下丘脑腹外侧视前区与结节乳头体核对大鼠脑电活动的调节

发布时间：2018-05-20 00:09

  本文选题：腹外侧视前区 + 结节乳头体核　； 参考：《安徽医科大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的 下丘脑腹外侧视前区（ventrolateral preoptic area，VLPO）与结节乳头体核（tuberomammillary nucleus，TMN）是中枢神经系统内调控睡眠觉醒的关键脑区。γ-氨基丁酸（GABA）与组胺（HA）则是参与睡眠觉醒调节的神经体液因子。本研究采用大鼠脑立体定位、核团内埋管、微量注射以及多导睡眠描记技术等方法观察并记录大鼠睡眠觉醒时相的变化，探讨兴奋性神经递质L-谷氨酸（L-Glu），GABAA受体阻断剂荷包牡丹碱（Bicuculline，Bic）以及组胺H1受体阻断剂（Triprolidine， Trip）对大鼠睡眠觉醒周期脑电活动的影响。 方法 1.模型建立雄性成年SD大鼠，SPF级，体质量270-290g。戊巴比妥钠（50mg·kg 1）行腹腔注射麻醉后，安装脑电和肌电电极用于进行多导睡眠描计，将两个不锈钢材质微量注射引导管分别插入大鼠VLPO区（AP：0.36mm；R：1.30mm；H：7.00mm）以及TMN区（AP：3.96mm；R：1.50mm；H：7.70mm）供核团内给药使用。插管与记录电极均以牙科粘固粉固定于颅骨表面，并将引导脑电和肌电的电极通过铜质导线连接到微型插座上。大鼠术后置于隔音室中恢复一周，记录前三天连接EEG/EMG导线，以予适应记录状态。 2.动物分组动物随机分为七组：晚间对照组［TMN与VLPO均微量注射人工脑脊液（artificial cerebrospinal fluid，ACSF），即TMN+ACSFVLPO+ACSF组］和晚间实验组［（1）TMN内微量注射ACSF以及VLPO内微量注射L-Glu，即TMN+ACSFVLPO+L-Glu组；（2）TMN内微量注射Bic以及VLPO内微量注射ACSF，即TMN+BicVLPO+ACSF组；（3） TMN内微量注射Bic以及VLPO内微量注射L-Glu，即TMN+BicVLPO+L-Glu］；日间对照组[VLPO与TMN均微量注射ACSF，即VLPO+ACSFTMN+ACSF组］和日间实验组（[1）VLPO内微量注射ACSF以及TMN内微量注射L-Glu，即VLPO+ACSFTMN+L-Glu组；（2）VLPO内微量注射Trip以及TMN内微量注射L-Glu，即VLPO+TripTMN+L-Glu组]。 3.药物微量注射通过不锈钢引导管分别向目的核团TMN以及VLPO内微量注射ACSF或者药液（L-Glu，Bic，Trip）1μl，注射速度为1μl·min 1，注射完毕留针1min防止药液溢出。药物注射时间为22:00-22:20（10:00-10:20）。 4.多导睡眠描计及数据分析每次描记从药物注射前2小时（20:00/08:00）开始，连续记录24小时。以10s为一分段时间，将睡眠觉醒周期分为：（1）觉醒期（wakefulness，W）；（2）非快动眼睡眠期（non-rapid eye movement，NREM）；（3）快动眼睡眠期（rapid eye movement，REM）。NREM睡眠和REM睡眠之和为总睡眠时间（total sleep time，TST）。 5.组织学鉴定制备大鼠鼠脑冰冻切片后采用尼氏染色法进行染色，镜下观察鉴定核团插管位置以及药物注射位点，仅对定位准确的大鼠进行实验数据的统计。 6.统计学方法采用SPSS17.0软件进行统计分析，实验数据采用均数±标准误（x±se）表示，组间样本比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA）。以P 0.05视为差异具有统计学意义。 结果 1．与TMN+ACSFVLPO+ACSF组（n=8）相比，TMN+ACSFVLPO+L-Glu组（n=7）VLPO内微量注射L-Glu可使大鼠觉醒减少21.6%（163.71±8.17vs208.83±7.89，P 0.01），非快动眼睡眠（NREM）和总睡眠时间（TST）分别增多56.4%（112.61±7.37vs71.99±6.34，P 0.01），49.5%（136.29±8.16vs91.17±7.87，P 0.01），快动眼睡眠（REM）无明显改变，差异无统计学意义； 2．与TMN+ACSFVLPO+ACSF组（n=8）相比，TMN+BicVLPO+ACSF组（n=7）内微量注射Bic于TMN对大鼠的觉醒、NREM睡眠无显著影响，差异无统计学意义； 3．与TMN+BicVLPO+ACSF组（n=7）相比，TMN+BicVLPO+L-Glu组（n=8）药物注射对大鼠睡眠觉醒无明显改变，而与TMN+ACSFVLPO+L-Glu组（n=7）相比，TMN+BicVLPO+L-Glu组（n=8）中Bic和L-Glu相继分别微量注射于TMN和VLPO后，大鼠觉醒增加25.6%（163.71±8.17vs205.56±10.12，P 0.01），REM睡眠、NREM睡眠以及TST分别减少52.1%（23.67±2.78vs11.33±2.78，，P 0.01），26.2%（112.61±7.37vs85.09±8.09，P 0.05），30.7%（136.29±8.16vs94.42±10.12，P 0.01）； 4．与VLPO+ACSFTMN+ACSF组（n=7）相比，VLPO+ACSFTMN+L-Glu组（n=8）TMN内微量注射L-Glu可使大鼠觉醒增加58.0%（113.35±4.32vs179.00±13.91，P 0.01），NREM睡眠和TST分别减少33.4%（172.05±3.57vs114.51±13.07，P 0.01），35.2%（186.63±4.32vs120.99±13.91，P 0.01）； 5．与VLPO+ACSFTMN+L-Glu组（n=8）相比，VLPO+TripTMN+L-Glu组（n=7）中Trip和L-Glu相继分别微量注射于VLPO和TMN后，大鼠觉醒减少30.2%（179.00±13.91vs125.03±7.68，P 0.01），REM睡眠、NREM睡眠以及TST分别增加199.3%（6.48±2.68vs19.40±2.85，P 0.01），35.9%（114.51±13.07vs155.57±6.80，P 0.05），44.6%（120.99±13.91vs174.97±7.66，P 0.01）。 结论 VLPO可通过TMN内GABAA受体抑制其神经元活动而产生促睡眠作用，TMN内神经元的活性增强对觉醒的产生和维持起促进作用。
[Abstract]:Purpose

The effect of excitatory neurotransmitter L - glutamic acid ( L - Glu ) , GABAA receptor blocking agent ( Bicuculline , Bic ) and histamine H1 receptor blocking agent ( Trip ) on sleep arousal cycle in rats was investigated .

method

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本文编号：1912302