足三里穴位电刺激预处理对围术期大鼠免疫功能及应激反应的影响

发布时间：2020-08-21 01:36

【摘要】：【目的】围术期应激反应的程度和免疫功能的状态是病人术后是否发生并发症的重要因素,显著地影响病人的预后与康复。针灸作为传统医学的重要组成部分,将其应用在临床上调控应激反应与免疫功能越来越受到广泛的关注,其焦点主要集中于术中和术后穴位电刺激的辅助应用,但将其应用于术前的预处理缺乏系统关注,特别是整个围术期应用的报道更加缺乏。本研究以剖腹探查术大鼠为模型,将穴位电刺激应用在整个围术期的过程中,来探讨穴位电刺激预处理是否对围术期大鼠的细胞免疫功能和应激反应有良性调节作用,为解决围术期应激反应和免疫功能紊乱这一难题提供基础依据,这可能为临床应用加速康复外科(Enhanced recovery after surgery,ERAS)理念寻求到简单易行的中西医结合调控手段。【方法】30只SPF级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,按余数法分为5组:空白组(A组)、手术组(B组)、穴位电刺激预处理组(C组)、术后穴位电刺激处理组(D组)和穴位电刺激预处理+术后处理组(E组),每组6只。手术采用剖腹探查术为模型,针刺穴位选取足三里。A组在实验过程中只抓取和针刺固定,不进行手术和穴位电刺激处理,在其他组手术后24h取材;B组在实验过程中抓取和针刺固定,进行手术模型处理,不进行穴位电刺激处理,在术后24h取材;C组在手术处理前7d开始进行穴位电刺激预处理,连续7d,在术后24h取材;D组在术前7d只进行针刺固定,术后24h开始穴位电刺激处理,连续3d,24h后取材;E组在术前7d开始进行穴位电刺激预处理,连续7d,术后24h开始穴位电刺激处理,连续3d,24h后取材。刺激参数选取疏密波,频率2/15HZ,电流1mA,持续30min。各组取脾脏组织采用流式细胞仪测定CD4+T淋巴细胞与CD8+T淋巴的比值;RT-PCR法检测脾脏组织中NF-κB mRNA的表达情况;western blot法测定脾脏组织中P50蛋白含量;ELISA法检测血清中IL-1β和TNF-α含量。【结果】1.CD4+/CD8+的比值的结果:与A组比较,B组中CD4+/CD8+的比值均明显降低,差异具有统计学意义(P0.01)。与B组比较,C组、D组和E组中CD4+/CD8+的比值均升高,差异具有统计学意义(P0.01)。与E组比较,C组CD4+/CD8+的比值较低,差异具有统计学意义(P0.05);而D组和E组比较,CD4+/CD8+的比值无明显差异,差异不具有统计学意义(P0.05)。2.NF-κB mRNA的表达结果:与A组比较,B组NF-κB mRNA的表达量显著增高,差异具有统计学意义(P0.01)。与B组比较,C组、D组和E组的表达量均降低,差异具有统计学意义(P0.05);但D组和E组的表达量降低更为显著(P0.01)。与E组比较,C组NF-κB mRNA的表达量与之有差异,具有统计学意义(P0.05);而D组NF-κB mRNA的表达量与之无差异,结果不具有统计学意义(P0.05)。3.P50蛋白含量的结果:与A组比较,B组P50蛋白表达含量升高,差异具有统计学意义(P0.01)。与B组比较,C组、D组和E组P50蛋白表达含量显著降低,差异具有统计学意义(P0.01)。与E组比较,C组和D组P50蛋白表达含量相差不大,差异不具有统计学意义(P0.05)。4.血清中TNF-α的含量结果:与A组比较,B组血清中TNF-α的含量均明显升高,差异具有统计学意义(P0.01)。与B组比较,C组、D组和E组血清中TNF-α的含量均降低,差异具有统计学意义;E组血清中TNF-α的含量降低更加明显(P0.01)。与E组比较,C组和D组血清中TNF-α的含量差异均具有统计学意义(P0.05)。5.血清中IL-1β的含量结果:与A组比较,B组血清中IL-1β的含量均明显升高,差异具有统计学意义(P0.01)。与B组比较,C组、D组和E组血清中IL-1β的含量均降低,差异具有统计学意义;E组血清中IL-1β的含量降低更加明显(P0.01)。与E组比较,C组和D组血清中IL-1β的含量差异均具有统计学意义(P0.05)。【结论】1.肋下剖腹探查术大鼠模型可以激发大鼠强烈的应激反应和抑制大鼠的免疫功能;2.足三里穴位电刺激预处理与术后穴位电刺激处理都可能会改善围术期大鼠免疫功能抑制状态,两者联合应用可能产生更好的效果;3.足三里穴位电刺激预处理与术后穴位电刺激处理都可能会抑制围术期大鼠过度的应激反应,两者联合应用可能产生更好的效果;4.足三里穴位电刺激预处理与术后穴位电刺激处理影响围术期大鼠的应激反应与免疫功能的机制可能与NF-κB信号通路相关。
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R245

【参考文献】