醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤抑制作用的实验研究

发布时间：2017-08-30 12:09

  本文关键词：醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤抑制作用的实验研究

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【摘要】：[目的]研究醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤的治疗作用,并初步探讨醋酸棉酚对头颈鳞癌的抑制作用及其机制,为临床治疗相关肿瘤提供一种新途径和科学理论依据。[材料与方法]1.建立动物模型。选4-6周BALB/C-nu裸鼠,将常规培养的人舌鳞癌Cal-27细胞接种于裸鼠右腋皮下,每只注射0.1ml(细胞密度3×107/ml),观察裸鼠成瘤情况,计算成瘤率。2.实验分组及药物干预。2周后将成瘤裸鼠随机分为三组(n=8),设立空白组(生理盐水0.2ml/只)；DMSO组(0.2%的DMSO0.2ml/只)；醋酸棉酚GAA组(0.2% DMSO助溶的GAA 15mg/kg)。给药方式均为腹腔注射,1次/2天,共6次。3.药物治疗作用观察。记录裸鼠体重及移植瘤变化情况,绘制肿瘤生长曲线。最后一次给药2天后处死裸鼠,剥离瘤体组织及其主要脏器,称量肿瘤质量计算抑瘤率。4.制作石蜡切片。HE染色观察各组肿瘤组织病理变化及其主要脏器是否有癌细胞转移,TUNEL检测各组肿瘤细胞凋亡率。5.免疫组化行CD31检测,统计各组肿瘤中MVD值的结果。[结果]1.成功建立人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤动物模型,成瘤率为96%。2.裸鼠体重及移植瘤体积变化：空白组裸鼠质量最重；DMSO组次之；GAA组裸鼠质量最轻。空白组和DMSO组体重变化无显著差异(P0.05),GAA组与其余两组之间体重变化均有显著差异(P0.05)。GAA组移植瘤体积在药物干预后变化明显,瘤体增长速度缓慢,移植瘤体积明显小于空白组及DMSO组,与空白组及DMSO组比较具有显著性差异(P0.05)3.抑瘤率情况：空白组肿瘤,其平均瘤重为(1.835±0.293)g,抑瘤率为0%；DMSO组肿瘤,平均瘤重(1.764±0.184)g,抑瘤率(3.87±3.7)%；GAA组肿瘤,平均瘤重(0.839±0.091)g,抑瘤率(54.28±6.9)%。GAA组与其余两组(空白组和DMSO组)比较,抑瘤率存在显著性差异(P0.05)。4,HE染色示：空白组,细胞排列最紧密,血管数最多,核大深染；DMSO组,细胞排列疏松,血管数较少,间质较多,核深染；GAA组,细胞异型性不明显,呈巢状、索条状排列,肿瘤血管最少。三组裸鼠主要脏器均未发现鳞癌细胞转移。5.TUNEL检测各组肿瘤细胞凋亡率：空白组凋亡率为(21.144-10.01)%；DMSO组(23.80±4.45)%；GAA组(96.16±2.80)%。空白组与DMSO组比较无显著性差异(P0.05)；GAA组与其余两组分别比较有显著性差异(P0.01)。6.各组裸鼠移植瘤MVD值结果：空白组及DMSO组MVD值高于GAA组,差异具有显著性(P0.01)；空白组与DMSO组MVD值比较差异无显著性(P0.05)。[结论]1.成功建立人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤动物模型,成瘤率为96%。2.醋酸棉酚(GAA)对人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,HE染色示：人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤模型未见鳞癌发生远处转移。3.醋酸棉酚(GAA)可促进人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤细胞凋亡。4.醋酸棉酚(GAA)抑制人舌鳞癌Cal-27裸鼠移植瘤生长可能与抑制肿瘤血管生成及降低肿瘤内微血管密度MVD值有关。
【关键词】：醋酸棉酚 舌鳞癌 裸鼠 细胞凋亡 微血管密度
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.86
【目录】：

• 英文缩略表5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 引言11-14
• 一、实验材料14-16
• 1. 细胞株14
• 2. 实验动物14
• 3. 实验药物14
• 4. 主要仪器设备14-15
• 5. 主要试剂15-16
• 二、实验方法16-22
• 1. 试剂配制16
• 2. 细胞培养16-17
• 3. 建立动物模型17-18
• 4. 实验分组与给药18
• 5. 药物治疗作用观察18
• 6. 肿瘤组织病理学观察18-19
• 7. TUNEL检测各组肿瘤细胞凋亡率19-20
• 8. 各组移植瘤微血管密度值(MVD)检测20-21
• 9. 统计学分析21-22
• 三、实验结果22-34
• 1. 细胞形态及动物模型观察22-23
• 2. 裸鼠体重及移植瘤变化情况23-25
• 3. 药物对肿瘤组织大小、质量及抑瘤率的作用25-28
• 4. 肿瘤组织及其主要脏器病理学观察28-30
• 5. TUNEL检测各组肿瘤细胞凋亡率30-31
• 6. CD31染色结果判定及微血管密度值的统计31-34
• 四、讨论34-40
• 五、结论40-41
• 参考文献41-46
• 综述46-55
• 参考文献52-55
• 攻读学位期间发表的文章55-56
• 致谢56

【参考文献】

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本文编号：759202