TATp和CXCR4修饰的载VP3基因超声微泡制备及体外寻靶实验

发布时间：2017-09-01 17:40

  本文关键词：TATp和CXCR4修饰的载VP3基因超声微泡制备及体外寻靶实验

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【摘要】：目的制备一种载VP3基因、反式激活转录激活肽(TATp)与基质细胞衍生因子-1(SDF-1)同时修饰的新型载基因高分子靶向超声造影剂,表征其性质。方法采用W/O/W双乳化法制备载基因超声微泡。并通过硫醚键将SDF-1与TATp共价连接到聚乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)微泡的表面,制备成靶向载基因超声微泡。Malvern测量仪测定其粒径、分布及表面电位,流式细胞仪及共聚焦显微镜检测TATp、SDF-1在高分子微泡表面的连接状况,酶切反应实验鉴定其对DNA的保护性,光镜观察及流式细胞仪初步评估其体外寻靶能力,超声考察体外成像。结果靶向载基因超声微泡呈规则球形。粒径为(536.00±16.55)nm,分布集中,表面电位为(-0.08±0.08)mV。平均载药量为0.62%,平均包封率为36.13%。对DNA保护作用持续60min,未见损坏。TATp、SDF-1同时加载于PLGA微泡表面的连接率为69.84%。体外寻靶实验显示,靶向微泡较多地稳定簇聚在舌癌SCC-15细胞膜上,连接率为91.44%。而非靶向微泡较少结合,连接率为12.96%。体外超声显像呈细小点状、均匀高回声。结论成功制备出TATp-SDF-1-VP3-PEG-PLGA微泡,其能在体外高效靶向结合舌鳞癌SCC-15细胞,且短时间穿过细胞膜。体外成像效果较好。
【作者单位】： 重庆医科大学附属口腔医院颌面外科/口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室;重庆医科大学附属口腔医院颌面外科/重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室;重庆医科大学附属第二医院口腔科;重庆医科大学超声影像学研究所;
【关键词】： 聚乳酸/羟基乙酸共聚物 超声微泡 靶向舌鳞癌细胞 分子成像
【基金】：重庆市卫计委重点基金资助项目(2011-1-060)
【分类号】：R739.86
【正文快照】： 度[1]。及时诊断及治疗舌癌患者颈部转移淋巴结成为提高生存率的迫切需求。基于临床上尚无一种可靠客观的无创性检查和治疗手段,第4代声学造影剂由于具备靶向诊断和靶向给药的功能[2],成为诊疗舌癌原发灶及其颈部淋巴道转移灶的探索方向。趋化因子基质细胞衍生因子-1(stromal

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3 姜学平;程茜;钱梦，

本文编号：773540