桑黄多糖联合疲劳运动对大鼠抗氧化能力及免疫功能的影响及机制研究

发布时间：2018-03-19 22:24

本文选题：细胞因子　切入点：桑黄多糖　出处：《江西师范大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：[目的]：探讨桑黄多糖及疲劳性运动对实验性健康大鼠抗氧化能力、辅助性T淋巴细胞分化情况及其分泌因子平衡的影响。 [方法] 1桑黄多糖药用功效探索研究 1月龄雄性昆明小鼠28只，随机分为PLS、PL、S、C四组；PLS组为补药及烟雾暴露组，PL为补药组，S为烟雾暴露组，C设为安静组，每组7只。PLS、PL组按0.18ml/Kg灌胃桑黄粗多糖营养补剂；PLS、S组使用焦油量10mg/支、烟碱量0.8mg/支、一氧化碳量14mg/支的庐山牌香烟进行烟雾暴露；空白对照组同法给予生理盐水安慰。末次干预后立即麻醉处死小鼠，心脏取血，分离血清，肺部和肝脏组织。生化检测肝脏及肺部相关抗氧化指标；采用双抗酶联免疫吸附法（Elisa）检测大鼠肺组织白细胞介素6（IL-6）浓度，比较干预前后氧化应激小鼠抗氧化能力和免疫力变化情况。 2桑黄多糖联合力竭运动对SD大鼠抗氧化能力和免疫能力影响作用利用动物跑台根据经典理论建立疲劳运动模型，设置疲劳性运动组（E）、桑黄多糖补剂组（PL）、桑黄多糖补剂与疲劳运动组（PLE）、生理盐水安慰组（S）和正常对照组(C)，每组8只。PL、PLE组以0.3mg/Kg剂量单笼逐个喂食桑黄多糖提取物，E、PLE组严格遵照15m/min起步，坡度为0，逐级递增至34m/min，坡度为5的疲劳跑台运动训练。连续干预7周后心脏取血，分离血浆；同时分离动物脾脏、肝脏、胸腺等器官；检测大鼠血浆相关细胞因子和抗氧化酶水平，得到T辅助淋巴细胞1/T辅助淋巴细胞2（Th1/Th2）平衡变化；取同一部位肝脏左叶，用10%甲醛固定，，石蜡包埋，HE染色法做常规组织切片，400倍光镜下观察并比较各组织的病理状况。 [结果] 1氧化应激条件下桑黄多糖对昆明小鼠抗氧化能力的影响 ①组织CAT水平小鼠肺部组织匀浆CAT水平比较，S组与C组比较偏低（P0.05）；PL组较C组升高（P0.05）；PLS组较PL组偏低（P0.05）。肝脏组织匀浆CAT水平比较后，S组同肺部组织同，较C组偏低但无统计学差异。 ②组织GSH水平肺部组织中，PL组GSH含量相对于C组升高100.93%（P0.05），PLS组则升高61.39%（P0.01）；S组降低了14%（P0.01）。肝脏组织中PLS与PL组的GSH水平相对于C组都偏低（P0.05），其他组间无统计学差异。 ③肝脏GSH-PX水平各组肝脏组织GSH-PX水平未见差异 ④肝脏SOD水平S组与PL组相比偏低（P0.05）；各组间比较，S组SOD水平最低，PL组SOD值最高，但均无统计学差异。2氧化应激条件下桑黄粗多糖提取液对昆明小鼠免疫力的影响 PL组小鼠较C组小鼠肝脏组织IL-6水平偏高（P0.01）,S小鼠较C组小鼠肝脏组织IL-6水平偏低（P0.01）,PLS组小鼠肝脏组织IL-6水平与C组没有差异。 3桑黄多糖联合疲劳运动对大鼠肝脏的影响作用 PL组大鼠肝脏小叶肝板排列整齐，肝细胞呈单核排列，中性粒细胞密集均匀分布在肝脏细胞间隙中；E组大鼠肝脏切片可见肝脏中央静脉扩张淤血，肝窦淤血，窦内苦否细胞增生肥大，汇管区淋巴细胞浸润；PLE组大鼠切片呈肝板排列整齐，肝实质点灶，肝窦轻度淤血；C组大鼠肝脏细胞肝板排列整齐。 4桑黄多糖联合疲劳运动对SD大鼠血浆细胞因子分泌平衡的影响作用 ①IFN-γ水平PLE组较C组高5.24%（P≤0.05），PLE组血浆IFN-γ水平较PL组高（P≤0.05）。其他组间未见明显差异。 ②IL-2水平E组较C组明显升高（P≤0.05），其均值也大于PL组（P≤0.05）；PL组均值大于C组，但无统计学差异；PLE组与C组比较无差异。 ③IL-4水平E组较C组IL-4水平升高（P≤0.05）；E组大于PL组但无统计学差异；PL组IL-4水平小于C组（P≤0.05）；PLE组值大于PL组（P≤0.05）。 ④IL-5水平与C组比较，E组均值最大（P≤0.05）；PLE组值大于PL组，，但无统计学差异，PLE组值小于C组（P≤0.05）；PL组值小于C组（P≤0.05）。 ⑤CD4+与CD8+各组间均未见显著性差异。 5桑黄多糖联合疲劳运动对SD大鼠血浆抗氧化能力的影响 ①血浆GSH水平与C组比较，PL组值最高（P0.01）；E组值最小（P0.01）；PLE组GSH水平比C组偏低（P0.05） ②血浆SOD水平与C组比较，PL组值最大（P0.01）；E组值最小（P0.01）；其中PLE组SOD均值小于PL组（P0.01）,比C组高5.24%，但无统计学差异。 [结论] 1桑黄粗多糖提取液对氧化应激小鼠的抗氧化能力有明显的提高能力，且能有效提高氧化应激小鼠机体的抗氧化酶活性和数量。桑黄多糖提取液能提高健康小鼠免疫能力，使肝脏组织IL-6水平明显提高，并对氧化应激小鼠引起的IL-6偏低情况起到了填充补偿的作用。 2疲劳运动明显影响细胞因子分化平衡，导致Th1/Th2动态失衡，平衡漂移，向Th2移动，与其他研究不同的是疲劳运动组未见抑制Th1细胞因子分化，相反Th1细胞因子与Th2细胞因子都呈增长趋势，但Th1细胞因子分化程度小于Th2细胞因子。PLS组大鼠Th1/Th2与安静对照组大鼠未见明显差异，提示桑黄多糖补剂对疲劳运动引起的大鼠Th1/Th2失衡有修复作用。本实验选用的桑黄菌种提取多糖营养补剂对健康大鼠Th1/Th2平衡未见明显变化，提示此类菌株桑黄对健康大鼠Th1/Th2平衡影响效果不明显。 3常规组织切片显示疲劳运动引起大鼠炎症，出现运动性免疫抑制现象；桑黄多糖对健康大鼠肝细胞有保护作用。桑黄多糖对于运动引起的肝脏应激有修复作用。
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【学位授予单位】：江西师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：G804.2

【参考文献】