体外共培养人牙髓干细胞对人牙囊干细胞增殖及成骨分化的影响

发布时间：2017-08-20 04:23

  本文关键词：体外共培养人牙髓干细胞对人牙囊干细胞增殖及成骨分化的影响

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【摘要】：目的:牙囊是牙齿发育早期包绕牙胚表面的疏松结缔组织,牙囊与牙周相关组织的形成有密切关系。牙囊细胞存在于牙囊组织中,其已被证明在适当的条件下具有向成牙骨质或成骨方向分化的潜力。但时下我们对于牙囊细胞成骨分化具体的机制仍不十分清楚。牙髓中的主要细胞是成牙本质细胞,成牙本质细胞在牙齿发育早期与牙囊细胞存在交互信号传导,彼此间有可能存在相互影响。因此本研究的目的是在体外条件下探索人牙髓干细胞(HDPSCs)对人牙囊干细胞(HDFSCs)增殖及成骨分化作用的影响。方法:1.利用改良的组织块-消化联合法对HDFSCs和HDPSCs进行分离、培养,并采用细胞免疫组化方法、流式细胞术以及多向诱导方法对两种细胞进行鉴定;2.体外共培养模型的构建:采用0.4μm孔径的Transwell小室构建HDFSCs和HDPSCs体外共培养体系;3.HDFSCs增殖活性变化的检测:采用24孔板规格的Transwell小室构建共培养体系,应用CCK-8检测法对HDFSCs增殖活性进行检测;4.HDFSCs成骨相关基因表达的检测:采用6孔板规格的Transwell小室构建共培养体系,共培养一周后,采用q RT-PCR对HDFSCs成骨相关基因ALP、Runx2、OPN、BSP及Col-1进行定量检测,并运用2-△△Ct法进行结果分析。结果:1.成功分离、培养、鉴定HDFSCs和HDPSCs;2.HDFSCs增殖活性检测结果:与对照组相比,与HDPSCs共培养后前3天,HDFSCs增值活性未见明显变化,从第4天开始,共培养组HDFSCs增殖活性明显高于对照组(P0.05);3.HDFSCs成骨相关基因表达结果:与对照组相比,共培养组HDFSCs成骨基因ALP、Runx2、OPN、BSP、Col-1的表达均明显增高(P0.05)。结论:与HDPSCs共培养后,HDFSCs的增殖活性及成骨相关基因ALP、Runx2、OPN、BSP、Col-1的表达均增强。HDFSCs和HDPSCs共培养在骨再生研究中具有潜在的应用价值。
【关键词】：人牙囊干细胞 人牙髓干细胞 体外共培养 细胞增殖 成骨分化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 第一部分 人牙囊干细胞和人牙髓干细胞的分离、培养和鉴定13-25
• 1 材料和方法14-20
• 2 结果20-23
• 3 讨论23-25
• 第二部分 体外共培养人牙髓干细胞对人牙囊干细胞增殖活力的影响25-28
• 1 材料和方法25-26
• 2 结果26-27
• 3 讨论27-28
• 第三部分 体外共培养人牙髓干细胞对人牙囊干细胞成骨分化的影响28-34
• 1 材料和方法29-32
• 2 结果32-33
• 3 讨论33-34
• 全文总结34-35
• 参考文献35-40
• 文献综述40-49
• 参考文献45-49
• 致谢49-50
• 攻读硕士学位期间发表论文50

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本文编号：704616