地西他滨对人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞P16基因甲基化状态及mRNA和蛋白表达的研究

发布时间：2017-07-27 15:16

  本文关键词：地西他滨对人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞P16基因甲基化状态及mRNA和蛋白表达的研究

  更多相关文章： DAC 舌鳞状细胞癌 P16 甲基化 实时荧光定量PCR

【摘要】：目的：本研究主要探讨DNA甲基化抑制剂地西他滨(5-aza-2 deoxycytidine DAC)对体外培养的人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞P16基因甲基化状态及mRNA和蛋白表达水平的影响,探讨其抗肿瘤作用及其可能机理。方法：实验将体外培养的处于对数生长期的人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞分为0、1、2、3四组。1、2、3三组样本采用三个梯度浓度的DAC(1×10-7mol/L、1×100-6mol/L、1×10-5mol/L) DMEM培养液进行处理,取不含DAC的等量培养液处理的0组作为对照组。细胞培养至48小时后,使用荧光甲基化特异聚合酶链反应Q-MSP技术检测实验组和对照组SCC-9细胞中P16基因甲基化状态；实时荧光定量PCR技术检测SCC-9细胞P16基因mRNA的表达水平；应用免疫组化SP法检测SCC-9细胞P16的蛋白表达。结果：用不同浓度的DAC作用于SCC-9细胞处理48h后,Q-MSP检测结果显示实验组和对照组中SCC-9细胞P16基因甲基化与非甲基化呈杂合状态。用实时荧光定量PCR检测四组P16基因的表达情况,结果显示,实验组中SCC-9细胞P16基因mRNA的相对表达量均高于对照组(2-△△cr1),差异有统计学差异(P0.05)。免疫组化结果显示经DAC处理过后,P16蛋白较对照组呈现高表达状态,空白对照组未见有蛋白表达。结论：1、DAC可能具有逆转人鳞状上皮舌癌SCC-9细胞P16基因甲基化作用；2、DAC可能通过其去甲基化作用促使因高甲基化而失活的P16基因mRNR和蛋白恢复表达；3、DAC可作为一种基因药物治疗舌鳞状细胞癌；
【关键词】：DAC 舌鳞状细胞癌 P16 甲基化 实时荧光定量PCR
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.86
【目录】：

• 个人简历3-5
• 英文缩略语表5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-20
• 结果20-25
• 讨论25-28
• 结论28-29
• 参考文献29-33
• 综述33-43
• 参考文献39-43
• 致谢43

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 ;地西他滨将在中国上市[J];临床合理用药杂志;2009年15期

2 李娟;严鲁萍;许亚梅;;地西他滨配合中药治疗骨髓增生异常综合征1例[J];贵阳中医学院学报;2010年02期

3 高冲;陈宝安;刘苒;徐昕;丁家华;王骏;程坚;赵刚;余正平;宋慧慧;鲍文;;地西他滨治疗骨髓增生异常综合征一例报告[J];现代医学;2010年02期

4 宋慧慧;陈宝安;刘苒;高冲;丁家华;孙耘玉;王骏;程坚;赵刚;余正平;鲍文;;地西他滨3d方案治疗骨髓增生异常综合征疗效讨论附两例病例报道[J];东南大学学报(医学版);2011年03期

5 谭振清;罗自勉;周新伏;;低剂量地西他滨治疗骨髓增生异常综合征的疗效分析[J];现代肿瘤医学;2012年08期

6 李倩;郑智茵;;地西他滨治疗中危骨髓增生异常综合征2例并文献复习[J];浙江中西医结合杂志;2013年12期

7 朱小勤;邱仲川;陈s，

本文编号：582050