化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏的干预作用及对纤维连接蛋白和层粘连蛋白的影响

发布时间：2017-04-30 18:01

  本文关键词：化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏的干预作用及对纤维连接蛋白和层粘连蛋白的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)属于代谢性疾病的肾损害,是糖尿病(diabetes mellitus,DM)引起的一种危害严重的慢性并发症。本实验利用高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射建立DM大鼠模型,分别予以化瘀中药、通络中药及厄贝沙坦进行干预,观察大鼠的一般情况、肾组织形态学的改变,以及检测血常规、血凝、血液生化指标、24小时尿蛋白定量及肾组织纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和层粘连蛋白(laminin,LN)的表达水平等,来研究化瘀中药、通络中药分别对糖尿病肾病大鼠肾脏的干预作用,并且探讨其可能的作用机制。方法:清洁级健康雄性SD大鼠55只,体重100±20g,适应性喂养一周后,测定大鼠尿蛋白、尿糖及尿红细胞全部阴性。随机选10只作为正常对照组(C),给予普通饲料喂养,剩余大鼠给予高脂饲料喂养。喂养四周后,将高脂饲料喂养的大鼠禁食12小时以上,按35mg/kg腹腔注射STZ,72小时后连续三次测大鼠随机血糖≥16.7mmol/L为DM造模成功。造模成功的大鼠随机分为四组,模型组(以下简称M)、化瘀中药治疗组(以下简称H)、通络中药治疗组(以下简称T)、厄贝沙坦治疗组(以下简称I)。各治疗组给予相应药物灌胃,每日一次,连续16周。于16周末收集24小时尿液,测量24小时尿量,检测24小时尿蛋白含量;大鼠禁食12小时,称量大鼠体重,麻醉大鼠后,腹主动脉取血检测血常规、血凝及血液生化指标;留取肾组织进行光镜、电镜、免疫组化及RT-PCR检测。结果:1各组大鼠一般状态的比较正常对照组的大鼠一般情况良好;模型组及治疗组的大鼠均出现三多一少的症状(多食、多饮、多尿、体重逐渐减轻),以模型组的表现最为突出,各治疗组大鼠在治疗过程中症状有所缓解。实验期间正常对照组大鼠逃逸1只,模型组死亡3只,化瘀中药治疗组死亡1只,厄贝沙坦治疗组死亡1只。2各组大鼠体重及肾脏肥大指数(KI,右肾重/体重)的比较与正常对照组比较,模型组大鼠体重明显减轻,肾脏肥大指数明显升高(P0.05);模型组和各治疗组之间的体重、肾脏肥大指数无统计学差异(P0.05)。3各组大鼠24小时尿蛋白定量(24h UTP)的比较与正常对照组比较,模型组大鼠24小时尿蛋白总量水平明显升高(P0.05);与模型组比较,各治疗组24小时尿蛋白总量水平降低(P0.05);各治疗组之间无统计学差异(P0.05)。4各组大鼠血液指标检测结果比较4.1血常规中血小板计数(PLT)结果比较显示:与正常对照组比较,模型组大鼠血小板计数明显增加(P0.05);与模型组比较,各治疗组血小板计数明显减少(P0.05);各治疗组之间无统计学差异(P0.05)。4.2血生化中甘油三酯(TG)结果比较显示:与正常对照组比较,模型组大鼠甘油三酯水平明显升高(P0.05);与模型组比较,各治疗组甘油三酯水平明显降低(P0.05);各治疗组之间无统计学差异(P0.05)。4.3血生化中低密度脂蛋白(LDL)结果比较显示:与正常对照组比较,模型组大鼠低密度脂蛋白水平明显升高(P0.05);模型组和各治疗组之间无统计学差异(P0.05)。4.4血生化中血浆总蛋白(TP)结果比较显示:与正常对照组比较,模型组、化瘀中药治疗组、通络中药治疗组血浆总蛋白水平降低(P0.05);与模型组比较,化瘀中药治疗组、通络中药治疗组、厄贝沙坦治疗组血浆总蛋白水平升高(P0.05);通络中药治疗组与厄贝沙坦治疗组血浆蛋白水平无统计学差异(P0.05);厄贝沙坦治疗组与正常对照组血浆总蛋白水平无统计学差异(P0.05)。4.5血生化中血肌酐(Scr)结果比较显示:与正常对照组比较,模型组大鼠血肌酐水平明显升高(P0.05);与模型组比较,各治疗组血肌酐水平略有降低,但无统计学差异(P0.05)。4.6血凝中血浆凝血酶原时间(PT)结果比较显示:与正常对照组比较,模型组大鼠凝血酶原时间减少(P0.05);与模型组比较,各治疗组凝血酶原时间增加(P0.05);各治疗组之间无统计学差异(P0.05)。5肾脏病理形态学观察5.1光镜观察正常对照组的大鼠肾脏结构正常清晰;模型组的大鼠肾脏结构紊乱,肾小囊腔呈裂隙样改变,基底膜增厚,系膜基质增生,甚至出现球囊粘连;与模型组比较,各治疗组病变明显减轻;各治疗组间比较,通络中药治疗组的病理表现比其他治疗组略轻。5.2电镜观察正常对照组的大鼠肾脏结构正常清晰;模型组的大鼠肾脏肾小球毛细血管基底膜明显增厚,系膜基质增多,足突融合;与模型组比较,各治疗组大鼠均有类似病理表现,但程度较轻;各治疗组间比较,通络中药治疗组病理表现比其他治疗组略轻。6免疫组织化学法检测肾组织FN和LN的表达6.1 FN结果显示:正常对照组FN在肾小球的系膜区及基底膜少量表达;与正常对照组比较,造模的各组大鼠肾组织中FN表达明显增加(P0.05);与模型组比较,各治疗组FN的表达明显减少(P0.05);各治疗组间进行比较,通络中药治疗组、厄贝沙坦治疗组FN的表达较少,与化瘀中药治疗组有统计学差异(P0.05)。6.2 LN结果显示:正常对照组LN在肾小管及其间质中少量表达;与正常对照组比较,造模的各组大鼠肾组织中LN表达明显增加(P0.05);与模型组比较,各治疗组LN的表达明显减少(P0.05);各治疗组间进行比较,通络中药治疗组、厄贝沙坦治疗组LN的表达较少,与化瘀中药治疗组有统计学差异(P0.05)。7 RT-PCR检测肾组织FN m RNA、LN m RNA的表达7.1 FN结果显示:与正常对照组比较,造模的各组大鼠肾组织中FN m RNA的表达量明显增加(P0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠肾组织FN m RNA的表达量明显减少(P0.05);各治疗组间进行比较,通络中药治疗组、厄贝沙坦治疗组FN m RNA的表达量较少,与化瘀中药治疗组有统计学差异(P0.05)。7.2 LN结果显示:与正常对照组比较,造模各组大鼠肾组织中LN m RNA的表达量明显增加(P0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠肾组织LN m RNA的表达量明显减少(P0.05);各治疗组间进行比较,通络中药治疗组、厄贝沙坦治疗组LN m RNA的表达量较少,与化瘀中药治疗组有统计学差异(P0.05)。结论:1化瘀中药与通络中药均可以改善糖尿病肾病大鼠的一般情况,减少24小时尿蛋白总量,维持血浆蛋白的含量,对糖尿病肾病大鼠的肾脏有一定的保护作用。2化瘀中药与通络中药都能使血小板的数量减少,活性减低,防止糖尿病肾病形成血栓、栓塞等并发症。3化瘀中药与通络中药均能降低血浆中甘油三酯的水平,调节糖尿病脂质代谢紊乱。4化瘀中药与通络中药都能抑制糖尿病肾病大鼠肾组织FN、LN的表达水平,减轻糖尿病肾病病理改变,提示其对糖尿病肾病的治疗作用机制可能与延缓肾脏纤维化有关。5综合病理形态学观察及肾组织FN、LN的表达情况分析,在肾脏保护方面通络中药的效果优于化瘀中药。
【关键词】：糖尿病肾病 化瘀通络中药 厄贝沙坦 FN LN 肾脏纤维化
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-13
• 英文缩写13-14
• 前言14
• 材料与方法14-24
• 结果24-27
• 附图27-40
• 附表40-45
• 讨论45-51
• 结论51
• 参考文献51-54
• 综述 糖尿病肾病与纤维连接蛋白和层粘连蛋白54-63
• 参考文献58-63
• 致谢63-64
• 个人简历64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 周祖文;糖尿病肾病的中医研究概况[J];广西中医学院学报;2002年02期

2 朱正光,吴曙光,孙燕荣;水蛭水煎液抗栓作用机制的体外实验研究[J];中国生化药物杂志;2001年05期

3 王晓玲,刘平,刘成海,徐列明,刘成,胡义杨;丹酚酸A对成纤维细胞活力、增殖及胶原合成的影响[J];中西医结合肝病杂志;2000年01期

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1 许庆友;活血化瘀中药抗肾间质纤维化的实验及临床研究[D];河北医科大学;2002年

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本文编号：337299