尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I通过PERK/eIF2α通路诱导Tca8113细胞凋亡的机制研究

发布时间：2024-04-14 14:33

　　目的:探讨内质网应激(ERS)相关的蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核翻译起始因子2α(eIF2α)通路在尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I(AAVC-I)诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡中的作用及机制。方法:不同实验浓度(4. 0、8. 0和16. 0 mg/L)的AAVC-I处理Tca8113细胞24 h后采用苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态;流式细胞术(annexin V-FITC/PI双荧光染色法)检测细胞凋亡;Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78),PERK/eIF2α通路中的磷酸化PERK(p-PERK)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)及下游的活化转录因子4(ATF4)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP),以及细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果:AAVCI各浓度组分别与正常对照组相比以及各浓度组之间相互比较的结果显示,随着AAVC-I浓度的增加,Tca8113细胞活力逐渐降低,细胞逐渐皱缩变小,间隙增大,胞核浓缩、碎裂,出现凋亡小体,细胞凋亡率增高(P<0. 05);GRP78、p-PERK、p-e...

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【部分图文】：

图3AAVC-I对Tca8113细胞凋亡的影响

本实验首先应用MTT法检测不同浓度的AAVC-I对人舌鳞癌Tca8113细胞活力的抑制作用。结果显示，在AAVC-I处理Tca8113细胞24h后，随着浓度的增加，AAVC-I对细胞活力的抑制作用逐渐增强；另外，根据IC50值确定AAVC-I的合适实验浓度，继续作用细胞24h....

图1AAVC-I对Tca8113细胞活力的影响

实验浓度的AAVC-I作用Tca8113细胞24h，对细胞进行HE染色可以明显观察到细胞的形态变化。正常对照组细胞的胞核经苏木素染成蓝紫色，胞质经伊红染成粉红色，细胞饱满呈良好的贴壁生长状态，形态多为梭形或不规则多边形；随着AAVC-I实验浓度的增加，实验组细胞逐渐皱缩变小，细....

图2AAVC-I对Tca8113细胞形态的影响

图1AAVC-I对Tca8113细胞活力的影响3AAVC-I对Tca8113细胞凋亡的影响

图4AAVC-I对Tca8113细胞GRP78、p-PERK和p-eIF2α蛋白水平的影响

图3AAVC-I对Tca8113细胞凋亡的影响图5AAVC-I对Tca8113细胞ATF4和CHOP蛋白表达水平的影响

本文编号：3954831