机械离心应力对骨膜细胞与骨髓间充质干细胞体外增殖矿化的影响

发布时间：2025-02-05 10:45

　　目的:探讨兔骨膜细胞和BMSCs在不同大小的周期性机械离心应力刺激下向成骨细胞分化情况。方法:取兔颅骨骨膜细胞、股骨骨髓细胞体外培养,传至第三代,分为加力组和对照组,使用低速离心机加载离心力。加力组给予10 min/d,离心力分别为170g、210g、259g的应力刺激。对照组置于超净台10min/d,常规培养。测定各组细胞成骨矿化能力、ALP活力及细胞增殖情况;实时荧光定量PCR法测定两种细胞的成骨相关基因骨钙素(OCN)、RUNX2 mRNA的相对表达量。结果:周期性机械离心力刺激后1-9d两种细胞增殖活性、3-14d ALP活性均升高,加载后两周加力组细胞矿化结节的数目、细胞成骨相关的基因骨钙素OCN和RUNX2 mRNA的相对表达量显著增加。与对照组相比加力组上述各项指标增长更显著,其中骨膜细胞250g组增长情况最为显著(P<0.05)。结论:周期性机械离心力刺激可促进兔骨膜细胞、BMSCs体外增殖和矿化,促进成骨相关基因OCN、RUNX2的表达,其中以离心力大小为250g组最为显著。加载等量的离心力,骨膜细胞的增殖和矿化能力较BMSCs更为显著。

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【部分图文】：

图1骨膜细胞受力分析

图1骨膜细胞受力分析Fig.1PeriostealcellstressanalysisP3代骨膜细胞骨膜细胞，每天给予10min170g机械离心

图2A骨膜细胞

图2A骨膜细胞图2B单克隆来源骨膜细胞Fig.2APeriostealcellsFig.2BMonoclonalsourceperi

图2B单克隆来源骨膜细胞

细胞形态如图2A示呈梭形、三角形或多角形。经过单克隆筛选纯化后，细胞形态均一以梭形为主（图2B）。骨膜细胞传代后显微镜下观察细胞，细胞数目明显增多且呈旋涡状平行生长（图2C）。骨膜细胞经矿化诱导液诱导培养3周后行钙结节茜素红染色呈阳性，显微镜下可见矿化结节（图2D）。....

图2C第二代骨膜细胞

图2C第二代骨膜细胞图2D骨膜细胞矿化诱导3周Fig.2CSecondgenerationFig.2DPeriostealcellmineralizaperiostealcellsfor3weeks仪分析结果显示：如图3，原代骨膜细胞表达CD....

本文编号：4029714