木兰提取物对糖尿病视网膜病变的影响

发布时间：2017-05-10 21:02

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【摘要】：研究目的： 糖尿病性视网膜病变是糖尿病微血管并发症之中首要危险的，需要特别注意对它的预防和治疗，视网膜病变失明的失明患者数量是5倍的非糖尿病失明患者人数，居临床上眼科双眼失明总数的第一位。以往的探究认为，造成糖尿病视网膜病变的病发缘由中首要的是对视网膜形成损伤持续缺血缺氧状态，随之代偿性的刺激血管内皮生长因子（VEGF）增多，促成构造视网膜新生血管。最近这些年研究已经证实，炎症和氧化应激都参与了糖尿病引起的视网膜微血管病症的产生。炎症这一病理学进程是临床最为常见的，可以产生在身体的各个组织和各种器官的不同部位，可以伴随目前所知的全部疾病，糖尿病和由糖尿病引起的并发症也不例外。许多研究表明，炎症其实为引起糖尿病视网膜病变的元凶。临床上，抗炎治疗也成为治疗糖尿病视网膜病变的新方向。也有研究指出，氧化应激对糖尿病引起的视网膜微血管病变的发展程度负有重要的责任。人体血糖浓度持续保持高水平状态，引起种种代谢混乱，刺激了视网膜的氧化应激增强，ROS代偿性增加,在视网膜中堆积增多，引发一系列的损伤响应，这些都造成视网膜的症状恶化。木兰提取物是来源于木兰植物的提取物质，近10年来，国内外许多专家学者和机构对木兰植物进行了系统性研究并取得了丰富的收获，发现从它提取的多种成分具有抑制炎症、保护机体避免氧化伤害等效用，并且有些活性成分已经研制成产品应用于临床。然而，木兰提取物对糖尿病性视网膜微血管病症是不是具有抵御能力和医治效果仍然还是未知,但这从理论上来讲是可行的。基于此，本文旨在通过实验总结探讨木兰提取物对预防和治疗由糖尿病引起的视网膜并发症的潜在可能性。 研究方法： 我们首先将统一繁殖饲养的75只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组（15只）、糖尿病模型组（60只）。利用链脲佐菌素将糖尿病模型组小鼠诱导创建糖尿病模型，继续高脂喂养。从60只糖尿病模型组中随机选择15只为糖尿病模型未干预组，45只为木兰提取物干预组，并将45只小鼠随机分为低浓度组（10ml/kg，腹腔内注射）、中浓度组（20ml/kg，腹腔内注射）和高浓度组（40ml/kg，腹腔内注射），正常对照组和糖尿病未干预组小鼠腹腔注射等容量安慰剂（20ml/kg生理盐水）。用戊巴比妥钠麻醉处死小鼠，摘除眼球，采用免疫组织化学染色法检测视网膜中PAI-1、TNF-α、4-HNE、VEGF的表达水平；免疫荧光染色法检测检测Nrf2水平。应用Image Pro Plus软件进行半定量统计分析，origin7.5统计学软件进行数据统计。 研究结果： 1．采用免疫组织化学染色法检测各组别小鼠视网膜中的PAI-1的表达，应用木兰提取物后PAI-1显著低于糖尿病未干预组，特别是在血管周围。 2．采用免疫组织化学染色法检测各组别小鼠视网膜中的TNF-α的表达，木兰提取物组（低浓度、中浓度、高浓度）与糖尿病模型未干预组相比较，TNF-α表达明显降低，且中浓度组的效果最好。 3．采用免疫组织化学染色法检测各组别小鼠视网膜中的4-HNE的表达，应用木兰提取物后视网膜各层中4-HNE与糖尿病未干预组相比显著减少，与正常对照组的水平相当。 4．采用免疫组织化学染色法检测各组别小鼠视网膜中的VEGF的表达,低浓度木兰提取物能够最有效的降低糖尿病视网膜中VEGF水平，，但随着浓度增加其效果越不明显。 5．采用免疫荧光染色法检测各组别小鼠视网膜中的Nrf2的表达, Nrf2在糖尿病状态下代偿性增加，低浓度木兰提取物可使其表达增加。 研究结论： 1．木兰提取物可控制视网膜炎症因子，减少炎症反应； 2．木兰提取物可抑制视网膜血管通透性增加； 3．木兰提取物可抑制视网膜新生血管的产生； 4．木兰提取物可减少视网膜的氧化损伤伤害，提高视网膜抗氧化能力； 5．木兰提取物对糖尿病视网膜病变有一定的预防和治疗作用。
【关键词】：木兰提取物 视网膜病变 炎症 氧化应激
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-10
• 英文缩略词表10-13
• 第1章 文献综述13-17
• 1.1 炎症参与糖尿病引起的视网膜并发症14
• 1.2 VEGF 和 PAI-1 促进视网膜病变新生血管的生成14-15
• 1.3 氧化应激与糖尿病视网膜病变的关系15-16
• 1.4 木兰提取物医治糖尿病视网膜病变的可行性16-17
• 第2章 材料方法17-20
• 2.1 实验动物17
• 2.2 实验方法17-19
• 2.2.1 模型制备及分组17
• 2.2.2 样品采集和处理17
• 2.2.3 4%多聚甲醛磷酸缓冲液（pH7.3）固定液的配制17-18
• 2.2.4 石蜡切片18
• 2.2.5 免疫组织化学染色18-19
• 2.2.6 免疫荧光染色19
• 2.3 统计学处理19-20
• 第3章 结果20-26
• 3.1 实验小鼠的一般状态变化20
• 3.2 应用木兰提取物能减少 PAI-1 在视网膜的表达20-21
• 3.3 应用木兰提取物对 TNF-α的影响21-22
• 3.4 氧化损伤标志物 4-HNE 的表达情况22-23
• 3.5 木兰提取物对糖尿病视网膜中 VEGF 的影响23-24
• 3.6 木兰提取物能上调 Nrf2 的表达24-26
• 第4章 讨论26-30
• 4.1 VEGF 与糖尿病性视网膜并发症的联系26-27
• 4.2 PAI-1 与糖尿病性视网膜并发症的联系27-28
• 4.3 TNF-α与糖尿病性视网膜并发症的联系28
• 4.4 4-HNE 与糖尿病性视网膜并发症的联系28
• 4.5 Nrf2 与糖尿病性视网膜并发症的联系28-30
• 第5章 结论30-31
• 参考文献31-39
• 作者简介39-40
• 致谢40

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

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本文编号：355434