仔猪补充甘油三酯DHA或磷脂DHA效能的比较及初步分析

发布时间：2018-01-27 04:15

  本文关键词： DHA 甘油三酯 磷脂 仔猪 大脑 营养　出处：《吉林大学》2014年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：二十二碳六烯酸（22:6n-3，DHA）是哺乳类大脑含量最为丰富的n-3脂肪酸，约占总脂肪酸的8%-14%(w/w)。人类胎儿脑部DHA蓄积在妊娠中期开始加速，一直持续到出生后前几个月，随后DHA在大脑重量不再增加的情况下继续沉积，直至18岁，此后大脑DHA含量保持稳定。婴儿，包括早产儿，可以利用前体物质18:3n-3(ALA)或20:5n-3(EPA)从头合成DHA。但普遍认为此过程效率低下，特别在目前n-6脂肪酸摄入相对较高的饮食背景下。许多以人类为对象的研究均证实DHA在大脑发育和视觉发展的重要作用，还有研究指出给婴儿补充DHA会带来长期的益处，但对于公认的贝利婴幼儿发展量表(Bayley scales)，补充DHA并没有表现出优势。 本世纪初期，欧美开始在婴幼儿奶粉中添加长链不饱和脂肪酸（LCPUFA）。虽然补充的DHA都是一样，但DHA的“载体”却有差别。自然界LCPUFA的载体主要有两种：甘油三酯(TG)或磷脂（PL）。奶制品中及人乳中DHA在PL较为富集，但由于TG含量远远超过PL，大部分DHA还是以TG形式存在。DHA-TG是目前婴幼儿奶粉中最常见的分子形式，但在LCPUFA来源转向单细胞生物及鱼油之前，市场上拥有大量富含DHA-PL和ARA-PL婴幼儿产品。由此看来，PL是DHA潜在的替代来源，且适用于婴幼儿奶粉。不同酯化形式的LCPUFA在体内的代谢、分布及吸收是不同的。十多年前本实验室给新生狒狒灌服13C标记的不同酯化形式ARA制剂，发现PL形式ARA在大脑整合效能是TG形式的2.1倍。而目前对于DHA类似的研究较少。本研究选用相似的方法探索不同酯化形式DHA在各组织器官，尤其大脑，整合效能的差异，并对效能差异及DHA的大脑整合的机制进行初步分析。 选取20只2-4日龄仔猪，饲喂同种、等量的商品化仔猪代乳品。饲喂14d后把仔猪分为对照组（n=4）、PL组（n=8）和TG组（n=8），给予实验组16只仔猪一次同位素标记DHA灌服，对照组不作处理。PL组仔猪灌服约20mg13C-DHA-phosphatidylcholine（13C-DHA-PC），DHA位于13C-DHA-PC的sn-2位置，16:0处于sn-1位置。TG组仔猪灌服约86mg13C-DHA-TG，DHA位于13C-DHA-TG的sn-2位置，sn-1和sn-3位置的脂肪酸均为16:0。灌服后6d，麻醉处死仔猪，取大脑、肝脏、心脏、视网膜、肌肉和血液样本，闪冻于液氮，，日后提取脂肪酸，选用GC-FID分析各组织脂肪酸的组成，使用GC-C-IRMS分析13C-DHA在大脑皮层灰质、突触体、视网膜、肝脏、红细胞及血浆磷脂组分等的蓄积。 为进一步探讨DHA在脑部整合机制，体外培养仔猪脑微血管内皮细胞，观察加入DHA对脂肪酸转运因子CD36、FATP1基因表达的影响，并检测相关核转录因子转录水平。 总体来说，灌服DHA制剂并未显著改变各组织器官的脂肪酸组成，但实验组之间13C-DHA在各组织的蓄积有差异。实验结果显示，灌服13C-DHA-PC仔猪大脑皮层13C-DHA蓄积量为0.37%Dose，灌服13C-DHA-TG仔猪的蓄积量为0.19%Dose。PL-DHA在大脑皮层蓄积效能是TG-DHA的1.9倍。与大脑皮层类似，突触体PL-DHA蓄积效能是TG-DHA的1.7倍。肝脏是蓄积13C-DHA最多的器官，PL组仔猪含有6.8%Dose，TG组含3.5%Dose。PL-DHA在肝脏蓄积的效能也是TG的1.9倍。在视网膜和红细胞也有类似发现。PL组视网膜13C-DHA蓄积的效能是TG组的2.2倍，红细胞为1.5倍。此外，本研究还发现不同酯化形式DHA生成22:5n-3(DPAn-3)也有差异。PL组大脑13C-DHA转化为13C-DPAn-3的量是TG组的2倍，且该转化过程在大脑比在肝脏和红细胞更为活跃。这些结果直接证实了磷脂作为DHA的“载体”相比TG具有更高的效能。 体外培养仔猪大脑微血管内皮细胞实验显示，DHA能显著提高细胞转运因子CD36、FATP1的基因转录水平，DHA发挥基因调节的作用是通过核转录因子PPARγ实现的。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：S828

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本文编号：1467539