针刺环跳穴不同组织部位对坐骨神经损伤大鼠GAP-43和MAP-2表达的影响

发布时间：2017-11-11 09:35

  本文关键词：针刺环跳穴不同组织部位对坐骨神经损伤大鼠GAP-43和MAP-2表达的影响

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【摘要】：目的:基于电针在周围神经损伤治疗中良好的临床疗效,从实验角度探寻电针治疗周围神经损伤,通过针刺环跳穴所对应的不同组织—肌肉和神经干—观察坐骨神经损伤修复效果;以及坐骨神经损伤段中生长相关蛋白GAP-43和微管相关蛋白MAP-2的表达情况,比较针刺神经干与针刺肌肉在本病治疗效果上的差异。材料与方法:SPF级SD大鼠84只,体质量200±20 g,月龄2-3个月,雌雄各均,应用随机数字表将其分为空白组,钳夹模型组,横断模型组,钳夹深刺(神经干)组、钳夹浅刺(肌肉),横断深刺(神经干)组,横断浅刺(肌肉)组,7组,每组12只。采用改良邵金水等人的造模方法制成两种大鼠急性坐骨神经损伤模型:坐骨神经钳夹损伤模型和坐骨神经横断损伤模型[1]。造模成功第4天,开始进行电针干预,空白组不做任何处理,按常规喂养;模型组在造模成功后,保持相同条件,正常喂养;深刺组用电针针刺至环跳穴下坐骨神经干处,以大鼠出现下肢瞬间抽动为度,浅刺组用电针针刺至环跳穴下肌肉处,大鼠不出现瞬间抽动现象。电针治疗时间20 min/次,治疗10 d。治疗10 d后进行取材,10%水合氯醛(0.3 ml/100 g)腹腔注射麻醉,暴露患侧坐骨神经,切取包括损伤段在内上下各2 mm的坐骨神经,大鼠双侧腓肠肌。行为学通过斜板实验检测,考察大鼠经过电针不同环跳组织部位后运动功能的恢复;用电子天平测量双侧腓肠肌湿重,考察电针干预后大鼠肌肉组织萎缩和恢复情况;形态学用HE染色观察受损坐骨神经的形态变化;通过分子生物检测法,观察受损神经段中GAP-43和MAP-2的表达,所得结果进行统计分析。结果:1.斜板实验观察斜板实验结果表明,与空白组相比,两种模型组大鼠斜板实验倾斜角度均有降低(p0.01),提示坐骨神经受到损伤后,大鼠出现运动功能障碍;与钳夹模型组相比,横断模型组降低程度有明显差异(p0.01);电针治疗后,与横断模型组相比,横断浅刺组、横断深刺组大鼠斜板实验倾斜角度有提高(p0.01);与横断浅刺组相比,横断深刺组大鼠斜板实验倾斜角度的提升有差异(p0.05);与钳夹模型组相比,钳夹浅刺组、钳夹深刺组大鼠斜板实验倾斜角度有明显提高(p0.05);与钳夹浅刺组相比,钳夹深刺组大鼠斜板实验倾斜角度的提升有差异(p0.05);其中横断深刺组和钳夹深刺组已接近空白组水平。2.腓肠肌湿重恢复率腓肠肌湿重结果显示:与空白组相比,两种模型组大鼠患侧腓肠肌湿重均有一定程度的降低(p0.01);与钳夹模型组相比,横断模型组降低更为明显(p0.01);电针治疗后,大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率均有升高,与横断模型组相比,横断浅刺组、横断深刺组大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率有明显差异(p0.01);与横断浅刺组相比,横断深刺组大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率有差异(p0.05),与钳夹模型组相比,钳夹浅刺组、钳夹深刺组大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率有明显差异(p0.01);与钳夹浅刺组相比,钳夹深刺组大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率有差异(p0.01)。3.坐骨神经HE染色观察坐骨神经HE染色结果显示:空白组坐骨神经内轴突及雪旺细胞排列整齐;两种模型组内轴突及雪旺细胞不规则排列,雪旺细胞出现肿胀、破溃、甚则崩裂现象,横断模型组甚于钳夹模型组;电针治疗后,各组轴突及雪旺细胞排列、肿胀变性程度均有好转,横断深刺组优于横断浅刺组,钳夹深刺组优于钳夹浅刺组。4.免疫组化检测生长相关蛋白GAP-43:空白组中GAP-43在坐骨神经内少量表达,阳性胞核呈蓝色,胞浆呈棕褐色;与空白对照组比较,其余各组大鼠坐骨神经中GAP-43蛋白表达水平上调有显著差异(p0.01);电针治疗后,与横断模型组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与横断浅刺组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与钳夹模型组相比,钳夹浅刺组、钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与钳夹浅刺组相比,钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01)。微管相关蛋白MAP-2:空白组中MAP-2在坐骨神经内少量表达;与空白对照组比较,其余各组大鼠坐骨神经中MAP-2蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);电针治疗后,与横断模型组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与横断浅刺组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与钳夹模型组相比,钳夹浅刺组、钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与钳夹浅刺组相比,钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01)。5.western blot检测生长相关蛋白GAP-43:空白组中GAP-43在坐骨神经内少量表达;与空白对照组比较,其余各组大鼠坐骨神经中GAP-43蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);电针治疗后,与横断模型组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与横断浅刺组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.05);与钳夹模型组相比,钳夹浅刺组、钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与钳夹浅刺组相比,钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.05)。微管相关蛋白MAP-2:空白组中MAP-2在坐骨神经内少量表达;与空白对照组比较,其余各组大鼠坐骨神经中MAP-2蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);电针治疗后,与横断模型组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与横断浅刺组相比,横断深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与钳夹模型组相比,钳夹浅刺组、钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01);与钳夹浅刺组相比,钳夹深刺组蛋白表达水平上调有明显差异(p0.01)。结论:1.针刺环跳穴不同组织部位,可以提高坐骨神经损伤大鼠腓肠肌的肌力,防止肌肉萎缩,促进坐骨神经损伤大鼠运动功能恢复,深刺组疗效优于浅刺组。2.针刺环跳穴不同组织部位,可以减少神经元的变性和死亡,促进轴突生长,加快损伤神经的修复,深刺组疗效优于浅刺组。3.针刺环跳穴不同组织部位,可提高受损坐骨神经内生长相关蛋白GAP-43和微管相关蛋白MAP-2的含量,促进轴突与树突形成,加快受损神经的再生与恢复,深刺组疗效优于浅刺组。4.受损神经内微环境的改善,可能是针刺促进周围神经损伤再生及功能恢复的相关机制之一。
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245

【参考文献】

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1 武煜明;蔡恩丽;杨恩彬;唐柱生;;电针对坐骨神经修复过程中相应脊髓前角细胞变化的形态学观察[J];云南中医中药杂志;2010年04期

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本文编号：1170839