抗钠—钙交换体α-2 840-877 单克隆抗体对大鼠心肌主要离子电流的影响及其对缺血/再灌注诱发心律失常的抑制作用研究

发布时间：2021-04-28 03:47

　　目的:1.制备抗钠-钙交换体（Na+-Ca2+exchanger,NCX）α-2重复序列（840-877）（α-2（840-877））单克隆抗体,观察其对成年大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响。2.建立大鼠心肌缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion,I/R）诱发的心律失常模型,观察抗NCXα-2（840-877）单克隆抗体对模型大鼠心律失常的影响,并分析其作用机制。方法:1.抗NCXα-2（840-877）单克隆抗体的制备及效价检测。单克隆杂交瘤细胞株由NCXα-2第840-877位氨基酸残基肽段免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合而成,经筛选所得的阳性克隆株及三次亚克隆后获得可以稳定分泌单克隆抗体的细胞株。通过对其进行扩大培养,采用动物体内诱生法制备腹水,应用Protein A亲和柱对所得腹水进行纯化,得到单克隆抗体。利用间接ELISA法检测纯化后的单克隆抗体效价;SDS-PAGE法测定纯化后的单克隆抗体纯度。2.大鼠心室肌细胞急性分离。正常成年SD大鼠用40 mg·kg-1戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,快速开胸取心脏,经主动脉逆行插管将心脏悬挂于Langendorff灌... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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前言
第一部分 抗钠-钙交换体α-2_(840-877)单克隆抗体的制备及其对大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 抗NCX α-2_(840-877)单克隆抗体的制备
        2.2 抗NCX α-2_(840-877)单克隆抗体对大鼠心室肌细胞离子电流的影响
第二部分 抗钠-钙交换体α-2_(840-877)单克隆抗体对大鼠心肌缺血/再灌注诱发心律失常的作用研究
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 抗NCX α-2_(840-877)单克隆抗体对离体大鼠心脏缺血/再灌注诱发心律失常的影响
        2.2 抗NCX α-2_(840-877)单克隆抗体对大鼠在体心脏缺血/再灌注诱发心律失常的影响
        2.3 抗NCX α-2_(840-877)单克隆抗体对大鼠心室肌细胞钙瞬变的影响
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]心肌缺血再灌注损伤的主要机制与相关药物治疗的研究进展[J]. 徐盟.  实用药物与临床. 2014(08)
[2]我国心血管疾病现状与展望[J]. 姚震,陈林.  海南医学. 2013(13)
[3]急性心肌缺血早期室性心律失常与缝隙连接蛋白43、细胞内钙离子及心肌凋亡的关系[J]. 王彦,赵赫男.  中国心脏起搏与心电生理杂志. 2011(04)
[4]抗钠-钙交换体α-1抗体对Langendorff灌流大鼠心脏功能的影响[J]. 封启龙,武冬梅,吴博威.  中西医结合心脑血管病杂志. 2011(03)
[5]抗钠-钙交换体α-1重复序列（117-137）抗体对心肌钠-钙交换电流及钙电流的抑制作用（英文）[J]. 封启龙,武冬梅,崔香丽,赵画晨,林媛媛,赵录英,吴博威.  生理学报. 2010(05)
[6]应用曲线拟合方法求解单克隆抗体亲和常数中OD100[J]. 刘彦君,谭婧,章崇杰,宣景秀,魏大鹏.  西部医学. 2010(04)
[7]心肌细胞兴奋-收缩耦联过程中钙离子调控的研究进展[J]. 蔡云,杨长军,毛华,耿越.  科技信息. 2009(31)
[8]心肌细胞钙瞬变信号的研究进展[J]. 杨晓慧,卢新政.  国际心血管病杂志. 2009(04)
[9]抗钠钙交换体特异位点抗体对心肌钠钙交换电流的激活作用及其与钙通道、钠泵的交叉反应[J]. 白晓洁,吴博威.  中国病理生理杂志. 2008(06)
[10]KB-R7943对大鼠离体心脏缺血/再灌注的后适应保护作用[J]. 张轩萍,牛拴成,张明升,武冬梅,王洁,吴博威.  中国药理学通报. 2008(04)

博士论文
[1]特异性增强心肌内向整流钾电流(IK1)-抗心律失常新途径[D]. 刘清华.山西医科大学 2009
[2]增强L-型钙通道、钠钙交换体和钠泵以提高心肌变力性的实验研究[D]. 白晓洁.山西医科大学 2006

硕士论文
[1]抗Na+/Ca2+交换体α-2840-877单克隆抗体的制备及其对大鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流的特异性抑制作用研究[D]. 高亚男.山西医科大学 2014
[2]钙蛋白酶抑制剂MDL28170减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤[D]. 顾晓明.第四军医大学 2014
[3]抗GST标签蛋白单克隆抗体的制备及其活性鉴定[D]. 王政.华中农业大学 2008



本文编号：3164741