骨痹合剂对大鼠膝骨性关节炎模型IL-1β、TNF-α表达的影响及其颈椎退变的实验研究

发布时间：2017-05-16 22:07

  本文关键词：骨痹合剂对大鼠膝骨性关节炎模型IL-1β、TNF-α表达的影响及其颈椎退变的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:复制一种与人类膝关节骨性关节炎发病过程相似的去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨性关节炎模型[1-3]。观察骨痹合剂对该模型IL-1β和TNF-α表达的影响,同时探讨该模型大鼠颈椎退变的可能作用机制。方法:选用怀孕15日龄的SD大鼠12只,分别置于不同的笼子中饲养,把出生第10天的40只幼鼠,按体重大小排序后随机分为四组,分别为空白对照组、生理盐水组、氨糖美辛组、骨痹合剂组,每组10只。四组均在腹腔麻醉下手术去除双前肢,手术后置于原母鼠饲养笼内继续饲养,再去除双前肢四个月后右膝关节行Hulth法手术。骨痹合剂组按0.5m L/100g体重给予骨痹合剂灌胃;氨糖美辛组给予氨糖美辛肠溶片2mg/100g,置于同体积的蒸馏水中待其融化摇匀后,给予灌胃;生理盐水组按0.5ml/100g体重给予生理盐水灌胃;空白对照组不做任何干预,持续4周时间为干预过程。然后麻醉处死相对应的各组大鼠,取下右膝关节、颈椎通过固定、脱钙、脱水、包埋、切片、捞片、烤片,行HE染色、甲苯胺蓝染色、藏红固绿染色及IL-1β、TNF-α免疫组化检测。结果:(1)右膝关节HE染色、藏红固绿染色、甲苯胺蓝染色三种染色中空白对照组、生理盐水组较氨糖美辛组、骨痹合剂组的关节软骨表层欠光滑,部分关节表面出现了断裂和裂隙,软骨细胞分布不均匀且排序不整齐,软骨细胞各层次模糊,可见细胞簇集现象,潮线不完整,局部染色不均匀,关节软骨部分淡染失染。IL-1β和TNF-α免疫组化染色显示空白对照组和生理盐水组较氨糖美辛组、骨痹合剂组阳性细胞表达率高。(2)颈椎HE染色、藏红固绿染色、甲苯胺蓝染色三种染色中空白对照组、生理盐水组较氨糖美辛组、骨痹合剂组软骨终板细胞分布不均匀,排列不整齐,软骨各层次模糊,并可见细胞簇集现象,局部染色不均匀,出现淡然失染现象。纤维环排列不规则紊乱,部分出现断裂和裂隙,髓核皱缩,椎间盘内积气,出现“真空现象”。结论:(1)骨痹合剂对去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨性关节炎模型产生了影响,可通过下调IL-1β和TNF-α的表达,延缓膝骨性关节炎软骨细胞的退变进程。(2)骨痹合剂对该模型大鼠的颈椎亦产生了影响,延缓了颈椎退变进程。
【关键词】：KOA 骨痹合剂 IL-1β TNF-α 大鼠模型 颈椎病
【学位授予单位】：云南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 英文缩略词一览表11-12
• 前言12-14
• 第一部分 骨痹合剂对大鼠膝骨性关节炎模型IL-1β 和TNF-α表达的影响14-35
• 前言14-17
• 1.实验材料和研究方法17-22
• 1.1 实验动物与方法17-18
• 1.2 实验试剂及药品18
• 1.3 主要实验器材18-19
• 1.4 实验动物模型的建立19-20
• 1.4.1 去双前肢直立大鼠模型建立19
• 1.4.2 建立去双前肢直立联合Hulth法大鼠KOA模型19-20
• 1.5 给药干预方法20
• 1.6 标本制备20
• 1.7 标本实验方法20-21
• 1.8 形态学检测21
• 1.8.1 HE染色21
• 1.8.2 藏红固绿染色21
• 1.8.3 甲苯胺蓝染色21
• 1.9 免疫组化检测21-22
• 2.统计方法22
• 3.结果22-28
• 3.1 HE染色的形态学观察22-23
• 3.2 藏红固绿染色的形态学观察23-24
• 3.3 甲苯胺蓝染色的形态学观察24-25
• 3.4 免疫组化检测25-28
• 3.4.1 IL-1β 免疫组化检测25-27
• 3.4.2 TNF-α 免疫组化检测27-28
• 4.结论28-29
• 5.讨论29-33
• 5.1 中医学对膝骨性关节炎的认识29-30
• 5.2 骨痹合剂对膝骨性骨关节炎的作用30-31
• 5.3 IL-1β、TNF-α 与膝骨性关节炎的关系31-33
• 参考文献33-35
• 第二部分 骨痹合剂对大鼠膝骨关节炎模型颈椎退变的实验研究35-49
• 前言35-36
• 1. 实验材料和方法36-38
• 1.1 实验标本制备36
• 1.2 实验试剂及药品36
• 1.3 主要实验器材36-37
• 1.4 标本制备37
• 1.5 标本实验方法37
• 1.6 形态学检测37-38
• 1.6.1HE染色37-38
• 1.6.2 藏红固绿染色38
• 1.6.3 甲苯胺蓝染色38
• 1.7 统计方法38
• 2. 结果38-44
• 2.1 HE染色的形态学观察38-39
• 2.2 藏红固绿染色的形态学观察39-40
• 2.3 甲苯胺蓝染色的形态学观察40-41
• 2.4 部分数据测量结果41-44
• 2.4.1 软骨终板厚度测量41-42
• 2.4.2 纤维环厚度测量42-43
• 2.4.3 髓核厚度测量43-44
• 3. 结论44
• 4. 讨论44-49
• 4.1 中医学对颈椎病的认识44-46
• 4.2 直立体位与脊柱退变关系46-47
• 4.3 软骨终板、纤维环、髓核与椎间盘退变的关系47-49
• 总结49
• 主要特点及价值49-50
• 问题及展望50
• 参考文献50-52
• 文献综述52-58
• 参考文献54-58
• 致谢58

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李玉琴;罗美瑜;;促肾上腺皮质激素释放激素、TNF-α与妊娠期高血压疾病[J];国外医学.妇产科学分册;2005年06期

2 张松,张美齐,饶邦复;TNF-α诱导小鼠病毒性心肌炎心肌细胞凋亡[J];基础医学与临床;2005年03期

3 郎江蓉;武云霞;;复发性阿弗他溃疡患者唾液及血清中TNF-α的表达及其相关性研究[J];实用口腔医学杂志;2010年03期

4 郎江蓉;姚向阳;赵如玲;刘国霞;郭李娜;;复发性阿弗他溃疡患者TNF-α的表达及临床意义[J];长治医学院学报;2011年05期

5 魏华,刘燕;36例多系统器官功能衰竭患者血清TNF的动态观察[J];泰山医学院学报;1997年03期

6 詹林达,何训昌,缪灿铭;丹芍汤对肝肾阴虚湿热型慢性肾炎血清TNF水平的影响[J];辽宁中医学院学报;2001年04期

7 吕佩源,徐俊英;TNF-α在实验性变态反应性脑脊髓炎中变化的意义[J];中风与神经疾病杂志;2002年01期

8 袁普卫,刘德玉,贺西京,殷继超,杨平林,王国毓;激素性股骨头缺血性坏死血清中TNF-α变化的实验研究[J];中国矫形外科杂志;2004年06期

9 叶一秀,王巍,李洪敏,王安生,姚昊,孙立群,王仲元,刘金伟,李楠,郭晓青,陈红兵,林明贵,王金河,何珂;严重急性呼吸综合征患者血清TNF含量动态观察及评价[J];标记免疫分析与临床;2004年04期

10 柯绍发,王恩,周元林;急性脱髓鞘性脑病脑脊液TNF-α水平的观察和意义[J];实用神经疾病杂志;2005年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 朱桂英;蔡景龙;樊树强;高玲;;阿司匹林对TNF-α诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞NF-κB信号传导通路和凋亡影响的实验研究[A];第4届中国美容与整形医师大会论文汇编[C];2007年

2 朱桂英;樊树强;高玲;蔡景龙;;阿司匹林抑制TNF-α诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞NF-κB活化且增强其凋亡[A];第四届华东六省一市整形外科学术会议暨2007年浙江省整形、美容学术会议论文汇编[C];2007年

3 肖强兵;何承建;曾俊华;邹季;王向荣;;风湿骨痛药酒药槌外治法对兔退变腰椎间盘内TNF-α表达的影响[A];第十九届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2012年

4 叶晓华;郑雯洁;杨青;;TNF-α抑制剂治疗幼年特发性关节炎全身型1例并文献复习[A];2012年浙江省风湿病学学术年会论文集[C];2012年

5 肖强兵;何承建;曾俊华;邹季;王向荣;;风湿骨痛药酒药槌外治法对兔退变腰椎间盘内TNF-α表达的影响[A];第二十届全国中西医结合骨伤科学术研讨会、第二届中国医师协会中西医结合医师分会骨伤科学术年会、第十九届浙江省中西医结合骨伤科专业委员会学术年会论文汇编[C];2013年

6 图门乌力吉;马忠森;;特发性间质性肺炎经支气管镜肺活检组织中TNF-α的表达及其意义[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

7 许腊梅;孙丹莉;张予蜀;张振玉;李晓翠;;紧密连接蛋白occludin在非酒精性脂肪性肝病大鼠肠上皮细胞中的表达及其与TNF-α的关系[A];第二十二届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2010年

8 廖晓星;李锦华;;反义TNF-α寡脱氧核苷酸降低多器官功能不全综合征大量死亡率[A];中华医学会急诊医学分会复苏、灾害、中毒专业联合学术交流会资料汇编[C];1999年

9 林秋雄;余细勇;单志新;林曙光;Huiyao lan;;氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞TNF-α的时序表达[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年

10 杨涛;解军;张悦红;吴博威;牛勃;;利用噬菌体表面展示技术制备TNF-α单链抗体的研究[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 徐海洋;TNF对转染TNFR2的Hep2细胞影响的研究[D];吉林大学;2006年

2 朱桂英;阿司匹林抑制TNF-α诱导的NF-κB活化在瘢痕疙瘩治疗中作用的实验研究[D];山东大学;2007年

3 赵宁;NF-κB信号通路介导的TNF-α抑制骨髓基质细胞成骨分化过程中的作用研究[D];山东大学;2012年

4 孙兆义;TNF-α和NF-κB p65在煤尘接触诱发干眼症过程中表达的实验研究[D];中国医科大学;2009年

5 姚若进;蜕膜细胞中孕激素受体及TNF-α、IL-1β、NF-κB改变致自然流产的研究[D];中南大学;2011年

6 卢明鸥;TNF-α在实验性自身免疫性神经炎及KA致中枢神经变性病中的作用[D];吉林大学;2011年

7 乔海fE;TNF-α诱导B16细胞凋亡的核蛋白质组研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

8 郁博;糖皮质激素及TNF-α对人角质形成细胞GRα/GRβ、NF-κB/IκB表达的影响[D];第三军医大学;2008年

9 李锁北;七氟醚预处理抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞炎症反应及机制的研究[D];中南大学;2010年

10 金光明;阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者血清瘦素、胰岛素、TNF-α水平及其互相关系的研究[D];中国医科大学;2002年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 于艳茹;外周血NF-κB和TNF-α表达与甲状腺相关性眼病相关性研究[D];山西医科大学;2011年

2 黄鸿程;针剌对中风后轻度认知功能障碍（痰瘀型）患者的疗效及血清IL-6、TNF-α水平的影响[D];福建中医药大学;2015年

3 王博;健脑益智胶囊对TBI大鼠脑神经元形态改变及脑组织TNF-α和NF-κB表达的影响[D];陕西中医药大学;2015年

4 马勇;血清TNF-α与急性胰腺炎严重程度的相关性[D];青海大学;2015年

5 牛珩;黄芪甲苷对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响及作用机制[D];山东大学;2015年

6 李蓉;胃癌患者营养状况与瘦素、NF-κB、TNF-α、IL-6的相关性研究[D];昆明医科大学;2015年

7 朱紫燕;臭氧水穴位注射对胶原诱导性关节炎模型大鼠血清中TNF-α、IL-6的影响[D];河南中医学院;2015年

8 毛齐彬;糖皮质激素治疗后TNF-α水平与甲状腺相关性眼病活动度的相关性研究[D];浙江大学;2015年

9 李卫梅;TNF-α在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及临床意义[D];南昌大学医学院;2015年

10 梁晓辉;WJ-MSCs对心肌梗死后心力衰竭TNF-α和NT-proBNP的影响[D];桂林医学院;2015年

  本文关键词：骨痹合剂对大鼠膝骨性关节炎模型IL-1β、TNF-α表达的影响及其颈椎退变的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：371998