基于LXRs信号转导途径探讨消瘀化痰方药治疗NAFLD的机制研究

发布时间：2017-05-22 13:18

  本文关键词：基于LXRs信号转导途径探讨消瘀化痰方药治疗NAFLD的机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过动物实验,观察消痰化瘀中药对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠血清中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及肝组织中TC含量的影响,以及对肝X受体α(LXRα)m RNA及其下游基因固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)和胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)表达的影响,探讨消痰化瘀中药对NAFLD的治疗作用及其可能的作用机制。方法:选用雄性SD大鼠60只,体重180±20g。自由饮水进食,饲养于18-22℃明暗各12小时的清洁级动物实验室内。适应性喂养一周后,按体重分层随机分为6组,每组10只。具体分组情况如下:正常对照组(简称正常组)、模型对照组(简称模型组)、阳性药东宝肝泰对照组(简称对照组)和消痰化瘀中药高剂量组(简称高剂量组)、消痰化瘀中药中剂量组(简称中剂量组)、消痰化瘀中药低剂量组(简称低剂量组),采用喂饲高脂饲料的方法复制大鼠NAFLD模型,共造模8周。造模的同时,各用药组灌服治疗药或对照药,正常组与模型组灌服等量的生理盐水,每天灌胃一次,每次给药量均按1ml/100g体重计算。于最后一次给药后禁食不禁水12h,麻醉状态下股动脉取血,将血样离心,分离血清,检测血清中TC、TG、HDL-C、LDL-和FFA的含量。同时迅速剖取肝脏,取肝右叶的部分肝组织,-70℃冰箱冷冻,以备RT-PCR法检测LXRαm RNA、SREBP-1cm RNA和CYP7A1m RNA的表达变化。并取适宜大小的肝组织置于4%多聚甲醛液中固定,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察肝组织形态学的变化。另取少许肝组织冷冻以备检测肝匀浆TC、TG的含量。结果:1各组大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和FFA的含量变化模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C的含量(3.298±0.256,1.180±0.153,2.743±0.466,436.481±52.151)比正常组(1.371±0.196,0.512±0.093,0.440±0.050,243.335±50.284)均明显升高(P0.01),HDL-C含量(0.719±0.098)比正常组(1.119±0.186)明显降低(P0.01),说明大鼠出现明显的血脂异常,显示造模成功。与模型组比较,各用药组均能明显降低大鼠TC、TG、LDL-C和FFA的含量,升高HDL-C的含量(P0.01)。其中消痰化瘀高、中、低三个剂量组的TC(1.484±0.239,1.690±0.271,1.741±0.269)、TG(0.554±0.098,0.574±0.093,0.669±0.105)、LDL-C(0.885±0.181,1.095±0.266,1.215±0.289)和FFA(242.191±35.130,259.780±29.330,277.622±34.284)的含量均低于对照组(2.131±0.352,0.827±0.109,1.593±0.313,324.051±56.061)(P0.05或P0.01),HDL-C(1.480±0.219,1.296±0.228,1.305±0.233)的含量高于对照组(1.123±0.131)(P0.05或P0.01);高剂量组TC、TG、LDL-C和FFA的含量低于低剂量组(P0.05),HDL-C的含量高于中、低剂量组(P0.05),中剂量组TC、TG、LDL-C和FFA的含量虽低于低剂量组,HDL-C的含量虽高于低剂量组,但统计学处理均未见显著性差异(P0.05)。2各组大鼠肝组织中TC、TG的含量变化模型组大鼠肝组织TC、TG的含量(15.982±2.366,36.979±4.283)明显高于正常组(6.129±0.843,21.280±3.031)(P0.01);与模型组比较,各用药组大鼠肝组织TC、TG的含量均明显降低(P0.01)。其中,消痰化瘀中药高、中、低三个剂量组肝组织TC(7.145±0.819,8.592±0.948,9.963±1.044)、TG(23.650±3.276,24.409±3.150,26.368±3.598)的含量均低于阳性药对照组(10.946±1.871,29.591±4.376)(P0.05或P0.01);高、中剂量组TC的含量低于低剂量组(P0.05),高剂量组低于中剂量组(P0.05);高剂量组TG的含量低于低剂量组(P0.05),而高、中剂量组之间未见显著性差异((P0.05)。3各组大鼠肝组织形态学的变化正常组大鼠肝小叶和肝血窦结构清晰,肝细胞排列整齐,围绕中央静脉呈放射状,细胞核形态正常,胞浆均匀。模型组大鼠肝细胞排列紊乱,脂肪变性明显,细胞形状不规则,大小不一致,多数胞浆中可见大小不等、数目众多的脂肪滴,细胞核偏离正常位置。与模型组比较,各治疗组大鼠肝细胞脂肪空泡和脂滴数量显著减少,肝小叶和肝血窦结构比较清晰,脂肪变性程度均有明显改善。4各组大鼠肝组织LXRαm RNA表达的变化模型组大鼠肝组织LXRαm RNA的表达(1.337±0.216)明显低于正常组(0.426±0.056)(P0.01)。经药物干预后,各用药组LXRαm RNA的表达均高于模型组(P0.01);其中,消痰化瘀高、中、低剂量组的LXRαm RNA表达(0.537±0.059,0.605±0.072,0.691±0.083)均低于对照组(0.772±0.052)(P0.05或P0.01);高剂量组LXRαm RNA的表达低于中、低剂量组(P0.05或P0.01),中剂量组低于低剂量组(P0.05)。5各组大鼠肝组织SREBP-1c表达的变化模型组大鼠肝组织SREBP-1cm RNA的表达(1.026±0.236)明显高于正常组(0.361±0.051)(P0.01);与模型组比较,各用药组SREBP-1cm RNA的表达均明显降低(P0.01);其中,消痰化瘀高、中、低剂量组的SREBP-1cm RNA表达(0.503±0.061,0.532±0.072,0.581±0.041)均低于对照组(0.636±0.033)(P0.05或P0.01);高剂量组SREBP-1cm RNA的表达低于低剂量组(P0.05);高、中剂量组之间未见显著性差异((P0.05)。6各组大鼠肝组织CYP7A1m RNA表达的变化模型组大鼠肝组织CYP7A1m RNA的表达(0.295±0.044)明显低于正常组(0.782±0.091)(P0.01);与模型组比较,各用药组CYP7A1m RNA的表达均明显升高(P0.01)。其中,消痰化瘀高、中、低剂量组的SREBP-1cm RNA表达(0.653±0.071,0.522±0.063,0.619±0.081)均高于对照组(0.459±0.066)(P0.01);高、低剂量组CYP7A1m RNA表达量高于中剂量组(P0.01),而高、低剂量组之间未见显著性差异(P0.05)。结论:1消痰化瘀中药能降低非酒精性脂肪肝大鼠血清TC、TG、LDL-C的含量,升高HDL-C的含量,具有良好的调节血脂作用。2消痰化瘀中药能明显改善非酒精性脂肪肝大鼠肝组织脂变程度,表现为用药后肝组织TC、TG的含量明显降低,光镜下可见肝细胞脂肪变程度明显减轻,脂肪空泡和脂滴数量显著减少。3消痰化瘀中药能抑制非酒精性脂肪肝大鼠肝组织LXRαm RNA的过度表达,降低脂质在肝脏的沉积,从而达到防治非酒精性脂肪肝的目的。4消痰化瘀中药能抑制非酒精性脂肪肝大鼠肝组织SREBP-1c的过度表达,减少脂肪合成,阻止脂质在肝脏的沉积,防止脂肪肝的形成。5消痰化瘀中药能上调非酒精性脂肪肝大鼠肝组织CYP7A1m RNA表达,促进胆固醇向胆汁酸转化,加强胆固醇的代谢和排泄,从而改善血脂状况。
【关键词】：非酒精性脂肪肝 消痰化瘀中药 肝X受体 胆固醇7α羟化酶 固醇调节元件结合蛋白1c
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R259
【目录】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-13
• 英文缩写13-14
• 前言14-15
• 材料与方法15-19
• 结果19-21
• 附图21-24
• 附表24-26
• 讨论26-30
• 结论30
• 参考文献30-34
• 综述 中医药防治非酒精性脂肪肝的研究概况34-42
• 参考文献39-42
• 致谢42-43
• 个人简历43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 周鹤勤;钟广露;邱卫琴;;“疏肝降脂汤”治疗非酒精性脂肪肝48例临床研究[J];江苏中医药;2012年09期

2 熊焰;章志娟;刘鹏;王雅;;超微脂康饮对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型的疗效[J];临床肝胆病杂志;2015年01期

  本文关键词：基于LXRs信号转导途径探讨消瘀化痰方药治疗NAFLD的机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：385832