hBMP-7基因修饰的骨髓基质细胞修复骨质疏松大鼠牙周组织缺损的实验研究

发布时间：2024-04-15 04:40

　　目的:用人骨形成蛋白-7(human bone morphogenetic protein-7, hBMP-7)基因转染SD大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),并复合胶原膜BME-10X在体外构建组织工程化复合物,移植修复骨质疏松症SD大鼠牙周组织缺损,探讨hBMP-7基因修饰的BMSCs在促进骨质疏松大鼠牙周组织再生中的作用,为基因治疗与组织工程技术联合在牙周组织再生治疗中的进一步应用奠定基础。 方法:1、利用切除SD大鼠双侧卵巢的方法建立骨质疏松大鼠模型,通过体重检测、骨密度测量、血清生化检测以及标本组织学观察确定绝经后骨质疏松症模型建立成功;2、全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓基质细胞,观察去卵巢(OVX)大鼠和假手术大鼠(SHAM)BMSCs的增殖情况及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)表达的差异。体外通过重组腺病毒转染hBMP-7基因,通过荧光倒置相差显微镜观察、流式细胞仪、RealTime-PCR、免疫细胞化学染色、ELISA以及Western Blot检测目的基因的转录和表达。3、体外hBMP-7基...

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1SD大鼠卵巢切除术及切除的卵巢和脂肪组织：A：切开腹部皮肤；B：暴露腹腔；C：探及子宫体后沿子宫角上行找到卵巢（子宫体：红色箭头所示，子宫角：黑色箭头所示）；D：暴露双侧卵巢；E：双端结扎卵巢伴行血管；F：OVX组切除的卵巢及SHAM组切除的脂肪（卵巢：红色箭头所示；脂肪：黄色箭头所示）

12图1-1SD大鼠卵巢切除术及切除的卵巢和脂肪组织：A：切开腹部皮肤；B：暴露腹腔；C：探及子宫体后沿子宫角上行找到卵巢（子宫体：红色箭头所示，子宫角：黑色箭头所示）；D：暴露双侧卵巢；E：双端结扎卵巢伴行血管；F：OVX组切除的卵巢及SHAM组切除的脂肪（卵巢：红....

图1-2SD大鼠骨密度(BMD)测量示意图

图1-2SD大鼠骨密度(BMD)测量示意图本取材及固定。大鼠用乙醚麻醉后从眶后静脉取血，每只2-3ml，常温静置分清，保存于－20℃冰箱待用。大鼠脱颈处死后立即取大鼠随机剥离软组织后，将股骨标本置入4%多聚甲醛中固定，用于组解剖SD大鼠确认卵巢是否完全摘除，并观察大....

图1-3A：OVX组卵巢组织显微镜下观察的形态（×100）

(4)浸蜡6h，石蜡包埋；(5)切片：股骨远心干骺端连续切片10张，厚度4μm；(6)H&E染色：常规H&E染色。（七）统计学分析。所得数据以Mean±SD(均值±标准差)表示，采用SPSS16.0统计软件，各指标数据经过正态性检验和方差齐性检验，采用两....

图1-4SD大鼠去卵巢前后体重变化,*与SHAM组相比P<0.05

SHAM组略有躁动不安，粪便略为干燥，术后1周症状消失。术后8w，OVX组活动较迟缓，动物体型变大，反应迟钝，毛发较稀疏、暗淡无光泽，后肢支撑力减弱；SHAM组毛发相对较为光洁，体型及活动均正常，反应较灵敏。三、SD大鼠卵巢摘除前后的体重变化。实验前两组大鼠体重不存....

本文编号：3955750