奈比洛尔对肾性高血压大鼠肾脏的保护作用及其与ADMA的关系

发布时间：2019-03-14 10:02

【摘要】：目的:探讨奈比洛尔对肾性高血压大鼠肾脏的保护作用及其与非对称性二甲基精氨酸(ADMA)的关系,为肾性高血压的治疗提供新思路。方法:选取体重150g雄性wistar大鼠,用内径0.2mm银夹夹闭左肾动脉,制备两肾一夹(2K1C)肾性高血压大鼠模型。术后4周用尾袖套法进行无创血压测量,若收缩压(SBP)大于160mmHg认为模型成功。同等体重健康大鼠仅分离左肾动脉,但是不夹闭肾动脉,作为伪手术对照组(i.g蒸馏水)。2K1C大鼠随机分成4组(n=6):(1)2K1C肾性高血压模型组(i.g蒸馏水);(2)2K1C+奈比洛尔组(i.g 10mg/day);(3)2K1C+阿替洛尔组(i.g 80mg/day);(4)2K1C+卡托普利组(i.g 20mg/day),给药8周。术前和术后不同时间段测量SBP并收集24小时尿液,用以检测尿液中N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿肌酐(Ucr)、β2-微球蛋白(β2-MG)、微量白蛋白(mALB)和尿蛋白排泄量并计算内生肌酐清除率(Ccr)。实验结束时,大鼠麻醉后经腹主动脉采血,用以检测血浆一氧化氮(NO)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血浆肾素活力(PRA)、血管紧张素II(AngII)和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)浓度;并快速分离左右肾脏,用于观察肾脏结构以及western blotting实验;HE染色观察肾脏结构;PAS染色观察肾小球系膜增生;Masson及α-SMA免疫荧光观察肾脏纤维化;KIM-1、nephrin免疫荧光观察肾小管和足细胞的损伤;透射电镜观察肾小球滤过屏障完整性,足细胞形态及基底膜厚度;蛋白印迹法测iNOS,eNOS,nNOS,DDAH1和2,PRMT1蛋白的表达。结果:与伪手术组比较,2k1c模型组肾动脉狭窄术后1周sbp开始升高,在第4周达到高值,并稳定持续至术后12周,高达183.22±2.64mmhg。奈比洛尔、阿替洛尔和卡托普利均可逐渐降低2k1c大鼠sbp。2k1c大鼠的尿液体积和饮水量在术后1周急剧升高,2周达到峰值,尿肌酐在术后4周内明显低于伪手术组(p0.05),这种差异逐渐缩小,到实验结束时,此三项改变在两组之间无显著性差异。与伪手术组比较,2k1c组尿蛋白排泄量在术后持续稳定升高至术后12周,奈比洛尔和卡托普利均可降低2k1c大鼠尿蛋白,奈比洛尔效果较卡托普利显著(p0.05)。2k1c组大鼠血浆、左肾组织中angii和pra与伪手术组比较有上升趋势但无统计学差异,但右肾组织中的angii的含量明显高于伪手术组,三药都能降低右肾angii水平。he染色观察到2k1c组大鼠肾小球代偿性肥大,pas染色和masson染色及α-sma荧光染色显示肾小球系膜增生、肾小球和间质纤维化程度明显增加;透射电镜提示2k1c大鼠肾小球滤过屏障基底膜厚度明显高于伪手术组,足细胞足突广泛融合,nephrin免疫荧光显示足细胞nephrin表达减少,上述改变尤以右侧肾脏显著。除阿替洛尔外,奈比洛尔和卡托普利均可不同程度改善2k1c大鼠上述改变,尤以奈比洛尔显著(p0.05)。2k1c组大鼠尿液β2-mg/ucr,malb/ucr,nag的浓度和肾小管kim-1表达明显增加,给予奈比洛尔能够有效降低β2-mg/ucr,malb/ucr,nag浓度和kim-1的表达。并且奈比洛尔能够降低scr和bun的水平,提高ccr(p0.05)。虽然2k1c与伪手术组血浆no无明显差异,但2k1c组大鼠左肾nnos和左右两肾enos表达明显低于伪手术组,左肾inos表达则明显高于伪手术组,奈比洛尔能够增加2k1c大鼠血浆no水平,上调右肾nnos和enos表达,下调左肾inos的表达。另一方面,2k1c组血浆adma增高,虽然两侧肾脏ddah1表达无显著性差异,但prmt1表达显著增加,且左肾ddah2表达显著降低(p0.05)。奈比洛尔,阿替洛尔,卡托普利虽然不同程度影响prmt1,ddah1,2表达,但仅奈比洛尔降低2k1c大鼠血浆adma水平。结论:奈比洛尔可显著改善2K1C肾性高血压大鼠肾功能损伤和结构变化,此作用可能与其调节PRMT/ADMA/DDAH代谢轴有关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R965

【参考文献】