力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞体外增殖及AMPK/TSC2/mTOR的影响

发布时间：2021-05-09 03:32

　　目的：研究力竭运动及钝挫伤对大鼠肌卫星细胞及AMPK、TSC2、mTOR的影响,探究骨骼肌损伤修复过程,为骨骼肌损伤修复提供理论依据。方法：选取24只SD雄性大鼠,随机分成4组,每组6只。分别是安静对照组（Control,20C）6只；力竭运动组（Exhaustive20exercise20group）18只：力竭运动组进行一次力竭性下坡跑运动达到力竭状态,并取即刻组（Exhaustive,20EO）、力竭后24h组（E24）、力竭后48h组（E48）。力竭组和安静对照组分别于力竭运动后不同时间点和安静状态下麻醉,宰杀取血,并取下右侧股四头肌,股四头肌一分为二,一份立即进行细胞培养实验,一份-80。保存待检测AMPK、TSC2、mTOR的含量及变化。钝挫伤组：另选6只SD雄性大鼠,分为钝挫伤即刻组（Contusion,20DO）、钝挫伤24h组（D24）、钝挫伤48h组（D48）,进行麻醉,摘取右侧股四头肌,立即进行细胞培养实验。另取新生鼠3只,亦取股四头肌进行细胞培养实验。结果：1、根据肌卫星细胞培养结果显示：安静对照组无明显肌卫星细胞出现；力竭组与钝挫伤组相比肌卫星细胞含量较少,增... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略词表
前言
文献综述
    1 骨骼肌损伤
        1.1 骨骼肌的解剖生理概述
        1.2 运动性骨骼肌损伤
        1.3 骨骼肌钝挫伤
        1.4 骨骼肌损伤机制
            1.4.1 自由基损伤假说
            1.4.2 钙离子超载学说
            1.4.3 急性炎症反应损伤学说
            1.4.4 机械损伤学说
            1.4.5 骨骼肌细胞凋亡
    2 骨骼肌修复与肌卫星细胞
        2.1 骨骼肌修复机制
        2.2 肌卫星细胞的分离方法
            2.2.1 酶消化法
            2.2.2 组织块法
            2.2.3 单根肌纤维法
        2.3 骨骼肌卫星细胞的纯化方法
            2.3.1 差速贴壁法
            2.3.2 Percoll液密度梯度离心法
        2.4 骨骼肌卫星细胞培养
        2.5 卫星细胞的鉴定
        2.6 肌卫星细胞与骨骼肌修复
    3 AMPK/TSC2/mTOR信号传导通路与骨骼肌运动损伤及修复的关系
        3.1 AMPK的结构与功能
        3.2 TSC
        3.3 mTOR与骨骼肌运动损伤及修复
实验部分
    1、实验对象与方法
        1.1 实验对象
        1.2 动物分组
        1.3 实验模型
        1.4 实验取材
    2、材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 肌卫星细胞培养
    3. 实验条件
        3.1 肌卫星细胞的培养条件
        3.2 酶联免疫实验的方法
        3.3 蛋白含量测定
    4 数据处理
    5 实验结果与分析
        5.1 大鼠一般情况观察
        5.2 力竭运动及钝挫伤后即刻、24h、48h组大鼠和新生鼠SC体外培养的结果
        5.3 力竭运动即刻组、24h组、48h组大鼠骨骼肌AMPK、TSC2、mTOR的变化情况
    6 讨论与分析
        6.1 骨骼肌卫星细胞的培养
        6.2 力竭运动、钝挫伤和新生鼠SC体外培养增殖和分化的情况对比
        6.3 力竭运动对大鼠骨骼肌AMPK/TSC2/mTOR通路的影响
    7 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]兔骨骼肌卫星细胞成肌诱导分化及鉴定[J]. 代阳,王轶敏,刘新峰,周朋洋,郭宏,丁向彬.  黑龙江畜牧兽医. 2014(21)
[2]针刺对骨骼肌急性钝挫伤模型形态学影响的实验观察[J]. 黄怡然,张茜,李文迅,董摩扬,李娜,丁婷婷,路问天,严安,郭长青.  世界中医药. 2014(04)
[3]不同运动对骨骼肌mTOR信号传导通路影响的研究进展[J]. 姜洋.  当代体育科技. 2012(27)
[4]SD大鼠骨骼肌钝挫伤早期的组织病理变化[J]. 刘树坤,于晓华,吴耀义,徐明明,赵竹英,罗茜,马传雨.  中国组织工程研究. 2012(24)
[5]大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养和鉴定[J]. 陈思凡,李文学,陈建玲,杨光宇,刘华章,朱伟.  热带医学杂志. 2011(04)
[6]一次大强度耐力运动对大鼠骨骼肌蛋白质降解和AMPK活性变化的影响[J]. 马延超,朱荣,许寿生,王瑞元.  体育学刊. 2011(02)
[7]运动性骨骼肌损伤相关指标的实验研究[J]. 宋卫红,汤长发,梁小文,廖艳萍.  首都体育学院学报. 2011(02)
[8]mTOR/S6K1信号通路与胰岛素抵抗的关系及有氧运动对其影响的研究[J]. 牛燕媚,苑红,张宁,傅力.  中国应用生理学杂志. 2010(04)
[9]运动性骨骼肌微损伤和修复的机制研究[J]. 魏源,李良鸣,邢文华,杨则宜.  广州体育学院学报. 2010(05)
[10]黄柳菇多糖对运动大鼠部分抗氧化指标的影响[J]. 王勇,吴鹤群,习雪峰.  衡水学院学报. 2010(04)

博士论文
[1]高住低训对骨骼肌AMPK/TSC2/mTOR信号的调控[D]. 许猛.北京体育大学 2011

硕士论文
[1]LKB1，14-3-3γ和AMPK在肝癌发生过程中的表达规律及其相互关系的研究[D]. 孙韩艳.安徽大学 2012
[2]LKB1-AMPK-mTOR信号传导通路在非小细胞肺癌细胞系中的初步研究[D]. 张霞.天津医科大学 2011



本文编号：3176533