右美托咪啶对糖氧剥夺/再灌注诱导神经细胞凋亡的保护作用

发布时间：2023-05-07 03:32

　　背景:右美托咪啶(Dexmedetomidine,Dex)是一种高选择性、高特异性的α2肾上腺素受体激动剂,具有镇静、催眠、麻醉和镇痛作用,其α2:α1受体亲和力之比为1620:1。在大量临床与基础实验中均发现右美托咪啶能够显著抑制神经细胞凋亡以及对发育中脑组织具有神经保护作用,但其在细胞分子水平的作用机制尚不十分清楚。内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激作为真核细胞的一种保护性应激反应,也是ER内稳态亚细胞损伤的病理过程。诸如营养不足、钙浓度变化氧化应激、以及缺血再灌注损伤等生理病理情况均能诱导ER内蛋白质的错误折叠,诱发ER应激。作为启动细胞凋亡的重要途径之一,研究已表明ER应激参与了心、脑、肾等重要器官缺血再灌注损伤的病理生理过程。本实验旨在细胞水平观察不同浓度右美托咪啶对糖氧剥夺/再灌注诱导神经元细胞凋亡的保护作用,并探讨ER应激在其神经保护作用中的潜在机制。目的:探索并研究Dex对OGD/R诱导神经细胞凋亡的保护作用。应用10μM全反式维甲酸(ATRA)3天和80n M十四烷酰佛波醇乙酯酸(TPA)3天序贯诱导SH-SY5Y细胞向神经元分化。根据预实...

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1. 引言
2. 材料与方法
    2.1 细胞株
    2.2 抗体
    2.3 主要试剂与耗材
    2.4 主要设备与仪器
    2.5 主要试剂及溶液配方
    2.6 细胞培养与药物诱导分化
        2.6.1 细胞培养
        2.6.2 ATRA与TPA序贯诱导SH-SY5Y细胞分化
    2.7 诱导后细胞免疫荧光
    2.8 糖氧剥夺再灌注OGD/R模型的构建
    2.9 右美托咪啶处理后细胞存活率MTT检测
    2.10 右美托咪啶处理后细胞流式细胞凋亡检测
    2.11 免疫印迹法检测内质网相关蛋白的表达
        2.11.1 蛋白质样品的制备与低温储存
        2.11.2 SDS-PAGE凝胶制备
        2.11.3 上样和电泳分离
        2.11.4 转膜
        2.11.5 IB检测
    2.12 统计方法
3. 结果
    3.1 ATRA 与 TPA 序贯诱导 SH-SY5Y 向神经元分化
    3.2 ATRA与TPA序贯诱导SH-SY5Y向神经元分化后Neun染色
    3.3 OGD12h/R12h SH-SY5Y细胞存活率接近 50%
    3.4 10μM DEX抑制OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞凋亡
    3.5 内质网应激相关蛋白表达
4. 讨论
5. 结论
6. 引用文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3810187