细胞内外环境中凝溶胶蛋白水平对中性粒细胞趋化功能的影响

发布时间：2017-03-26 02:12

  本文关键词：细胞内外环境中凝溶胶蛋白水平对中性粒细胞趋化功能的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分目的：研究凝溶胶蛋白(Gelsolin, GSN)自身对大鼠离体多形核嗜中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophil, PMN)是否具有趋化作用。方法：成年SD大鼠,麻醉后采集静脉血液标本,采用Ficoll密度梯度离心、葡聚糖沉降、红细胞裂解法分离PMN。在Transwell细胞培养系统中进行趋化实验。PMN接种于上室,在下室培养基中加入重组凝溶胶蛋白,观察趋化至下室的PMN数量并计算趋化指数,研究凝溶胶蛋白自身对PMN是否具有趋化功能。结果：在Transwell细胞培养系统下室加入凝溶胶蛋白,趋化至下室的PMN数量和趋化指数均没有明显改变(P0.05)。结论：凝溶胶蛋白本身对大鼠离体PMN没有趋化作用。第二部分目的：研究细胞外环境凝溶胶蛋白水平变化对趋化肽fMLP (N-formylmethionyl-leucyl-phenylalanine)诱导的PMN趋化功能的影响。方法：成年SD大鼠,麻醉后采集静脉血。采用Ficoll密度梯度离心、葡聚糖沉降、红细胞裂解法分离PMN。在Transwell细胞培养系统中进行趋化实验,PMN接种于上室并在上室培养基中加入重组凝溶胶蛋白,下室培养基中加入fMLP,观察趋化至下室的PMN数量并计算趋化指数,研究细胞外凝溶胶蛋白水平改变对fMLP诱导的PMN趋化功能的影响。结果：在Transwell细胞培养系统上室加入凝溶胶蛋白,趋化至下室的PMN数量和趋化指数均没有明显改变P0.05)。结论：细胞外环境中凝溶胶蛋白水平改变,不影响fMLP诱导的PMN趋化能力。第三部分目的：研究细胞内凝溶胶蛋白水平变化对趋化肽fMLP诱导的PMN趋化功能的影响。方法：成年SD大鼠,麻醉后采集静脉血液标本,采用Ficoll密度梯度离心、葡聚糖沉降、红细胞裂解法分离PMN。采用电穿孔法向PMN中分别转入凝溶胶蛋白或其抗体。在Transwell细胞培养系统进行fMLP诱导趋化实验,观察趋化至下室的PMN数量并计算趋化指数,研究细胞内凝溶胶蛋白水平改变对fMLP诱导的PMN趋化功能的影响。结果：向PMN中转入凝溶胶蛋白,趋化至下室的PMN数量和趋化指数均没有明显改变(P0.05);但向PMN-中转入凝溶胶蛋白抗体,趋化至下室的PMN数量减少,趋化指数降低(P0.05)。结论：向细胞内导入外源性凝溶胶蛋白不影响fMLP诱导的PMN趋化能力,但向细胞内导入凝溶胶蛋白抗体可明显抑制fMLP诱导的PMN趋化功能。
【关键词】：凝溶胶蛋白 嗜中性粒细胞 趋化作用 细胞骨架
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
【目录】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-15
• 参考文献13-15
• 第一部分 凝溶胶蛋白自身对中性粒细胞的趋化功能15-22
• 1 材料与方法15-18
• 2 实验结果18-19
• 3 讨论19-21
• 参考文献21-22
• 第二部分 细胞外凝溶胶蛋白水平对中性粒细胞趋化功能的影响22-28
• 1 材料与方法22-23
• 2 实验结果23-24
• 3 讨论24-26
• 参考文献26-28
• 第三部分 细胞内凝溶胶蛋白水平对中性粒细胞趋化功能的影响28-37
• 1 材料与方法28-31
• 2 实验结果31-33
• 3 讨论33-36
• 参考文献36-37
• 全文总结37-38
• 文献综述38-45
• 参考文献43-45
• 致谢45-46
• 硕士期间的研究成果及发表的学术论文目录46

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本文编号：268125