比格犬腭中缝骨组织中BMP-2、OPG和RANKL在上颌磁力扩弓及螺旋扩弓作用下的表达

发布时间：2017-08-26 04:43

  本文关键词：比格犬腭中缝骨组织中BMP-2、OPG和RANKL在上颌磁力扩弓及螺旋扩弓作用下的表达

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【摘要】：目的:通过研究比格犬腭中缝骨组织中骨形成蛋白2(BMP-2)、骨保护素(OPG)和NF-Κβ受体活化因子配体(RANKL)的表达变化规律,初步探讨上颌磁力扩弓及螺旋扩弓在扩弓及保持阶段对腭中缝骨组织改建的影响。方法:1、建立动物上颌扩弓模型将36只比格犬随机分成3组,即磁力扩弓组12只、螺旋扩弓组12只和对照组12只。每组再随机均分成A、B两个亚组,各6只。磁力扩弓组使用磁力扩弓矫治器,螺旋扩弓组使用螺旋扩弓矫治器,对照组不使用任何矫治器。磁力扩弓组1周加力一次(1.5mm/次),螺旋扩弓组1周加力两次(0.75mm/次)。扩弓5周后(T1期)处死三组中的A亚组比格犬并截取上颌腭中缝的骨组织。两扩弓组的B亚组比格犬继续戴用原扩弓器但停止加力。保持8周后(T2期)处死三组的B亚组比格犬并获取腭中缝骨组织标本。2、BMP-2、OPG、RANKL mRNA及其蛋白质检测将取出的骨组织标本磨成骨粉,利用RT-PCR及Western Blot技术检测腭中缝骨组织中BMP-2、OPG、RANKL mRNA及其蛋白质的表达水平。结果:1、RT-PCR检测mRNA的表达变化规律与Western Blot检测蛋白质的表达变化规律一致。2、磁力扩弓组、螺旋扩弓组、对照组的组间比较T1期,磁力扩弓组及螺旋扩弓组的BMP-2、OPG mRNA及蛋白质与对照组相比表达明显增多,RANKL表达明显减少,且具有统计学意义。磁力扩弓组与螺旋扩弓组相比,BMP-2、OPG表达增多,RANKL表达减少,且有统计学意义。T2期,磁力扩弓组与对照组相比,BMP-2、OPG表达增多,RANKL表达减少,且有统计学意义。螺旋扩弓组和对照组间,以及磁力扩弓组和螺旋扩弓组两扩弓组间,各检测指标均无统计学差异。3、T1期和T2期的组内比较与T1期相比,对照组在T2期的所有检测指标均有少量增多但无统计学差异。螺旋扩弓组和磁力扩弓组在T2期BMP-2、OPG表达减少,RANKL表达增多,且有统计学意义。结论:1、在扩弓阶段,磁力扩弓及螺旋扩弓均能促使腭中缝骨组织中BMP-2、OPG表达水平上调,RANKL表达水平下调;且磁力扩弓促进骨组织中BMP-2、OPG表达,抑制RANKL表达的能力更强。2、在磁力扩弓后及螺旋扩弓后保持阶段,与扩弓阶段相比腭中缝骨组织中BMP-2、OPG表达水平均显著降低,RANKL表达水平均显著升高。3、在磁力扩弓后保持阶段,与同阶段对照组相比,磁力扩弓组腭中缝骨组织中BMP-2、OPG表达水平上调,RANKL表达水平下调。
【关键词】：磁力扩弓 螺旋扩弓 BMP-2 OPG RANKL
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R783.5
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文缩略词表9-10
• 第1章 引言10-13
• 第2章 材料与方法13-27
• 2.1 实验材料13-16
• 2.1.1 实验动物13
• 2.1.2 磁力扩弓装置及螺旋扩弓装置13-14
• 2.1.3 主要实验仪器14
• 2.1.4 主要实验试剂14-15
• 2.1.5 溶液的配制15-16
• 2.2 实验方法16-26
• 2.2.1 实验动物饲养与分组16-17
• 2.2.2 建立动物上颌扩弓模型17-18
• 2.2.3 处死动物并获取骨组织标本18-19
• 2.2.4 RT-PCR检测BMP-2、OPG、RANKL m RNA表达水平19-23
• 2.2.5 Western Blot检测BMP-2、OPG、RANKL蛋白质表达水平23-26
• 2.3 统计分析26-27
• 第3章 实验结果27-39
• 3.1 动物饲养及上颌扩弓情况27
• 3.2 总RNA的完整度及纯度27-28
• 3.2.1 总RNA的完整度27
• 3.2.2 总RNA的纯度27-28
• 3.2.3 常规PCR实验结果28
• 3.3 RT-PCR的实验结果28-35
• 3.3.1 T1期三组间各目的基因m RNA表达相对量的组间比较32-33
• 3.3.2 T2期三组间各目的基因m RNA表达相对量的组间比较33-34
• 3.3.3 对照组在T1、T2期各目的基因m RNA表达相对量的比较34
• 3.3.4 螺旋扩弓组在T1、T2期各目的基因m RNA表达相对量的比较34
• 3.3.5 磁力扩弓组在T1、T2期各目的基因m RNA表达相对量的比较34-35
• 3.4 Western Blot实验结果35-39
• 3.4.1 蛋白质定量35
• 3.4.2 Western Blot蛋白质印迹实验结果35-39
• 第4章 讨论39-46
• 4.1 扩弓力对腭中缝骨组织改建的影响39
• 4.2 静磁场对腭中缝骨组织改建的影响39-41
• 4.3 BMP-2、OPG及RANKL在骨组织改建中的作用41-42
• 4.4 本实验中BMP-2、OPG、RANKL在上颌磁力扩弓及螺旋扩弓作用下的表达变化规律42-46
• 第5章 结论46-47
• 致谢47-48
• 参考文献48-52
• 病例报告 152-56
• 病例报告 256-60
• 病例报告 360-64
• 病例报告 464-68
• 病例报告 568-72
• 攻读学位期间的研究成果72-73
• 综述73-80
• 参考文献78-80

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