脂肪干细胞复合PRF对脱位再植牙牙周愈合的初步研究

发布时间：2024-06-03 20:29

　　目的:全脱位牙外伤是指牙齿完全从牙槽窝中脱出,牙周膜和牙髓同时损伤,是牙外伤中最为严重的一种,约占恒牙外伤的16%。牙周膜在牙脱位时撕裂,随体外干燥环境保存时间增长,细胞逐渐脱水坏死。牙再植后,坏死的细胞不能发挥正常的再生功能。脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为新一代的种子细胞,与其他干细胞相比,在体外获取和培养上存在许多优势。大量研究也证明脂肪干细胞具有多向分化能力,能够向成脂、成骨等分化。正是由于具有这些优势,脂肪干细胞在很多领域作为种子细胞应用于组织工程中。富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)作为新一代富血小板浓缩物,其取自于自体血、制备简单,避免了伦理道德的争议及免疫排斥和血液交叉感染的风险;同时PRF中含有大量生长因子,有研究证实对ADSCs的增殖,分化具有促进作用,因此对脱位再植牙牙周修复再生提供了可能性。因此,本实验通过对PRF的制备与检测,将ADSCs作为种子细胞,并制备成细胞膜片形式,同时将PRF作为支架材料和生长因子的来源,构建ADSCs/PRF的复合体移植物,最大程度上促进牙周组织的修...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.A-B:PRF的大体观Figure1.A-B：GeneralobservationofPRF

F的制备及大体观察周岁比格犬一只，肌肉注射3%的戊巴比妥1mL/kg和陆醉，一次性抽血针于犬前肢静脉处一次性抽取静脉血5玻璃离心管中，台式离心机中以3000rpm/min的速度间后可以看见离心管中最上层为少量透明浅黄色的血浆的富血小板纤维蛋白（PRF）约1mL，....

图1.C-E：PRF的组织学结构

F组织学观染色光镜观察：PRF的主要成分为胶原纤维，PRF膜片上端为染色白结构；PRF下端则为含有少量红细胞和部分蓝染细胞核的白细中（图1.C）。F超微结构电镜观察：PRF膜片为三维立体的纤维蛋白网络结构，呈现为条松多孔，在纤维蛋白网络结构中可见由胶原原纤维和胶原纤....

图2.A-B：脂肪的分离与获取

碘伏与酒精消毒后铺巾，沿皮纹方向切开皮肤及皮下组织约3cm，充分止血后分离获得脂肪组织约5mL（图2.A.B），并放入含青霉素和链霉素的PBS溶液中。将获得的脂肪组织转移至超静台内，用含有双抗的PBS反复冲洗，去除肉眼可见的血管及筋膜组织，充分剪碎后加入等体积的Ｉ型胶....

图2.C-D：脂肪干细胞的培养

倒置相差显微镜镜下观察脂滴的形成并拍照。果脂肪干细胞的分离与培养eagle犬腹股沟处取出约5ml脂肪组织并消化，体外分离养的脂肪干细胞可见到贴壁的细胞，刚贴壁的细胞生长时呈短梭型（图2.C），每2d换液细胞迅速生长，3-4d即可铺满瓶底80%，此时细胞呈长梭型，进....

本文编号：3988449