牙龈蛋白酶对M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子的调控作用

发布时间：2017-07-18 19:04

  本文关键词：牙龈蛋白酶对M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子的调控作用

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【摘要】：目的:探讨牙龈蛋白酶对M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子的调控作用。方法:采用sheets改良法从Pg ATCC 33277培养物上清中制备牙龈蛋白酶,应用质谱法鉴定牙龈蛋白酶,底物发色法测定酶活性,鲎试剂检测牙龈蛋白酶中LPS残留量。体外细胞模型实验评价牙龈蛋白酶对大肠杆菌脂多糖(Ec-LPS)诱导的M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子的影响。实验分为3组:阴性对照组、Ec-LPS组和Ec-LPS+牙龈蛋白酶组,采用qRTPCR和ELISA法检测M1型巨噬细胞表达的抑菌细胞因子白细胞介素12(IL-12)、一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素10(IL-10)在基因和蛋白水平的表达情况。结果:制备的牙龈蛋白酶为RgpA,活性20U/L,LPS残留量0.01EU/mL。qRT-PCR和ELISA结果显示,与阴性对照组相比,Ec-LPS组IL-12和iNOS基因和蛋白的表达水平明显升高,IL-10的表达降低,即成功诱导M1型巨噬细胞,组间有显著差异(P0.01);Ec-LPS+牙龈蛋白酶组IL-12、iNOS和IL-10基因和蛋白的表达较Ec-LPS组显著降低,但高于阴性对照组,组间有显著差异(P0.01)。结论:牙龈蛋白酶具有抑制M1型巨噬细胞表达抑菌细胞因子IL-12、iNOS的作用。
【作者单位】： 吉林大学口腔医学院牙周病科;吉林大学口腔医学院种植科;吉林省牙发育及颌骨重塑与再生重点实验室 吉林大学口腔医学院;
【关键词】： 牙龈卟啉单胞菌 牙龈蛋白酶 M型巨噬细胞 细胞因子
【基金】：国家自然科学基金面上项目(编号:81570983) 吉林省科技厅自然科学基金项目(编号:20150101076JC) 吉林大学研究生创新基金资助项目(编号:2016107)
【分类号】：R780.2
【正文快照】： 牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivlis,Pg)被认为是牙周炎的关键致病菌[1],该菌能产生牙龈蛋白酶(gingipain)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和菌毛(fimbria)等多种毒力因子,其中牙龈蛋白酶的致病作用近年来备受关注。牙龈蛋白酶是一种半胱氨酸蛋白酶,具有蛋白水解活性,

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1 陈萍萍,张朝武,谢东,韩良峰,吴逸明,陈玲玲;人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统序列分析[J];中国公共卫生;2004年09期

2 王国彬;陈海珍;杨杏芬;陈瑞梅;yと炅，

本文编号：559275