B细胞活化因子在牙周炎与肥胖关系中作用的初步研究

发布时间：2017-09-14 03:37

  本文关键词：B细胞活化因子在牙周炎与肥胖关系中作用的初步研究

  更多相关文章： B细胞活化因子 牙周炎 肥胖 出血指数 牙龈组织 人牙龈成纤维细胞 高糖

【摘要】：目的:通过流行病学调查及生化检测,分析血清B细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)水平与牙周临床指标的关系;通过检测人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)是否表达BAFF及其受体,比较慢性牙周炎患者和健康志愿者牙龈组织BAFF及其受体表达变化,推测BAFF及其受体是否参与牙周炎症过程;通过分析血清BAFF与肥胖的关系,以及高糖刺激HGFs后BAFF、脂肪分化标志基因、炎症趋化因子的表达,初步探索BAFF在牙周炎和肥胖之间的作用。方法:1.调查中老年人群身高、体重等一般情况,根据社区牙周指数(community periodontal index,CPI)选取指数牙,检查其菌斑指数(plaque index,PLI)、探诊深度(probing depth,PD)、附着丧失(attachment loss,AL)、出血指数(bleeding index,BI)等牙周临床指标,获得空腹血糖、甘油三酯等辅助检查结果,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清BAFF水平,分析血清BAFF水平与牙周临床指标的关系。2.收集健康成人HGFs及外周血,组织块培养法培养HGFs,取第2-3代细胞采用流式细胞术及逆转录多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测BAFF及其受体B细胞活化因子受体(B cell activating factor receptor,BAFF-R)、B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)、跨膜激活剂和钙调素相互作用因子(transmembrane activator and calcium-modulating cyclophilin ligand interactor,TACI)的表达,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),以B细胞的表达为阳性对照;收集正常和慢性牙周炎患者牙龈组织,实时定量PCR(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测BAFF及其受体表达变化。3.根据体质指数(body mass index,BMI)将调查人群分为正常、超重、肥胖三组,采用方差分析三组间辅助检查结果、牙周临床指标及血清BAFF水平与肥胖的关系。4.采用高糖刺激HGFs 1d、3d、5d、7d、9d,real-time PCR检测BAFF、过氧化物酶增殖物活化受体γ2(peroxisome proliferator-activated receptorγ2,PPARγ2)、细胞因子信号转导抑制物3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)、CC趋化因子配体2(CC chemokine ligand2,CCL2)的表达情况。结果:1.随着PLI、PD、AL的升高,血清BAFF有升高趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。当BI≥2时,血清BAFF水平明显升高,有统计学差异(P0.05)。2.流式细胞检测发现:健康成人HGFs几乎不表达BAFF-R、BCMA、TACI。RT-PCR显示健康成人HGFs中BAFF mRNA水平较弱,BAFF-R、BCMA、TACI的mRNA水平极弱。3.与健康牙龈组织比较,慢性牙周炎牙龈组织BAFF、TACI mRNA表达水平明显升高(P0.05)。而BAFFR、BCMA mRNA表达无统计学差异(P0.05)。4.正常、超重、肥胖三组间人群的基本情况无差异,血常规指标在正常范围内,空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇及牙周指标中的PLI、PD、AL在三组间无差异(P0.05);而BI在肥胖组中明显升高(P0.05);血清BAFF水平在肥胖组比正常组升高(P0.05)。5.对比低糖对照组,高糖刺激会引起HGFs BAFF mRNA表达升高(P0.05);PPARγ2有升高趋势;SOCS3在9d时升高明显(P0.05);CCL2在3、5、7、9d逐渐升高,在5、7、9d升高明显(P0.05)。结论:1.BAFF与牙龈出血指数有相关性,而且BAFF与其受体TACI在炎性牙龈组织中高表达,提示BAFF可能参与牙周炎症的过程。2.BAFF与肥胖、牙龈炎症存在相关性,提示BAFF在肥胖患者的牙周炎中起着重要的作用。3.高糖能在一定程度上促进HGFs脂肪向分化,促进脂肪炎性因子如BAFF、SOCS3和炎性趋化因子CCL2的表达,推测BAFF可能参与了牙周炎与肥胖间关系的调节。
【关键词】：B细胞活化因子 牙周炎 肥胖 出血指数 牙龈组织 人牙龈成纤维细胞 高糖
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781.42;R589.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 缩略语/符号说明11-13
• 前言13-16
• 研究现状、成果13-15
• 研究目的、方法15-16
• 一、血清BAFF与牙周临床指标的关系16-26
• 1.1 对象和方法16-19
• 1.1.1 主要设备与仪器16
• 1.1.2 主要试剂16-17
• 1.1.3 调查对象17
• 1.1.4 调查17
• 1.1.5 酶联免疫吸附试验17-18
• 1.1.6 统计学方法18-19
• 1.2 结果19-22
• 1.2.1 调查人员的一般情况19-20
• 1.2.2 血清BAFF与牙周临床指标的关系分析20-22
• 1.3 讨论22-25
• 1.4 小结25-26
• 二、BAFF在HGFs及正常、慢性牙周炎患者牙龈组织的表达26-41
• 2.1 实验准备26-28
• 2.1.1 主要设备与仪器26-27
• 2.1.2 主要试剂27-28
• 2.2 对象和方法28-33
• 2.2.1 PBMC的分离28-29
• 2.2.2 HGFs原代培养29
• 2.2.3 流式细胞术检测BAFF受体表达29-30
• 2.2.4 RT-PCR检测BAFF及受体表达30-33
• 2.2.5 real-time PCR检测正常、慢性牙周炎患者牙龈组织BAFF及三个受体的表达33
• 2.3 结果33-37
• 2.3.1 HGFs原代培养33-34
• 2.3.2 流式细胞术检测B细胞及HGFs上BAFF及受体表达34-35
• 2.3.3 RT-PCR检测HGFs BAFF及三个受体的mRNA水平35
• 2.3.4 real-time PCR检测正常、慢性牙周炎患者牙龈组织BAFF及三个受体的表达35-37
• 2.4 讨论37-40
• 2.5 小结40-41
• 三、BAFF在牙周炎与肥胖间的作用41-47
• 3.1 实验准备41
• 3.1.1 主要设备与仪器41
• 3.1.2 主要试剂41
• 3.2 对象和方法41-42
• 3.2.1 实验对象41
• 3.2.2 实验分组41
• 3.2.3 统计学方法41-42
• 3.3 结果42-44
• 3.3.1 正常、超重、肥胖三组辅助检查及牙周临床指标的比较42
• 3.3.2 正常、超重、肥胖三组血清BAFF水平的比较42-44
• 3.4 讨论44-46
• 3.5 小结46-47
• 四、高糖刺激下HGFs BAFF、脂肪分化标志基因及炎症趋化因子的表达47-53
• 4.1 实验准备47
• 4.1.1 主要设备与仪器47
• 4.1.2 主要试剂47
• 4.2 对象和方法47-48
• 4.2.1 实验分组47-48
• 4.2.2 real-time PCR检测HGFs BAFF、脂肪分化标志基因及炎症趋化因子的表达变化48
• 4.3 结果48-51
• 4.3.1 real-time PCR检测HGFs BAFF、脂肪分化标志基因及炎症趋化因子的表达变化48-51
• 4.4 讨论51-52
• 4.5 小结52-53
• 结论53-54
• 参考文献54-61
• 发表论文和参加科研情况说明61-62
• 综述 脂肪细胞因子在牙周炎中作用的研究进展62-73
• 综述参考文献67-73
• 致谢73

，

本文编号：847658