丙泊酚与盐酸法舒地尔联合应用对脑发育期大鼠海马神经元的影响

发布时间：2017-10-25 05:36

  本文关键词：丙泊酚与盐酸法舒地尔联合应用对脑发育期大鼠海马神经元的影响

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【摘要】：目的:探讨反复腹腔注射丙泊酚对脑发育期SD大鼠海马神经元的毒性作用及远期学习记忆功能的影响;盐酸法舒地尔是否能减轻丙泊酚诱导的海马神经元的凋亡。方法:1实验动物及模型制备健康七日龄SD大鼠65只,雌雄各半,12-19g,按照随机数字表法分为五组(n=13):空白对照组(B组),溶剂对照组(S组),丙泊酚组(P组),丙泊酚+法舒地尔组(PF组)和法舒地尔组(F组)。B组不做任何处理;S组腹腔注射脂肪乳7.5ml/(kg·d),连续7天;P组腹腔注射丙泊酚75ml/(kg·d),连续7天;PF组腹腔注射法舒地尔10ml/(kg·d)+丙泊酚75ml/(kg·d),连续7天;F组腹腔注射法舒地尔10ml/(kg·d),连续7天。除空白组外所有组注药容量均用脂肪乳定容至10ml/kg。麻醉后待翻正反射消失,将幼鼠放入持续低流量供氧(2L/min)的暖箱中,翻正反射恢复后放回母鼠身边(与母鼠分离时间不超过5h)。2标本采集及检测方法2.1末次注药后15min各组随机抽取5只检测血糖及血氧。2.2 Western blot法检测海马组织相关蛋白的表达情况末次腹腔注射24h后各组随机选取3只SD幼鼠1%戊巴比妥钠(0.003ml/g)麻醉,断头取脑,冰上分离海马组织。然后将海马剪碎放入加有裂解液和蛋白磷酸酶抑制剂的混合液中,电动匀浆器匀浆,离心机中4℃10000r/min离心5min,取上清,用Western-blot法检测海马组织中Bcl-2的表达情况。2.3 caspase3活性检测试剂盒检测海马组织caspase3的活性表达。末次注药后24h随机另取5只SD幼鼠,1%戊巴比妥钠(0.003ml/g)麻醉后断头取脑,冰上分离取出海马,匀浆提蛋白后加入试剂盒中反应底物,与组织中caspase3酶孵育反应,通过测定黄色产物的吸光度值检测组织中caspase3的活性表达。2.4 Morris水迷宫测试各组SD大鼠远期空间学习记忆能力各组随机选取的5只SD大鼠饲养至60天时进行Morris水迷宫测试。大鼠训练5天,每天2次,从下水开始到找到平台的时间记录为逃逸潜伏期。第6天,大鼠面壁轻放入撤去平台的水迷宫中游120s,记录穿越平台的次数。结果:1五组大鼠血氧饱和度及血糖值均在正常范围内,组间无明显差异(P0.05)。2 Western blot结果显示:各组与B组相比Bcl-2的表达均减少,有显著差异(P0.05)。P组与S组、PF组相比,Bcl-2的表达显著降低(P0.05)。PF组与F组相比Bcl-2表达量降低(P0.05)。3各组caspase3活性蛋白表达量均高于B组(P0.05)。P组显著高于其他各组(P0.01)。PF组与F组相比caspase3表达量也有显著差异(P0.05)。4 Morris水迷宫实验5天的训练中,第3天开始P组、PF组逃逸潜伏期较其他各组延长,有显著差异(P0.01)。与P组比较,PF组逃逸潜伏期缩短(P0.05)。第4、5天,P组和PF组逃逸潜伏期与其他组比较有显著差异(P0.01,P0.05)。PF组逃逸潜伏期长于F组(P0.05)。P组、PF组穿越平台次数明显少于其他组(P0.01);与P组比较,PF组穿越平台次数多于P组(P0.05);PF组穿越平台次数少于F组(P0.05)。B组、S组和F组之间逃逸潜伏期和穿越平台次数均没有统计学差异(P0.05)。结论:7日龄SD大鼠反复腹腔注射大剂量丙泊酚后,诱导海马组织细胞大量凋亡,对大鼠成年后的空间学习记忆功能有损害。应用法舒地尔可抑制凋亡发生,减轻丙泊酚的伤害作用。另外,在大鼠脑发育期反复的伤害刺激亦能损害幼年期大鼠脑正常发育,但对远期空间学习记忆能力影响较小。
【关键词】：丙泊酚 凋亡 法舒地尔 Bcl-2 caspase-3 水迷宫
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文缩写9-10
• 前言10-11
• 材料与方法11-18
• 结果18-20
• 附图20-23
• 附表23-25
• 讨论25-27
• 结论27
• 参考文献27-30
• 综述 全麻药物对发育期大脑的毒性机制及研究现状30-42
• 参考文献37-42
• 致谢42-43
• 个人简历43

【参考文献】

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1 谢玉波;徐林;熊文勇;刘敬臣;;异丙酚对大鼠海马CA1区神经元兴奋性突触传递的影响[J];中华麻醉学杂志;2006年05期

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本文编号：1092351