Fgl2基因过表达对自身免疫性心肌炎大鼠心功能及相关炎症因子影响的研究

发布时间：2018-05-13 15:47

  本文选题：免疫性心肌炎 + 凝血酶原酶（Fgl2）　； 参考：《南昌大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的： 本研究旨在建立慢病毒介导凝血酶原（Fibrinogen-like protein2，Fgl2）基因过表达自身免疫性心肌炎大鼠模型。探讨Fgl2基因过表达对自身免疫性心肌炎大鼠心功能及相关炎症因子水平的影响。 方法： 雄性Lewis大鼠32只，体重190-210g，随机分为4组。①Fgl2慢病毒过表达自身免疫性心肌炎组8只：对大鼠诱导免疫性心肌炎模型的同一天，以5x107IU/只的量尾静脉注射Fgl2过表达慢病毒载体。②空载体（GFP）自身免疫性心肌炎组8只：对大鼠诱导免疫性心肌炎模型的同一天，以5x107IU/只的量尾静脉注射GFP慢病毒载体。③自身免疫性心肌炎组8只。④正常组8只。自然光照，普通饲料喂养，自由进水。第60天，将大鼠先剃去胸部鼠毛后麻醉，，麻醉后检测大鼠的左室短轴缩短率（LVFS），然后计算其左室射血分数（LVEF），记录其心率（HR）。处死老鼠后开胸,提取右房静脉血，分离血清，用于检测血清脑钠肽、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素17（BNP、TNF-α、IL-6、IL-17）。取出心脏，使用生理盐水进行冲洗；水平面切开，将心脏分为心房及心室两部分，其中心底部分进行甲醛固定，切片，进行HE染色后观察其病理形态，心室部分进行冰冻切片，荧光显微镜下观察带荧光病毒转染情况，提取心肌组织总蛋白，Werstern blot检测Fgl2蛋白表达。 结果： （1）自身免疫性心肌炎组与正常组大鼠组的饮食饮水量和活动量对比，其饮食量和饮水量明显减少； （2）荧光显微镜检测：Fgl2基因过表达自身免疫性心肌炎组，荧光显微镜下观察血管壁及心肌细胞间血管内壁可见绿色荧光； （3）荧光定量PCR检测Fgl2基因mRNA表达情况，可发现Fgl2基因过表达自身免疫性心肌炎组高于其他3组，而空载体自身免疫性心肌炎组和自身免疫性心肌炎组两者之间无明显差异，但高于正常对照组； （4）Western blot检测Fgl2目的基因蛋白表达：对比于正常组相比，自身免疫性心肌炎组与GFP空载体组Fgl2蛋白表达高于正常组，但两组之间无明显差异；Fgl2基因过表达自身免疫性心肌炎组较自身免疫性心肌炎组Fgl2蛋白表达更高； （5）心肌切片HE染色：在光镜下正常组大鼠心肌细胞的胞体,胞核大小一致,胞浆染色均匀，其心肌纤维走行整齐；自身免疫性心肌炎及空载体自身免疫性心肌炎组表现为心内膜下小灶性坏死；Fgl2过表达自身免疫性心肌炎组可见左右心室外膜大面积坏死，室间膈广泛性心肌坏死，纤维细胞增生，可见大量中性粒细胞、噬酸性细胞； （6）大鼠心功能检测：对比于正常组，Fgl2基因过表达自身免疫性心肌炎组的LVFS、LVEF及HR均降低，差异有统计学意义（P0.05）；Fgl2基因过表达自身免疫性心肌炎组与自身免疫性心肌炎组比较LVEF、LVFS更低，差异有统计学意义（P 0.05)；空载体自身免疫性心肌炎组和自身免疫性心肌炎组LVFS、LVEF及HR的结果相似,因此无统计学意义（P＞0.05）。 结论： （1）慢病毒介导的Fgl2基因过表达载体能明显上调Fgl2基因过表达自身免疫性心肌炎组心肌细胞Fgl2的表达； （2）慢病毒介导的Fgl2基因过表达后可恶化免疫性心肌炎大鼠心功能； （3）Fgl2基因过表达提高免疫性心肌炎大鼠心肌细胞相关炎症因子水平，使免疫应答反应朝着免疫损伤进展应。
[Abstract]:Purpose :

The aim of this study was to establish a rat model of chronic viral - mediated prothrombin - like protein2 ( Fgl2 ) overexpression autoimmune myocarditis in rats . The effects of overexpression of Fgl2 gene on cardiac function and related inflammatory factors in autoimmune myocarditis rats were investigated .

Method :

The rats were randomly divided into four groups : 鈶

本文编号：1883824