溶胶-凝胶法制备钛酸钡涂层对L929细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

发布时间：2017-08-23 02:17

  本文关键词：溶胶-凝胶法制备钛酸钡涂层对L929细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

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【摘要】：目的本课题从细胞生物学角度对新型纯钛烤瓷冠的中间涂层进行生物安全性检测,应用MTT比色法和流式细胞仪定量测试的方法,通过观察钛酸钡涂层浸提液对L929细胞的活性、增殖抑制情况、细胞周期变化及凋亡情况的影响,评价钛酸钡涂层的生物安全性,以期为钛酸钡涂层应用于临床提供实验依据。方法本研究分为三部分:1溶胶-凝胶法制备钛酸钡涂层对L929细胞增殖的影响,实验分四组:钛酸钡涂层的钛瓷试件(A组)、常规钛瓷试件(B组),并以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基为阴性对照组(C组),1%苯酚溶液为阳性对照组(D组),测定加样后1d、3d、5d各组的吸光度值(OD),计算细胞相对增殖率(RGR),评定细胞毒性等级。2溶胶-凝胶法制备钛酸钡涂层对L929细胞细胞周期的影响,本实验分为三组:含钛酸钡涂层的钛瓷试件组、常规钛瓷试件组,阴性对照组,用流式细胞仪检测各组浸提液培养48h的L929细胞周期的变化。3溶胶-凝胶法制备钛酸钡涂层对L929细胞凋亡的影响,本实验分为三组:含钛酸钡涂层的钛瓷试件组、常规钛瓷试件组,阴性对照组,采用Annexin V/PI法染色法,用流式细胞仪对细胞凋亡进行定量检测。结果1钛酸钡涂层的制备:溶胶凝胶法制备出钛酸钡涂层,扫描电镜下涂层组织致密,有一定粗糙度,表面有纹理,无明显裂纹;能谱分析数据:Ti的原子百分率为10.97%,Ba为74.22%,O为7.17%,Si为5.91%,Al为1.73%。2本实验室条件下细胞生长曲线结果:细胞的镜下观察及A值分析,L929细胞在本实验室的最适生长密度为6×104/ml。3 MTT法检测L929细胞增殖率、评价细胞毒级结果:同一培养时间,不同浓度浸提液与阳性对照组的吸光度值比较差异均有统计学意义(P0.05),100%钛酸钡涂层组吸光度值大于阴性对照组,差异有统计学意义(P0.05);除阳性对照组外,各组浓度浸提液的吸光度值均随着培养时间的延长而增加(P0.05),25%、50%、75%钛酸钡涂层组第1d吸光度与阴性对照组比较差异有统计学意义(P0.05),而到第5d,25%、50%、75%钛酸钡涂层组吸光度与阴性对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。4 PI法测细胞周期结果,G1期:钛酸钡涂层组和常规钛瓷结合组与阴性组比较差异有统计学意义(P0.05),钛酸钡涂层组与常规钛瓷结合组比较差异无统计学意义(P0.05);S期:钛酸钡涂层组和常规钛瓷结合组与阴性组比较差异有统计学意义(P0.05),钛酸钡涂层组与常规钛瓷结合组比较差异无统计学意义(P0.05);G2期:三组间数值无明显差异(P0.05)。5 PI/Annexin V检测细胞凋亡结果:钛酸钡涂层组和常规钛瓷结合组凋亡与阴性组凋亡比较,差异有统计学意义(P0.05),钛酸钡涂层组与常规钛瓷结合组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论1含有钛酸钡涂层的钛瓷结合组与常规钛瓷结合组比体外毒性试验中无短期细胞毒性,并且有促进细胞增殖的作用。2与常规钛瓷结合组比较,细胞周期和凋亡的影响无显著性差异。3建议临床使用钛酸钡涂层来增加钛瓷结合强度,减少崩瓷瓷裂的现象发生,从而提高修复治疗的成功率。
【关键词】：钛酸钡涂层 L929细胞 细胞毒性 细胞周期 细胞凋亡
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.1
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 引言11-12
• 第1章 溶胶-凝胶法制备钛酸钡涂层对L929细胞增殖的影响12-27
• 1.1 材料和方法12-17
• 1.2 结果17-24
• 1.3 讨论24-25
• 1.4 本章结论25
• 参考文献25-27
• 第2章 溶胶-凝胶法制备的钛酸钡涂层对L929细胞周期的影响27-35
• 2.1 材料与方法27-31
• 2.2 结果31-32
• 2.3 讨论32-33
• 2.4 本章结论33-35
• 第3章 溶胶凝胶法制备的钛酸钡涂层对L929细胞凋亡的影响35-44
• 3.1 材料与方法35-39
• 3.2 结果39-40
• 3.3 讨论40-42
• 3.4 结论42
• 参考文献42-44
• 第4章 综述 牙科材料细胞毒性的研究进展44-56
• 4.1 生物学评价的细胞44-45
• 4.2 生物相容性的评价方法45-49
• 4.3 生物安全性评价在口腔材料领域的应用49-53
• 参考文献53-56
• 结论56-57
• 致谢57-58
• 导师简介58-59
• 作者简介59-60
• 学位论文数据集60

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