小檗碱对大鼠自体原位肝脏移植肠损伤的影响

发布时间：2017-04-03 00:07

  本文关键词：小檗碱对大鼠自体原位肝脏移植肠损伤的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探究小檗碱是否对大鼠自体原位肝脏移植引起的肠道损伤具有保护作用以及可能的机制。方法:SD雄性大鼠24只,健康状态良好,采用随机数字表法,将其随机分为3组:假手术组(S组)、自体原位肝脏移植模型组(AT组)、自体原位肝脏移植模型组+小檗碱组(BBR组)。S组大鼠仅接受麻醉后开腹,游离肝脏周围的血管及韧带后关腹;AT组大鼠采用自体原位肝脏移植模型,使用4℃乳酸林格氏液持续灌注,30 min后随即恢复肝脏血液灌注,冲洗腹腔后关腹;小檗碱组(BBR组)大鼠术前7 d连续给予200 mg·kg-1·d-1小檗碱灌胃,手术操作同AT组。于再灌注8 h时,抽取下腔静脉血,检测D-乳酸和内毒素的浓度。距回盲部2 cm处切取5 cm回肠组织,称量回肠的湿重,随后将其放至80℃烤箱中,24小时后再次称量其重量,获取组织的干重。取部分肠组织制成肠组织匀浆,测定肠组织MDA及SOD活性。采用免疫组织化学方法和Western blot技术分别检测细胞色素C及Bax、Bcl-2、AMPK蛋白的表达水平。肠组织标本被甲醛溶液固定,于光学显微镜下观察肠组织的病理学结果。肠上皮细胞的凋亡采用TUNEL法检测。应用SPSS 17.0统计软件对结果进行分析,P0.05代表统计学差异具有意义。结果:S组肠组织形态结构未见明显异常,AT组和BBR组损伤明显,BBR组损伤较AT组减轻。AT和BBR组肠组织的D-乳酸,内毒素,湿/干重比率,MDA水平,Bax、AMPK蛋白表达水平,Cytochrome C表达水平和凋亡细胞计数均高于S组,但AT组肠组织的D-乳酸,内毒素,湿/干重比率,MDA水平,Bax蛋白表达水平,Cytochrome C表达水平和凋亡细胞计数较BBR组增高更明显(P0.05),AT组的AMPK蛋白表达水平低于BBR组(P0.05)。AT组和BBR组肠组织SOD水平和Bcl-2蛋白表达水平低于S组,AT组较BBR组降低更明显(P0.05)。结论:1.大鼠自体原位肝脏移植过程可以引起肠道的损伤,肠道粘膜水肿,湿/干重比率增加,血浆中D-乳酸和内毒素的浓度升高,同时氧化应激、细胞凋亡及AMPK蛋白的激活在自体原位肝脏移植肠损伤的发生过程中也起着重要作用。2.预先给予小檗碱能激活AMPK,增加凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值,进而维持线粒体膜的稳定性,细胞色素C从细胞内释放到胞浆的量明显减少,保护肠道免受缺血再灌注的损伤,减少细胞发生凋亡。
【关键词】：大鼠 小檗碱 氧化应激 细胞凋亡 AMPK蛋白 自体原位肝脏移植 肠损伤
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-11
• 前言11-13
• 研究现状、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 1 材料和方法13-27
• 1.1 材料13-14
• 1.2 动物模型建立和分组14-15
• 1.3 标本采集15-16
• 1.4 检测指标与方法16-26
• 1.5 统计学处理26-27
• 2 结果27-31
• 2.1 肠组织病理结果27
• 2.2 肠组织的湿/干重（W/D）比率27-28
• 2.3 肠组织MDA含量和SOD活性变化28-29
• 2.4 血清中D-乳酸和内毒素浓度变化的比较29
• 2.5 肠组织细胞色素C表达水平和凋亡细胞计数的变化29-30
• 2.6 肠组织Bax和Bcl-2 蛋白表达水平的比较30-31
• 2.7 肠组织AMPK蛋白表达水平31
• 3 讨论31-40
• 3.1 大鼠自体原位肝脏移植模型的建立31-32
• 3.2 自体原位肝脏移植所致肝肠损伤的机制32-34
• 3.3 缺血再灌注损伤时活性氧增多的机制及损伤作用34-35
• 3.4 D-乳酸和内毒素与缺血再灌注损伤35-36
• 3.5 细胞凋亡在缺血再灌注损伤的作用36-37
• 3.6 AMPK蛋白与缺血再灌注损伤37-38
• 3.7 小檗碱保护机制的探讨38-40
• 结论40-41
• 参考文献41-47
• 发表论文和参加科研情况说明47-48
• 综述48-60
• 综述参考文献54-60
• 致谢60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 张艳波;王军;王勇;王凌宇;李爽;周国庆;;小檗碱对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织Bcl-2、Caspase-3表达的影响[J];中国老年学杂志;2011年13期

  本文关键词：小檗碱对大鼠自体原位肝脏移植肠损伤的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：283372