杨桃果总黄酮对L-NAME诱导的高血压大鼠心肌肥厚作用的研究

发布时间：2018-01-16 17:27

  本文关键词：杨桃果总黄酮对L-NAME诱导的高血压大鼠心肌肥厚作用的研究　出处：《广西医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:观察杨桃果总黄酮对一氧化氮合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine-methlester,L-NAME)所导致的高血压大鼠降血压作用,以及对大鼠心脏,心肌组织的影响,探究其降血压机制。方法:制备杨桃果总黄酮(total flavonoids of Averrhoa carambola L.fruit,TFACF)取新鲜杨桃果实榨汁,滤液加乙醇回流。石油醚,乙酸乙酯、正丁醇萃取。浓缩后,上大孔树脂富集,即可得到总黄酮。正常大鼠用颈总动脉插管法从十二指肠给予生理盐水、TFACF低剂量、中剂量和高剂量(300mg·kg-1、600mg·kg-1、1200mg·kg-1)利用MPA多媒体生物信号记录系统测定收缩压(systolic blood pressure,SBP)和舒张压(diastolic blood pressure,DBP)。并观察各组,给药后1、5、10、20、60、90、120、180min时血压和心率的变化。灌胃给予Wistar大鼠造模药一氧化氮合酶抑制剂(50 mg·kg-1·d-1),连续给药4周,复制高血压模型。造模成功后筛选出SBP≥140mm Hg和(或)DBP≥90mm Hg的50只大鼠,按照随机数字表法,分为5组,即TFACF低剂量组(300 mg·kg-1·d-1)、TFACF中剂量组(600 mg·kg-1·d-1)、TFACF高剂量组(1200 mg·kg-1·d-1),卡托普利组(10mg·mg·kg-1·d-1),模型对照组每组10只。另取10只正常Wistar大鼠作为空白组。按照大鼠质量于每日固定时间灌胃给药一次,空白对照组及模型组给予等容积的蒸馏水。每周固定时间用ALC-nibl无创尾动脉压测定系统测定大鼠的尾动脉压和心率。给药5周后,麻醉大鼠开腹,并从腹主动脉取血,摘取心脏,称取左室重量后并计算左室重量指数(left ventricular mass index,LVMI)。采用ELISA法测定大鼠血清中AngⅡ、ET-1、IL-6和TNF-ɑ浓度,用硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)浓度,用硫代巴比妥酸(TBA)法测定大鼠血清中MDA的含量。心肌组织切片,进行HE染色和Masson染色。采用免疫组化法观察I型胶原,III型胶原,TNF-ɑ,NF-κB,PPAR-γ在心肌组织中的表达情况。测定心肌组织中NF-κB m RNA的含量。结果:十二指肠给药后5分钟出现降压作用,TFACF高、中、低三个给药组均在20分钟出现最大降压,SBP和DBP值与空白组相比有显著性差异(P0.05或P0.01),其中高剂量组下降幅度最大,达到3 KPa且能持续40分钟。TFACF各剂量组均能剂量依赖性的降低SBP、DBP和MBP值。给药后120分钟各组血压逐渐上升。但对正常大鼠心率无影响。给药5周之后,与模型组比较,杨桃果总黄酮各剂量组血压均有不同下降的程度。其中中剂量组和高剂量组在给药第1周后,血压就出现下降趋势(P0.05),并且高剂量组在第4周开始血压维持在一个较稳定的水平。杨桃果总黄酮低剂量组在给药后的第2周,大鼠的血压开始有下降的趋势(P0.05)。但杨桃果总黄酮各剂量组和卡托普利组对心率影响不明显(P0.05)。与模型组相比,卡托普利组和TFACF各剂量组的LVMI值有不同程度的降低,高剂量组差异具有显著性(P0.01)。卡托普利组和TFACF高剂量组血清中AngⅡ(P0.01)、ET-1(P0.01)、IL-6(P0.01)、MDA(P0.01)和TNF-ɑ(P0.01)的含量均有所降低,NO含量有所升高(P0.01)。TFACF中剂量和低剂量组MDA和TNF-ɑ的含量呈下降趋势(P0.05),NO含量呈升高趋势,并呈现剂量依赖性的趋势。HE染色结果观察到,卡托普利组和TFACF治疗组明显缓解心肌细胞肥大程度,心肌间质纤维组织基本正常。Masson染色观察到,TFACF低剂量组有少量心肌细胞间质胶原沉积,卡托普利组TFACF高中剂量组无明显胶原沉积(P0.05)。TFACF中剂量组和低剂量组心肌组织有少量I型胶原纤维化表现。但卡托普利组和TFACF高剂量组心肌组织I型胶原蛋白的表达,明显降低(P0.01)。低剂量组心肌组织有少量III型胶原纤维化表现。卡托普利组TFACF中剂量组和高剂量组心肌组织III型胶原蛋白表达水平明显降低(P0.01)。卡托普利组和TFACF高剂量组的大鼠心肌组织TNF-ɑ蛋白表达降低,差异具有显著性(P0.05)。TFACF中剂量组和低剂量组也有部分TNF-ɑ蛋白表达,但TFACF中剂量组明显少于低剂量组,对TNF-ɑ的抑制呈现剂量的依赖性。TFACF高剂量组和卡托普利组心肌组织的NF-κB蛋白表达,明显降低(P0.01),差异具有显著性。但TFACF中剂量组和低剂量组心肌组织的NF-κB蛋白表达,与模型组相比,差异无统计学意义。卡托普利组、TFACF各剂量组的心肌组织PPAR-γ蛋白表达,明显升高(P0.01),差异具有显著性。与模型组比较,卡托普利组和TFACF高剂量组的心肌组织中NF-κB m RNA表达明显降低(P0.01),差异具有显著性。结论:杨桃果总黄酮对正常大鼠以及L-NAME诱导的高血压大鼠均具有降压作用,其机制可能与调节内源性缩血管活性物质ET-1、AngⅡ和舒血管活性物质NO之间的平衡,以及抑制IL-6和TNF-ɑ改善炎症反应状态,上调PPAR-γ,抑制NF-κB信号通路进而发挥保护心肌细胞的作用有关。
[Abstract]:Objective: To observe the effect of total flavonoids of carambola fruit on nitric oxide synthase inhibitor NG- nitro -L- arginine methyl ester (NG-nitro-L-arginine-methlester, L-NAME) hypertensive rats caused by the blood pressure lowering effect, and the effect on rat heart, myocardial tissue, and explore the mechanism of lowering blood pressure. Methods: the preparation of total flavonoids (total flavonoids of Averrhoa of carambola fruit carambola L.fruit, TFACF) from fresh carambola fruit juice, filtrate plus ethanol. Petroleum ether, ethyl acetate, n-butanol. After concentration, macroporous resin enrichment, obtained total flavonoids. Normal rats were given normal saline from the duodenum by carotid artery intubation, TFACF low dose, middle dose and high dose (300mg - kg-1600mg - kg-11200mg - kg-1) systolic blood pressure by MPA multimedia biological signal recording system (systolic blood pressure, SBP) and diastolic blood pressure (diastolic blood, pressure, DBP) were observed. 鍚勭粍,缁欒嵂鍚，

本文编号：1434114