转录因子Isl1基因在小鼠下颌发育过程中的功能研究

发布时间：2017-06-21 00:08

  本文关键词：转录因子Isl1基因在小鼠下颌发育过程中的功能研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：颌面部发育畸形的发病率位于新生儿先天性发育畸形的首位。作为多基因易感性疾病,颌面部发育畸形病因复杂。由第一鳃弓(下颌弓)发育而来的下颌包括下颌骨、下颚以及牙齿等器官,下颌突的发育是上皮和间充质相互作用的结果,多种信号分子和转录因子参与了下颌骨的发育。Islet 1是属于LIM-Homeodomain(LIM-HD)家族的一个转录因子,在胰岛的成熟、运动神经元特化及心脏发育过程中都起着重要作用。本实验研究目前尚无报道的Isl1基因对下颌发育的功能。我们研究用Shh-Cre小鼠与Isl1loxp/loxp小鼠交配,得到Isl1在下颌上皮细胞条件性敲除小鼠。结果首次发现,Isl1突变型小鼠表现出下颌发育异常,下颌骨显著变短且在中线处融合、下门牙与舌发育缺陷。通过研究发现,下颌发育过程中Isl1基因调控WTN通路和SHH通路的活性,进而影响下颌发育的多个重要基因,改变下颌细胞的增殖与凋亡,最终调节下颌的生长发育。
【关键词】：下颌 Isl1 shh 通路 wnt 通路
【学位授予单位】：杭州师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R782.6
【目录】：

• 致谢4-5
• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 1 引言10-15
• 1.1 下颌发育介绍10-11
• 1.1.1 下颌骨的发育10-11
• 1.1.2 下颌发育的相关基因11
• 1.2 转录因子ISL1的介绍11-12
• 1.3 SHH通路和它与下颌发育的关系12-14
• 1.4 经典WNT通路与它和下颌发育的关系14-15
• 2 实验内容与设计15-17
• 2.1 实验的目的与意义15
• 2.2 实验内容15-16
• 2.3 试验流程图16-17
• 3 实验试剂与方法17-32
• 3.1 ISL1老鼠的背景和基因型鉴定17-18
• 3.2 试剂与配方18-20
• 3.2.1 原位杂交试剂配方（除特殊说明外，其他试剂均要 121℃，20min灭菌）18-19
• 3.2.2 免疫组化试剂配方19
• 3.2.3 分子生物学实验试剂19-20
• 3.2.4 原位杂交的探针制备相关试剂20
• 3.2.5 免疫组化实验相关试剂20
• 3.2.6 骨骼染色相关试剂20
• 3.2.7 X-gal染色相关试剂20
• 3.3 实验方法20-32
• 3.3.1 小鼠材料的准备20
• 3.3.2 总RNA提取与cDNA的获得20-21
• 3.3.3 基因克隆与载体构建21
• 3.3.4 原位杂交探针的制备21-23
• 3.3.5 石蜡切片的苏木精，，伊红染色法(简称H·E染色)23
• 3.3.6 原位杂交试验方法23-27
• 3.3.7 免疫组织化学试验方法27-28
• 3.3.8 Brdu与Tunel染色28-29
• 3.3.9 扫描电镜样品处理29-30
• 3.3.10 骨骼染色30
• 3.3.11 X-gal染色30
• 3.3.12 Real-time PCR30
• 3.3.13 Microarray分析30-31
• 3.3.14 下颌体外质粒转染和体外培养（beads）31-32
• 4 实验结果32-42
• 4.1 CRE~(SHH)和ISL1在小鼠胚胎的表达32-33
• 4.2 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠的表型33-36
• 4.3 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下颌细胞的命运36-38
• 4.4 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下颌相关基因的表达38-40
• 4.5 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下颌中ISL1和WNT通路、SHH通路的联系40
• 4.6 CRE~(SHH)/ISL1（FLOX/FLOX）小鼠下颌中SHH通路与细胞增殖的联系40-42
• 5 实验总结与讨论：42-45
• 5.1 实验总结42
• 5.2 讨论42-45
• 5.2.1 论文研究的方法可行性42-43
• 5.2.2 实验数据的讨论43
• 5.2.3 实验其他讨论43-45
• 参考文献45-49
• 作者简介49

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10 李扬秋;转录因子GATA的发现及其在造血系统的研究进展[J];国外医学.输血及血液学分册;1996年03期

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