小干扰RNA沉默YAP基因对人牙周膜干细胞增殖凋亡的影响

发布时间：2017-08-04 14:40

  本文关键词：小干扰RNA沉默YAP基因对人牙周膜干细胞增殖凋亡的影响

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【摘要】：目的本研究通过小干扰RNA(siRNA)沉默人牙周膜干细胞(hPDLSCs)YAP基因,观察YAP基因沉默后对细胞增殖凋亡的影响。方法将化学合成siRNA序列以脂质体LipofectamineTM 2000介导瞬时转染h PDLSCs,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测转染后YAP表达水平,细胞增殖活性检测试剂盒(CCK-8)检测siRNA在体外对h PDLSCs增殖能力的影响,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率的变化。采用SPSS 19.0软件对数据进行处理,设P0.05为差异有统计学意义。结果在转染48 h后h PDLSCs的YAP mRNA和蛋白水平明显降低(P0.001),YAP蛋白表达水平在细胞被转染48、72 h后无显著差异,表明si RNA可以持续有效地抑制YAP的表达;CCK-8增殖活性实验结果显示细胞增殖活性受到抑制;沉默YAP基因后细胞早期及晚期凋亡率均增加。细胞周期检测结果显示细胞周期发生改变,G1及S期细胞比例增多(P0.01),G2期细胞比例明显减少(P0.05)。结论 si RNA沉默YAP基因后h PDLSCs增殖活性降低,细胞凋亡率明显增加,细胞的周期分布发生改变;YAP基因可以调控h PDLSCs的增殖与凋亡。
【作者单位】： 山东大学口腔医学院;山东省口腔组织再生重点实验室;山东大学齐鲁医院妇产科;
【关键词】： 小干扰RNA YAP基因 人牙周膜干细胞 增殖 凋亡
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81300885) 山东省自然科学基金资助项目(ZR2013HQ052,ZR2013HM086) 山东省医药卫生发展计划基金资助项目(2013WS0212) 山东大学青年学者未来计划基金资助项目(2015WLJH53);山东大学基本科研业务费专项基金资助项目(2015QY003)
【分类号】：R78
【正文快照】： 牙周膜是一个自我更新的系统,存在一类未分化的、具有自我更新和多向分化潜能的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)[1],它是牙周组织再生和重建的“基石”。近来的研究[2]相继证实PDLSCs是一类维持牙周组织动态平衡和缺损修复的关键细胞,然而,关于PDLSCs的，

本文编号：620131