Fas凋亡抑制分子FAIM 1表达缺失诱发单纯性肥胖的初步研究

发布时间：2019-07-11 10:50

【摘要】：利用肥胖患者血液和肥胖动物模型研究Fas凋亡抑制分子FAIM 1与单纯性肥胖的关系,为揭示单纯性肥胖发生的分子机理和诊治肥胖提供新的实验基础。检测40例单纯性肥胖患者和17例正常者血液白细胞的FAIM 1蛋白的表达量,分析FAIM 1与单纯性肥胖的相关性。为进一步揭示FAIM 1与单纯性肥胖发生、发展的内在关系,利用高脂饲料建立肥胖模型,并测定肥胖组和对照组大鼠的体重和血糖水平;造模成功的肥胖组大鼠和对照组大鼠禁食12h,麻醉心脏取血,分析血脂中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)的变化;取肥胖组和对照组大鼠的附睾脂肪垫和肾周脂肪,分析重量变化;取肥胖组和对照组大鼠,利用Western-blot检测FAIM 1及胰岛素受体β(IRβ)的表达变化。实验结果表明:与正常者相比,单纯性肥胖患者血液白细胞的FAIM 1表达量平均减少36.4%;与对照组相比,肥胖组大鼠血清TC、TG和LDL-C分别增加37.1%、25.6%和39.1%,而HDL-C则降低33.3%;肥胖组大鼠附睾脂肪垫和肾周脂肪分别是对照组的1.85倍和2.24倍;与对照组相比,肥胖组大鼠肝脏FAIM 1、IRβ的表达量分别降低45.9%和32.6%,与临床血液样本的检测结果一致。研究表明,FAIM 1表达与单纯性肥胖发生具有显著的负相关性,FAIM 1可成为单纯性肥胖诊断和治疗的新靶点。
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正常者与肥胖患者血液白细胞的FAIM1表达量比较及与BMI的相关性Fig．1ComparisonofFAIM1expressionlevelsinleukocytesbetweenthenormalindividualsandobesepatientsandtherelationofFAIM1andBMI

图片说明：噱椅孪乱?%脱脂奶粉封闭2h，分别加入FAIM1抗体和IＲβ抗体、室温孵育2h，TBST洗涤3次，每次8min，加入辣根过氧化物酶标记的IgG，室温孵育1h，TBST洗涤3次，每次5min，利用ECL试剂盒曝光蛋白条带，检测在肥胖SD大鼠模型与正常对照鼠肝组织中FAIM1与IＲβ表达的差异。1．4统计学处理应用SPSS19．0软件进行统计学分析，实验数据均以均数±标准差(M±S．E．M)表示，组间比较采用t检验，P＜0．05为差异有统计学意义。2结果与分析2．1临床血液样本的分析以正常者作为对照，肥胖患者血液白细胞的FAIM1表达量显著下降(图1a)。对17例正常者和40例肥胖者血液白细胞的FAIM1表达量进行统计分析发现，以正常者作为对照，肥胖患者血液白细胞的FAIM1表达量平均减少36．4%(图1b)。FAIM1表达量与肥胖程度(BMI)的相关性分析显示，FAIM1表达量与肥胖程度(BMI)呈显著性负相关(Ｒ=－0．833)(图1c)。图1正常者与肥胖患者血液白细胞的FAIM1表达量比较及与BMI的相关性Fig．1ComparisonofFAIM1expressionlevelsinleukocytesbetweenthenormalindividualsandobesepatientsandtherelationofFAIM1andBMI(a)AssayofFAIM1proteinexpressioninwhitebloodcellsofthenormalindividualsandobesepatientsbyWesternblot(b)StatisticalanalysisofFAIM1proteinexpressioninwhitebloodcellsfor17casesofnormalindividualsand40casesofobesepatients(c)CorrelationanalysisofFAIM1proteinexpressionandBMI＊＊P＜0．01，，normalindividualsversusobesepatients2．2肥胖SD大鼠模型的构建6周龄雄性SD大鼠利用高脂饲料喂养，正常对照组则用相应的对照饲料连续喂养10周后，与正常对照组相比，肥胖组的大鼠空腹血糖和体重分别增加11．7%和26．5%(表2)，表明高脂饲料喂养的SD?
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图片说明： ?高脂饲料喂养的肥胖SD大鼠与正常对照鼠的附睾脂肪垫和肾周脂肪的重量比较Table4Comparisonoftheweightoftheepididymalfatpadandperirenalfatbetweenthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDrats(M±S．E．M．)对照组肥胖组附睾脂肪垫(g)12．12±1．0922．39±2．12＊＊肾周脂肪(g)3．79±1．518．48±0．46＊＊＊＊P＜0．01，高脂饲料喂养的肥胖SD大鼠与正常对照鼠比较2．5高脂饲料喂养肥胖SD大鼠与正常鼠的FAIM1与IＲβ的表达检测与正常组相比，肥胖组的大鼠肝脏中FAIM1和IＲβ表达量分别下降45．9%和32．6%(图2a、图2b)。实验结果表明，肥胖组的大鼠肝脏中不仅FAIM1的表达显著减少，而且胰岛素通路和能量代谢相关的IＲβ的表达也明显减少，这些与能量代谢相关的关键蛋白的表达异常降低可能诱导了肥胖的发生与发展。图2高脂饲料喂养肥胖SD大鼠与正常鼠肝组织中FAIM1和IＲβ蛋白表达量比较Fig．2ComparisonofFAIM1andIＲβexpressioninlivertissuebetweenthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDrats(a)AssayofFAIM1andIＲβproteinexpressioninlivertissueofthenormalandhigh-fatdiet-fedobeseSDratsbyWesternblot(b)ＲelativeexpressionassayforFAIM1andIＲβproteinexpressionin(a)＊＊P＜0．01，normalSDratsversushigh-fatdiet-fedobeseSDrats3讨论FAIM1蛋白通过与Fas受体的直接相互作用以及通过稳定XIAP(一种有效抑制半胱天冬蛋白酶的抗凋亡蛋白)水平来抑制细胞因子FasL和TNFα诱导的细胞凋亡。FAIM1作为一种新发现的功能调节蛋白，近年来不断发现它的表达异常与某些疾病关系密切［8，13-14］。目前关于FAIM1蛋白与肥胖关系的研究罕有报道。近期本课题组及国外合作者的研究已发现FAIM1的表达异常与肥胖的发生、发
【作者单位】： ;" target="_blank">暨南大学细胞生物学系暨南大学生物医药研究院广东省生物工程药物重点实验室基因工程药物国家工程研究中心;广州中医药大学第二附属医院<广东省中医院>;
【基金】：国家自然科学基金(81373314,81473688) 广东省自然科学基金(2015A030313333,2015A030313345) 广东省科技计划(2014A020210015,2013B090500105) 中央高校基本科研业务费专项资金(21615412) 广州市科技计划(201707010245)资助项目
【分类号】：R589.2

【参考文献】