电针对MCAO大鼠脑皮质臂板蛋白3a和轴突生长导向因子-1表达的影响

发布时间：2019-08-01 15:23

【摘要】：目的：观察局灶性脑梗死大鼠皮质轴突生长导向因子-1(netrin-1，Ntn1)和臂板蛋白3a(semaphorin-3a，sema3a)的表达及电针干预对其表达的影响。探索Ntn1与sema3a在电针对脑梗后神经可塑性影响中的作用。 方法：将135只雄性Sprague-Dawle（SD）大鼠分为正常组(n=15)、模型组(n=60)及电针组(n=60)。利用线栓法制作大脑中动脉闭塞（middlecerebral artery occlusion，MCAO）模型，并行longa评分。2，3，5—氯化三苯基四氮唑（TTC）染色与苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining， HE)染色确定造模成功。电针选穴“内关”(PC6)，“足三里”(ST36)，刺激参数为疏密波，频率80～100Hz，强度以保持针刺局部轻微颤抖为度，留针30min。电刺激在大鼠麻醉苏醒后90min进行。分别在术后1d、3d、7d、14d时，对术后大鼠进行神经功能评分(modified neurologic severity scores，mNSS)，利用免疫组化检测缺血侧大脑脑皮质中Ntn1、sema3a、神经丝蛋白200(NF200)分布和表达，免疫印迹法检测缺血侧大脑皮质Ntn1和sema3a的蛋白表达。 结果：免疫组化结果显示在各个时相点大鼠脑皮质均表达Ntn1和sema3a，主要集中在细胞质阳性表达。Westernblot检测结果显示，与正常组相比，模型组Ntn1蛋白的表达水平在脑梗死后1d即开始明显上升(P＜0.01)，3d时呈上升趋势(P＜0.01)，7d时达峰值(P＜0.01),14d时仍显著高于基础水平(P＜0.01)，电针组与模型组相比，Ntn1蛋白表达趋势相同，但表达量明显高于模型组，术后1d、3d、7d、14d时有统计学差异(P＜0.05，P＜0.01).与正常组相比，模型组sema3a蛋白的表达水平在术后1d即开始上升(P＜0.01),7d时达高峰(P＜0.01),14d时仍高于基础水平(P＜0.01)。同时相点电针组与模型组相比sema3a均呈现低表达，1d、3d和7d、14d时有统计学差异(P＜0.05，P＜0.01)，峰值同样在7d时出现。Western blot检测结果与免疫组化分析结果基本相符。7d、14d时电针组与模型组相比mNSS评分存在统计学差异(P＜0.05),14d时电针组与模型组相比NF200的表达量存在统计学差异(P＜0.05)。结论局灶性脑梗死后大鼠皮质Ntn1与sema3a表达明显上调，给予电针干预后可提高Ntn1的表达并抑制sema3a的表达，促进轴突的再生与修复，这可能是电针促进脑梗死后神经功能恢复的机制之一。
【图文】：

学差异( P ＜ 0. 01) 。电针组sema3a 的表达趋势与模型组相符，但表达量明显低于模型组，1、3、7、14 d 时与模型组相比有统计学差异( P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01).见图2（Fig.2）、图3（Fig.3）、图4（Fig.4）、图5(Fig.5)a: P＜0.05，b: P＜0.01，与正常组比较; c: P＜0.05，d: P＜0.01，与模型组比较图2 不同时相点各组大鼠脑皮质Ntn1 的平均光密度值

图6 Western blot 检测不同时相点各组大鼠脑皮质Ntn1 与sema3a 的表达Figure 6 the result of Western blotting with Ntn1 and sema3aa: P ＜ 0. 01 与正常组比较; b: P ＜ 0. 05，c: P ＜ 0. 01 与模型组比较图7 不同时相点各组大鼠脑皮质Ntn1 的灰度值a: P ＜ 0. 01 compared with normal group; b: P ＜ 0. 05，c: P ＜ 0. 01
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R245.97

【参考文献】

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本文编号：2521831