基于蛋白质组学的三味檀香散对心肌缺血大鼠的保护作用机制研究

发布时间：2018-01-15 12:19

本文关键词：基于蛋白质组学的三味檀香散对心肌缺血大鼠的保护作用机制研究　出处：《沈阳药科大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：心血管系统疾病一直以来都严重威胁着人类的健康,有着很高的发病率和病死率,其中缺血性心脏病近年来的发病率呈不断上升的趋势。临床治疗缺血性心脏病的药物多以化学药物为主,其各有各的药理作用及作用机制,但不免也存在着不同程度的不良反应。除这些化学药物之外,还应该积极寻找其他疗效好且副作用小的药物。藏药作为藏医治疗的基础,有着悠久的应用历史。三味檀香散是一副传统的藏药复方,由广枣、檀香、肉豆蔻三味药材组成,具有清热、祛风、养心之功效,是藏医及蒙医治疗心热病的常用方。心热病与现代医学的心绞痛有相似之处,心绞痛是由于心脏缺血缺氧而引发的疾病。三味檀香散的临床效果甚好,但是其防治缺血性心脏病的机制却一直未被揭示清楚。前期的许多研究在探讨机制时都仅仅着眼于某一特定方面(如某一蛋白),而不是以多靶点整体的方式进行探讨。藏药复方的作用方式是多靶点、多层次的整体调节方式,其药理作用和作用机制的体现是藏药复方中众多有效成分的组合对机体生物分子网络进行调节的结果。因此,只有着眼于整个心肌蛋白组才能较为整体的揭示三味檀香散防治缺血性心脏病的确切机制。在本课题中,我们首先采用大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎所致心肌缺血的动物模型,通过测定血清生化指标及心脏功能指标,验证了三味檀香散的效果。方法为大鼠48只,随机分为6组,假手术组(蒸馏水10ml·kg-1)、模型组(蒸馏水10ml·kg-1)、复方丹参片组(0.3 g.kg-1)、三味檀香散组(0.5,1,2 g.kg-1),每组8只。各组大鼠分别按照给药剂量灌胃给药,给药容积为1ml.1OOg-1。连续灌胃给药20天,末次给药1h后,各组大鼠行心脏冠状动脉左前降支结扎手术,假手术组只穿线不结扎。结扎5天后测定血流动力学参数及血清LDH、CK、MDA及SOD活性。结果显示大鼠冠状动脉结扎5天后,与假手术组相比模型组大鼠血流动力学参数HR、LVSP、±dp/dt降低,LVEDP升高(P0.05,P0.01);三味檀香散组(2,1 g·kg-1)能够改善上述指标的变化,使血流动力学参数得到一定的恢复,且改善关系呈剂量依赖性。模型组大鼠冠状动脉左前降支结扎5天后,血清LDH、CK、MDA升高,SOD活性下降,与假手术组比较,LDH和SOD具有统计学差异(P0.05);三味檀香散组能够使大鼠血清LDH、CK、MDA降低,SOD活性升高,其变化趋势呈剂量依赖性,所以一定剂量的三味檀香散对冠状动脉结扎大鼠心肌缺血损伤有一定的保护作用。接着本课题采用TMT标记,HPLC/MS-MS的定量蛋白质组学方法,探讨了三味檀香散作用于心肌缺血损伤大鼠心肌蛋白质谱的变化。方法为大鼠18只,随机分为3组,假手术组(蒸馏水10ml·kg-1)、模型组(蒸馏水10ml·kg-1)、三味檀香散组(2g-kg-1),每组6只。各组大鼠分别按照给药剂量灌胃给药,给药容积为1ml·100g-1。连续灌胃给药20天,末次给药1h后,各组大鼠行心脏冠状动脉左前降支结扎手术,假手术组只穿线不结扎。结扎5天后,再次麻醉大鼠,取出心脏行定量蛋白质组学实验。结果显示模型组与假手术组相比,发现共有752个蛋白在模型组中表达有所变化,其中314个蛋白在三味檀香散组中的表达有所回调恢复,这些蛋白大多都是能量代谢相关的蛋白,包括糖酵解、脂肪酸氧化、三羧酸循环过程中的酶,线粒体电子传递链复合体以及抗氧化系统中的相关酶。我们重点关注了磷酸甘油酸变位酶、6-磷酸果糖激酶、肌酸激酶、线粒体电子传递链上的NADH脱氢酶(复合体Ⅰ)、细胞色素氧化酶(复合体Ⅳ)及乙酰辅酶A羧化酶-2,这几个蛋白在三味檀香散组中均有所上调,所以三味檀香散通过调节多个能量代谢异常通路起到缺血心肌保护的作用,尤其是它能够部分抑制脂肪酸β-氧化,刺激葡萄糖代谢,刺激氧化磷酸化过程来合理高效的利用ATP。
[Abstract]:In this study , the effects of three kinds of Chinese medicinal materials on the prevention and treatment of ischemic heart disease were studied . The changes of serum LDH , CK , MDA and SOD activity in rats with myocardial ischemia were studied . The oxidative phosphorylation process is stimulated to utilize ATP reasonably and efficiently .

【学位授予单位】：沈阳药科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【相似文献】