Ⅳ和Ⅵ型胶原在皮肤创伤再生和瘢痕愈合中的表达差异

发布时间：2020-03-06 13:29

【摘要】：背景和目的皮肤损伤后愈合方式包括再生修复(完全愈合)和瘢痕增生(不完全愈合)。创面愈合是一个复杂有序的过程,有多种细胞、细胞因子、胶原及信号分子均参与这一过程,并对创伤后炎性反应、细胞增殖、结缔组织形成、创面收缩和重新塑造等起重要作用。瘢痕形成不仅影响外观,而且常常导致功能障碍,如关节部位,严重者可导致器官功能部分丧失或全部丧失。Ⅳ型及Ⅵ型胶原作为细胞外基质的主要组成分,在创面愈合中发挥重要作用。Ⅳ型对创面愈合具有双重作用：一方面,参与基底膜的形成,使表皮与乳头真皮层粘附促进创面愈合；另一方面,可抑制血管内皮细胞粘附于血管基底膜,阻止新血管形成,延迟创面愈合。Ⅵ型胶原可形成微纤丝促使Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积,并促使细胞粘附,激活基质金属蛋白酶的活性使创面组织重塑[3]而促进创面愈合。然而,Ⅳ型及Ⅵ型胶原在皮肤创伤再生修复及瘢痕愈合中的变化仍不清楚。本研究采用耳兔皮肤再生和瘢痕愈合一体化模型,使用HE染色法及免疫组织化学技术,检测Ⅳ型及Ⅵ型胶原在皮肤从浅到深层损伤区愈合和瘢痕演变过程中的表达,了解Ⅳ型及Ⅵ型胶原蛋白在皮肤再生修复和瘢痕形成中的变化规律。 材料和方法选用健康日本大耳白兔26只,(购于兰州市兽医研究所,普通级动物,合格证号：SCKX甘2004-0005),雌雄不拘,体重在2.0kg-3.0kg之间。单只分笼饲养,普通饲料喂养,自由进食水,适应性饲养一周后,采用含8%硫化钠的自制脱毛剂行兔耳腹侧脱毛,脱毛后饲养3天,以减少硫化钠对兔耳腹侧皮肤的损伤。采用2%的戊巴比妥钠(30mg/kg)耳缘静脉注射麻醉,麻妥后,采用自制模具充分展平兔耳腹侧皮肤,分别于两侧兔耳各制作两个创面(10mm×10mm,创面为由浅至深的斜面,浅层仅伤及表皮,深层至软骨表面),共84个。分别于伤后即刻、伤后3天、伤后6天、伤后9天、伤后27天、伤后50天切取创面及创周组织。实验前经兰州大学第二医院实验动物伦理委员会审批同意,所有实验动物给予人文关怀。 标本使用HE染色法及免疫组织化学检测Ⅳ型及Ⅵ型胶原在兔耳腹侧皮肤损伤区深、浅两层的表达情况。 沿斜形创面由浅入深的方向,将其分为10等分,每等分1.0mm×10mm,采用Image-Pro—Plus6.0图像分析软件检测每等分组织区域内的10个视野中的平均光密度。浅层创面定义为距浅表皮肤损伤侧向创面中心3mm范围,深层创面定义为距软骨暴露侧向创面中心3mm范围内。 所检测测到的数据采用x±s表示,统计学分析使用SPSS18.0软件包：若方差齐性时,多组间均数比较则采用方差分析,两两比较时使用最小显着差异法,方差补齐时则采用秩和检验法,P0.05为差异有统计学意义。 结果 1.伤后3天创面结痂。浅层创面伤后6天痂脱落,第9天再生修复；而深层创面于伤后第9天痂大部分脱落,伤后12-14天上皮化。伤后27天瘢痕增生显著,瘢痕质硬,伤后50天瘢痕成熟软化,创面肤色与周围不能分辨。 2.Ⅳ型胶原主要表达于皮肤及血管BMs。伤后第3天创面开始表达,上皮化时达高峰,伤后27天时明显减少。伤后27天内浅层创面表达量较深层多(p0.05)。伤后50天时深浅创面无明显区别(p0.05)。 3.Ⅵ型胶原广泛表达于整个真皮层。伤后第3天创面开始表达,随后逐渐增加,伤后27天开始减少。伤后6天内浅层创面表达量较深层创面多(p0.05)。伤后第9、12、27天深层表达量均多于浅层Q0.05)。伤后50天深浅创面表达量无明显差异(p0.05)。 结论 1.创面Ⅳ型胶原表达量伤后27天内浅层高于深层创面。 2.Ⅵ型胶原表达量伤后6天内浅层创面较深层多；9-27天深层较浅层高。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R622

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本文编号：2585170