滋水清肝饮对内分泌治疗后乳腺癌小鼠单胺类神经递质的调节作用

发布时间：2017-12-26 12:11

  本文关键词：滋水清肝饮对内分泌治疗后乳腺癌小鼠单胺类神经递质的调节作用　出处：《南京中医药大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的观察滋水清肝饮对内分泌治疗后的乳腺癌移植小鼠脑内单胺类神经递质的影响,探讨其改善内分泌治疗后类绝经期综合征的机制,为滋水清肝饮在乳腺癌内分泌治疗领域的推广和应用提供理论依据。方法 选用40只雌性BALB/c小鼠,在乳腺癌造模及卵巢去势术成功后随机分为4组：a)实验组1(来曲唑+低剂量滋水清肝饮)；b)实验组2(来曲唑+高剂量滋水清肝饮)；c)空白组(蒸馏水);d)阳性对照组(来曲唑),每组各10只。实验组1中低剂量组小鼠灌服滋水清肝饮11.28g/Kg/d+来曲唑0.379mg/kg/d;实验组2中高剂量组小鼠灌服滋水清肝饮45.1g/Kg/d+来曲唑0.379mg/kg/d;空白组小鼠灌服等量蒸馏水；阳性对照组小鼠灌服来曲唑0.379mg/kg/d;喂养,第2、4周,分别从4组中各取5只小鼠,腹腔麻醉,腹主动脉取血2ml,检测外周血雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、去甲肾上腺素(NE)的水平。用1%戊巴比妥钠(40mL/kg)麻醉大鼠,开胸暴露心脏,剪开右心耳,经左心室插管至升主动脉,200mL生理盐水冲洗血液,然后用含4%多聚甲醛的0. 1mol/L的磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution, PBS, pH7.4,4℃,300mL灌注固定,先快后慢,灌毕,立即取脑,在金属平台上迅速分离出海马区,恒冷箱切片机切制含下丘脑的脑桥冠状切片。每只大鼠选取4套切片。1、用ELISA法检测E2、FSH、LH、NE.5-HT水平。2、Western Blot检测小鼠下丘脑组织中5-HT1AR、5-HT2AR蛋白的表达。结果通过荧光免疫测定ER、PR阳性证实乳腺癌4T1细胞株为激素依赖性乳腺癌细胞株。通过去卵巢小鼠阴道细胞涂片连续5天出现外底层细胞证实雌激素水平下降,卵巢摘除手术成功。与空白组及实验组1相比,实验组2能降低内分泌治疗后乳腺癌移植小鼠血清E2、FSH及LH水平,有统计学意义(P0.05)；与对照组相比,实验组2能降低E2、FSH、LH水平,有统计学意义(P0.05)；与对照组相比,实验组1不能降低E2、FSH、LH水平,无统计学意义(P0.05)。与空白组及实验组1相比,实验组2能增加内分泌治疗后的乳腺癌移植小鼠脑内5-HT、 NE的表达,有统计学意义(P0.05)：与对照组相比,实验组1不增加5-HT、NE的表达,无统计学意义(P0.05)。与空白组及对照相比,实验组均能提高绝经后乳腺癌移植小鼠下丘脑5-HT1AR蛋白表达水平,有统计学意义(P0.05)；但实验组2相比实验组1效果更明显,有统计学意义(P0.05)。与空白组及对照相比,实验组均能降低绝经后乳腺癌移植小鼠下丘脑5-HT2AR蛋白表达水平,有统计学意义(P0.05)；但实验组2相比实验组1效果更明显,有统计学意义(P0.05)。结论1、高剂量组滋水清肝饮能够降低内分泌治疗后乳腺癌移植小鼠血清E2、 FSH及LH水平,同时增加脑海马回5-HT及NE的表达。2、高剂量组滋水清肝饮能提高小鼠下丘脑具有散热降温作用的5-HT1AR蛋白表达水平,且能降低具有产热升温作用的5-HT2AR蛋白表达水平。3、滋水清肝饮在改善绝经后乳腺癌移植小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴(HPOA轴)或肾上腺轴等轴功能紊乱及调节神经递质方面具有明显的作用,从而为滋水清肝饮在乳腺癌内分泌治疗领域的推广应用提供了理论依据。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R273

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本文编号：1337197