依托咪酯对新生大鼠离体脊髓腹角神经元电生理特性及nAChR的影响

发布时间：2022-07-15 10:48

　　目的:脊髓是人体运动控制的初级中枢,存在复杂的胆碱能神经系统,能直接或间接地参与脊髓的运动控制。烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptor,nAChR）在脊髓腹角有广泛分布,对于脊髓运动控制具有重要的调制功能。探讨依托咪酯（etomidate,ET）对脊髓腹角神经元电生理特性及nAChR的影响,这不仅有助于深化理解ET发挥麻醉作用的脊髓机制,也将为指导临床用药提供新的理论依据。方法:选用7?12 d新生Sprague Dawley（SD）大鼠,麻醉后,将其含有腰骶膨大的脊髓游离并切片,用木瓜蛋白酶（Papain,0.18 g/30 ml人工脑脊液）对脊髓切片进行恒温消化20-25 min后孵育40-50 min,在体视显微镜下选出切片的腹角,用经火抛光的不同口径的巴斯德吸管对神经细胞进行急性机械分离,对贴壁的状态良好的神经细胞结合药理学方法实施穿孔膜片钳记录实验。在电流钳模式下,先记录脊髓腹角神经元自发动作电位（Action Potential,AP）,然后结合预处理给药方式,分别记录不同浓度的依托咪酯对脊髓腹角神经元自发AP的影响。在电压钳模... 

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
材料与方法
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验设备、仪器与软件
        1.3 实验溶液与药品
    2 实验方法
        2.1 实验技术路线
        2.2 脊髓切片制备
            2.2.1 实验前准备
            2.2.2 游离脊髓
            2.2.3 脊髓切片
        2.3 急性机械分离脊髓腹角神经元
            2.3.1 酶消化脊髓切片
            2.3.2 机械吹打脊髓腹角切片
        2.4 快速给药系统结合重力给药
        2.5 穿孔膜片钳记录
            2.5.1 实验前准备
            2.5.2 实验操作
            2.5.3 实验模式
        2.6 数据采集与分析
结果
    1 脊髓腹角神经元的形态学观察
    2 依托咪酯对脊髓腹角神经元电生理特性的影响
    3 依托咪酯对脊髓腹角神经元尼古丁电流的作用
    4 依托咪酯对脊髓腹角神经元尼古丁电流的抑制具有浓度依赖性
    5 依托咪酯对脊髓腹角神经元尼古丁电流的抑制具有电压依赖性
    6 依托咪酯对脊髓腹角神经元尼古丁电流的抑制具有使用依赖性
讨论
    1 脊髓切片及实验结果评估
    2 依托咪酯对脊髓腹角神经元AP的影响及可能机制
    3 依托咪酯对脊髓腹角神经元放电频率的抑制
    4 依托咪酯对脊髓腹角神经元尼古丁电流的抑制
        4.1 依托咪酯浓度依赖性地抑制脊髓腹角神经元尼古丁电流
        4.2 依托咪酯电压依赖性地抑制脊髓腹角神经元尼古丁电流
        4.3 依托咪酯使用依赖性地抑制脊髓腹角神经元尼古丁电流
结论
参考文献
综述
    参考文献
作者简介及读研期间主要科研成果
致谢



本文编号：3661898