FENT-001镇静效应的阿片受体亚型选择性及其机制研究

发布时间：2018-04-12 11:02

本文选题：FENT-001 + 镇静　；参考：《广西医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：以阿片类药物为代表的镇痛药是疼痛治疗和诱导麻醉中至今仍然无可替代的药物。芬太尼及其衍生物可以替代吗啡达到理想的镇痛效应,且活性代谢产物少,并能降低癌痛患者的便秘和嗜睡等不良反应的发生率。新型芬太尼类化合物FENT-001具有镇痛活性强、起效快等特点。与芬太尼相同,FENT-001可通过作用于细胞膜上的阿片受体(μ,δ,κ三种亚型),激活G蛋白(主要是Gi蛋白),从而影响下游信号分子发生级联反应并产生生物学效应。有关芬太尼类衍生物的镇痛效应研究较多,但对其镇静效应研究相对较少。FENT-001镇痛效应与镇静效应的产生是否激活相同受体亚型?是否具有共同的信号通路?镇痛及镇静效应在发生机制上是否相互独立?这些问题均不清楚。本研究试图解释FENT-001镇静效应与阿片受体各亚型之间的关系,初步探讨其参与镇静效应的分子机制,以期为阐明阿片类药物镇静效应的机制提供初步的实验依据。研究目的:明确FENT-001与阿片受体各亚型的亲和力和激动活性,探讨FENT-001镇静效应的阿片受体亚型选择性及其贡献值。研究方法:(1)采用自发活动模型、转棒模型、翻正反射模型和肺功能参数测定等方法评价FENT-001所致镇静效应的量效时效变化;(2)采用阿片受体亚型特异性拮抗剂处理分析FENT-001镇静效应的亚型选择性,并采用μ阿片受体基因敲除小鼠进一步确证参与FENT-001镇静效应的受体亚型;(3)采用放射性配体结合实验和pka重分布实验考察fent-001对不同阿片受体亚型的亲和力和激动活性。研究结果:(1)在小鼠自发活动模型中,fent-001(80μg/kg,s.c.)处理后小鼠的自发活动里程数降低为盐水组的60%;在小鼠转棒模型中,fent-001(20μg/kg,s.c.)处理后使小鼠在给药后15min的转棒停留时间从180s缩短至50s;在小鼠翻正反射模型中,fent-001致小鼠翻正反射消失的ed50值为119.0μg/kg;在大鼠翻正反射模型中,fent-001(3.2-10.00μg/kg,i.v.)剂量依赖性地降低大鼠翻正反射消失的诱导时间,并延长其维持时间;采用大鼠肺功能参数测定,fent-001(5-40μg/kg,i.v.)剂量依赖性地降低大鼠的呼吸频率,在给药10min后呼吸频率降至基础值的40%。(2)μ阿片受体拮抗剂ctop(160ng/mouse,i.c.v.)和δ阿片受体拮抗剂nti(3mg/kg,s.c.)均能拮抗fent-001(5-80μg/kg,s.c.)所致小鼠自发活动的减少,而κ阿片受体拮抗剂nor-bni(0.5mg/kg,s.c.)对fent-001所致自发活动的减少没有影响。ctop(160ng/mouse,i.c.v.)和nti(3mg/kg,s.c.)均能显著翻转fent-001(20μg/kg,s.c.)缩短小鼠转棒停留时间的作用,而nor-bni(0.5mg/kg,s.c.)对小鼠转棒停留时间无显著影响。ctop(2μg/rat,i.c.v.)对抗fent-001(8μg/kg,i.v.)所致大鼠翻正反射消失,显著延长诱导时间,对维持时间有缩短趋势,但无统计学意义;nti(5mg/kg,s.c.)和nor-bni(5mg/kg,s.c.)对fent-001(8μg/kg,i.v.)所致大鼠翻正反射消失的诱导时间和维持时间均未表现出对抗作用。ctop(2μg/rat,i.c.v.)拮抗fent-001(5μg/kg,i.v.)所致的呼吸抑制作用,而nti(5mg/kg,s.c.)和nor-bni(5mg/kg,s.c.)对fent-001所致的呼吸抑制均未表现出拮抗作用。fent-001不引起μ阿片受体基因敲除小鼠的自发活动抑制作用,也不能降低小鼠转棒停留时间和引起翻正反射消失。(3)放射性配体饱和实验结果显示,[3h]diprenorphine(0.0625-2nm)与μ、δ、κ阿片受体均有可饱和性结合,其Kd值分别为1.09±0.60 nM、1.76±1.51 nM、0.61±0.84 nM,Bmax值分别为1.76±1.46 pmol/mg protein、9.70±8.24 pmol/mg protein、1.28±1.72 pmol/mg protein。放射性配体竞争结合实验结果显示FENT-001对m阿片受体具有高亲和力,Ki值为0.03±0.11 nM,对δ、κ阿片受体的Ki值分别为20±3.3 nM和71±17 n M。PKA重分布实验结果显示FENT-001对μ、δ、κ阿片受体均有激动活性,其EC50值分别为0.9±0.5 nM、8.7±1.3 n M、44.2±3.6 nM。结论:(1)μ阿片受体在FENT-001镇静效应中起关键作用,δ阿片受体可能参与FENT-001的镇静效应,κ阿片受体不参与FENT-001的镇静效应。(2)FENT-001对μ阿片受体具有高亲和力和激动活性。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R96

【参考文献】