人心脏干细胞获取数量的影响因素及其亚群类别
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【摘要】:研究目的:探索年龄和性别对人心脏干细胞获取数量的影响;干细胞亚群的类型及其阳性表达比例。研究方法:选择因先天性心脏病进行外科开胸手术的患儿30人,记录一般资料,包括年龄、性别及畸形类型。按照不同年龄阶段分两组(0-3岁组及3-11岁组);按照性别分成男女两组,进行不同性别的比较。经全身麻醉、气管插管和胸骨正中手术入路,暴露心脏。体外循环插管前缝荷包线采集右心耳组织、分离、提取心脏干细胞,心脏干细胞进行传代培养2周,形成稳定的细胞系。应用独立样本t检验比较不同年龄阶段及不同性别的患者人心脏干细胞的获取数量;应用Pearson法分析年龄与获取人心脏干细胞数量之间的关系;通过免疫荧光染色观察干细胞亚群的类型,使用流式细胞术检测各组亚群阳性表达的比例。研究结果:培养2周后,0-3岁与3-11岁患者的人心脏干细胞获取数量有统计学差异(P0.05);人心脏干细胞数量与年龄呈负相关(r=-0.869,P0.01),年龄越小细胞获取量越高;性别对获取细胞的数量无明显影响(P0.05)。免疫荧光染色提示,干细胞两种亚群c-Kit与Isl-1均阳性表达。流式细胞术分析显示,在1×105的数量级中,c-Kit+细胞占(3.28±0.94)%,Isl-1+细胞占(1.21±0.37)%。研究结论:在未成年人心房组织中获取人心脏干细胞时,性别不作为主要的考虑因素;主要参考的因素为患儿年龄,年龄越小的患者获取的干细胞越多、来源越充足;心脏干细胞亚群中以c-Kit表达阳性的干细胞为主。
【关键词】:人心脏干细胞 c-Kit Isl-1 干细胞亚群
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R541.6
【目录】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-9
- 缩略语/符号说明9-10
- 前言10-15
- 研究现状、成果10-13
- 研究目的、方法13-15
- 1.1 对象和方法15-24
- 1.1.1 实验对象15-18
- 1.1.2 仪器和试剂18-19
- 1.1.3 配制试剂19
- 1.1.4 细胞生物学实验19-23
- 1.1.5 统计学方法23-24
- 1.2 结果24-29
- 1.2.1 干细胞的分离、培养和计数24-25
- 1.2.2 流式细胞检测25-26
- 1.2.3 免疫荧光染色26-27
- 1.2.4 年龄、性别对干细胞数目的影响27-29
- 1.3 讨论29-36
- 1.4 结论36
- 1.5 展望36-40
- 参考文献40-46
- 发表论文和参加科研情况说明46-47
- 附录47-49
- 综述49-68
- 综述参考文献62-68
- 致谢68
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本文编号:345215
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