SGI-1776钝化Pim-1对涎腺腺样囊性癌细胞的抑制作用

发布时间：2017-07-31 15:32

  本文关键词：SGI-1776钝化Pim-1对涎腺腺样囊性癌细胞的抑制作用

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【摘要】：目的检测SGI-1776对涎腺腺样囊性癌细胞SACC-83、SACC-LM的增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法体外培养涎腺腺样囊性癌细胞SACC-83、SACC-LM;CCK-8法、克隆形成法及BrDU染色法检测SGI-1776对SACC-LM细胞的增殖抑制作用;鬼笔环肽染色法测SGI-1776对细胞骨架的影响;PI/Annexin-V双染法、Caspase-3酶活化试验及JC-1染色法检测SGI-1776对SACC细胞凋亡的影响;划痕试验及Transwell法检测SGI-1776对SACC细胞迁移、侵袭的抑制作用;Western blot试验检测SGI-1776对SACC细胞增殖、迁移、侵袭抑制作用的可能分子机制。结果SGI-1776在体外对SACC细胞增殖、迁移、侵袭呈现出浓度、时间依赖性的抑制作用;鬼笔环肽染色法提示SGI-1776作用于SACC细胞后,细胞骨架未发生明显变化;PI/Annexin-V双染色法及JC-1染色法显示SGI-1776作用于SACC细胞后,凋亡率明显升高;Caspase-3酶活化试验提示Caspase-3参与执行细胞凋亡;Western blot试验提示Bcl-2可能参与Pim-1钝化后诱导的细胞凋亡。结论SGI-1776通过抑制Pim-1而发挥其抑制涎腺腺样囊性癌SACC-83、SAC-LM细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡的作用,提示Pim-1可能是腺样囊性癌新的治疗靶点。
【关键词】：腺样囊性癌 涎腺 Pim-1 SGI-1776
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.87
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-7
• 引言7-9
• 一 实验材料9-13
• 1. 实验菌株9
• 2. 实验试剂9-11
• 3. 实验仪器11-13
• 二 实验方法13-22
• 1. 药物配制13
• 2. 细胞培养13
• 3. CCK-8 试验13-14
• 4. 蛋白提取及定量14
• 5. 蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)14-16
• 6. 细胞骨架制备与观察16-17
• 7．BrdU掺入法测细胞周期17
• 8．克隆形成试验17-18
• 9．PI/Annexin-V双染色法测细胞凋亡率18-19
• 10．Caspase-3 酶活化检测19
• 11．Jc-1 法测线粒体膜电位19-20
• 12．划痕试验20
• 13. Transwell侵袭试验20-22
• 三 实验结果22-30
• 1．SGI-1776对肿瘤细胞增殖的影响22-23
• 2．蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)（Pim-1）23
• 3．细胞骨架的制备与观察23-24
• 4．BrdU掺入法测细胞周期24
• 5. 克隆形成试验24-25
• 6. PI/Annexin-V双染色法测细胞凋亡率25-26
• 7．Caspase-3 酶活化检测26-27
• 8．JC-1 染色法测线粒体膜电位27-28
• 9．划痕试验及Transwell侵袭试验28-29
• 10. 蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)（凋亡相关蛋白）29-30
• 四 讨论30-32
• 五 结论32-33
• 参考文献33-35
• 综述35-42
• 参考文献40-42
• 附录42-44
• 致谢44-45

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本文编号：599863