞来源鉴定结果见图12、图13:第3代细胞，抗肌动蛋白a一Actin染色，大部份细胞胞核为蓝色，长梭形胞浆染为棕色，为阳性反应....

图12，抗肌动蛋白a一Actin染色阳性，胞浆为棕色

细胞胞浆内见大量丝状物质形，胞核圆，单核或双核(X100)(X200)免疫组化染色细胞来源鉴定结果见图12、图13:第3代细胞，抗肌动蛋白a一Actin染色，大部份细胞胞核为蓝色，长梭形胞浆染为棕色，为阳性反应。提示所培养的细胞为平滑肌细胞，结合原代取材部位，可以证实所培养的细....

本文编号：3933574