芪蓝制剂对体外培养口腔癌前细胞增殖、凋亡影响研究

发布时间：2017-09-04 23:04

  本文关键词：芪蓝制剂对体外培养口腔癌前细胞增殖、凋亡影响研究

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【摘要】：目的:本研究应用不同浓度的芪蓝制剂作用于人口腔黏膜正常上皮细胞(Human Oral Keratinocytes HOK)、口腔黏膜异常增生细胞(Dysplastic Oral Keratinocyte DOK)、人舌鳞癌细胞(Tca8113),观察芪蓝制剂对不同癌变程度细胞是否有选择性抑制作用,对DOK细胞增值和凋亡的影响机制,为临床应用提供实验依据。方法:1.培养HOK、DOK、Tca8113.形成不同癌变程度的三种细胞系。2.采用CCK-8法检测芪蓝制剂对HOK、DOK、Tca8113增殖的抑制作用。3.采用流式细胞仪检测不同浓度芪蓝制剂作用后DOK细胞周期和凋亡的变化。4.采用蛋白质印迹法(Western blot WB)检测DOK细胞内b细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2 Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein Bax)和细胞周期蛋白D1(Cylin D1)蛋白的表达变化。结果:1.HOK角蛋白染色阳性,HOK、DOK、Tca8113具有不同的生长特性。2.CCK-8法检测表明芪蓝制剂对HOK、DOK、Tca8113细胞增殖的抑制作用逐渐增强,并呈剂量效应关系3.流式细胞仪检测显示DOK细胞用药组G0/G1期细胞高于对照组,凋亡率随芪蓝制剂浓度的升高而增加。4.WB结果显示一定浓度的芪蓝制剂作用于DOK 24h后,随着浓度的升高Cyclin D1及Bcl-2蛋白的表达逐渐降低,Bax蛋白的表达与Bax/Bcl-2比值逐渐升高结论:1.成功体外培养HOK、DOK、Tca8113。三者具有不同的生长特性,形成不同癌变程度的三种细胞系2.芪蓝制剂对Tca8113、DOK的增殖具有显著的抑制作用。3.芪蓝制剂具有低毒性和选择性抑制作用,抑制作用随癌变程度的增加而增强。4.芪蓝制剂可促进DOK细胞凋亡。5.通过对EGFR,P27,Cylin D1作用导致G0/G1期阻滞,可能是芪蓝制剂抑制DOK增殖的机制6.上调P53介导的Bax及下调Bcl-2,可能为芪蓝制剂促进DOK细胞凋亡机制
【关键词】：芪蓝制剂 口腔黏膜异常增生细胞 细胞周期 凋亡
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.8
【目录】：

• 附录4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 第一部分 芪蓝制剂对不同癌变程度细胞选择性抑制作用研究9-28
• 前言9-10
• 材料与方法10-16
• 结果16-24
• 讨论24-27
• 结论27-28
• 第二部分 芪蓝制剂对癌前细胞增殖、凋亡的作用机制研究28-49
• 前言28-29
• 材料与方法29-34
• 结果34-43
• 讨论43-48
• 结论48-49
• 参考文献49-55
• 综述55-67
• 参考文献62-67
• 致谢67

【参考文献】

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本文编号：794362