沿视觉传导通路电针刺激对前部缺血性视神经病变模型干预的研究

发布时间：2017-04-29 08:01

  本文关键词：沿视觉传导通路电针刺激对前部缺血性视神经病变模型干预的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：通过观察沿视觉传导通路电针刺激对兔AION模型视神经组织结构和凋亡相关因子Bax、Bcl-2的影响,从形态学的角度探讨沿视觉传导通路电针刺激对缺血性视神经病变模型的保护作用,同时从分子生物学的角度进一步揭示沿视觉传导通路电针刺激抑制细胞凋亡的途径。方法：选用健康新西兰大白兔12只,随机分为4组：模型组、针刺组、针刺加电针组、正常组,每组3只。除正常组外,其余三组实验眼(右眼)滴入复方托吡卡胺滴眼液充分散瞳,从兔耳缘静脉注入孟加拉玫瑰红(Rose Bengal, RB) 2.5mmol/(ml·kg),立即将家兔固定于裂隙灯前,兔对侧眼用黑色不透光眼罩遮盖。分别用532nm绿光、功率75mW、1000 μm光斑直径照射家兔实验眼视盘中上2/3区域60s。造模后1天通过眼底彩照及FFA检查,观察兔视盘及其周围变化,从而判定造模是否成功。造模成功后,针刺组取穴：攒竹、鱼腰、视区。针刺加电针组取穴：攒竹、鱼腰、视区,攒竹和视区加电针(疏密波,强度5mA)。模型组和正常组不作干预。针刺组和针刺加电针组均每日针刺治疗1次,每次30分钟,连续治疗3天。模型组及正常组正常饲养3天。然后将各组新西兰大白兔麻醉、取材、制作石蜡切片,分别通过HE染色观察兔视神经组织的病理学改变,通过免疫组化染色观察兔视网膜中Bax、Bcl-2的表达。结果：1.HE染色：干预3天,模型组家兔神经节细胞层出现增生现象、排列十分紊乱,视网膜神经节细胞排列疏松,数目减少,可见较长片段的视网膜神经节细胞缺失,内核层明显变薄,细胞数目明显减少。针刺组家兔视网膜各层结构基本完整,视网膜神经节细胞排列疏松,数目减少,可见视网膜神经节细胞少量缺失,内核层变薄,细胞数目减少。针刺加电针组家兔视网膜各层结构基本完整,视神经组织内细胞排列整齐,可见视网膜神经节细胞少量缺失,内核层轻度变薄,细胞数目减少,正常组家兔视网膜各层结构完整,视神经组织内细胞形态正常,排列整齐,神经节细胞无脱落,排列紧密,染色均匀。2.视网膜内层厚度：模型组、针刺组、针刺加电针组、正常组的视网膜内层厚度的秩均值依次为：9.56、18.33、20.83、25.28。模型组与正常组之间有显著差异(P0.01)。而针刺组和针刺加电针组的视网膜内层厚度与模型组之间比较均无差异。3.免疫组化染色及RGC计数：bcl-2计数分别为模型组16.33±4.583,针刺组30.56±7.796,针刺加电针组22.78±4.816,正常组41.44±10.561,其中针刺组和模型组相比有显著差异(P=0.000),针刺加电针组与模型组相比无差异(P=0.0720.05). Bax计数分别为模型组26.78±11.925,针刺组24.78±5.630,针刺加电针组22.89±4.076,正常组14.56±5.077,其中针刺组与模型组相比无差异(P=0.5680.05),针刺加电针组与模型组相比无差异(P=0.2700.05)。Bax/Bcl-2分别为模型组1.64±0.557,针刺组0.84±0.254,针刺加电针组1.05±0.333,正常组0.35±0.091,其中针刺组与模型组相比有显著差异(P=0.000),针刺加电针组与模型组相比有显著差异(P=0.0010.05),针刺组和针刺加电针组相比无差异(P=0.2120.05)。结论：1.沿视觉传导通路针刺疗法,加电针和不加电针对缺血状态下的兔视神经的结构均具有明显的保护作用,但是对视网膜内层厚度的影响无差异。2.沿视觉传导通路针刺疗法,加电针和不加电针均可抑制缺血状态下的兔视神经中内部线粒体途径的激活,但是两者之间无差异。3.沿视觉传导通路电针疗法可能是通过抑制细胞凋亡的内部线粒体途径来保护视神经组织结构。
【关键词】：视觉传导通路 电针 前部缺血性视神经病变 Bax/Bcl-2
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R245
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 英文缩略词10-11
• 第一部分 文献综述11-28
• 1 前部缺血性视神经病变的研究进展11-17
• 1.1 概述11
• 1.2 流行病学调查11
• 1.3 危险因素11-13
• 1.4 临床表现13-15
• 1.5 断和鉴别诊断15
• 1.6 疾病复发15
• 1.7 治疗15-17
• 1.8 预防17
• 2 中医药治疗前部缺血性视神经病变的研究进展17-23
• 2.1 辨证论治17-18
• 2.2 专病专方18-19
• 2.3 中药新剂型治疗19-20
• 2.4. 针刺治疗20-22
• 2.5. 结语22-23
• 参考文献23-28
• 前言28-30
• 第二部分 实验研究30-49
• 1 实验材料30
• 1.1 实验动物30
• 1.2 针灸针及电针仪30
• 1.3 主要试剂及仪器30
• 2 试验方法30-33
• 2.1 AION兔眼模型制备30-31
• 2.2 分组处理31-32
• 2.3 标本采集及处理32-33
• 3 实验观察方法33-35
• 3.1 眼底彩照及荧光造影33
• 3.2 HE染色33-34
• 3.3 免疫组织化学染色34-35
• 3.4 视网膜内层厚度测量35
• 4 统计学分析35
• 5 结果35-42
• 5.1 家兔眼底彩照检查35
• 5.2 家兔眼底荧光造影检查35-36
• 5.3 HE染色观察家兔视盘及视神经组织的病理变化36-37
• 5.4 视网膜内层厚度测量37-38
• 5.5 免疫组化染色检测凋亡相关因子38-42
• 6 讨论42-49
• 6.1 针刺的取穴依据及其机理探讨42-44
• 6.2 动物模型的制备与思考44-47
• 6.3 沿视觉传导通路电刺激对兔AION模型作用机制的探讨47-49
• 结语49-50
• 结论49
• 不足与展望49-50
• 参考文献50-52
• 致谢52-53
• 个人简历53

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本文编号：334457