海兔素在肝微粒体中酶动力学及对酒精损伤大鼠Fas/FasL、TNF-α表达影响研究

发布时间：2024-01-20 19:11

　　目的研究海兔素(Aplysin)在大鼠肝微粒体体外代谢中的酶动力学以及CYP3A的特异性抑制剂酮康唑对海兔素体外代谢的影响；观察海兔素对酒精性肝损伤大鼠肝组织Fas、FasL表达及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-a)水平的影响。 方法1、15只雄性Wistar大鼠,颈椎脱臼处死,采用钙沉淀法制备大鼠肝微粒体,并通过BCA法测定大鼠肝微粒体的蛋白浓度。建立测定大鼠肝微粒体孵育液中海兔素含量的高效液相色谱法(HPLC),考察不同孵育时间(10、20、30、45、60、90min)、肝微粒体蛋白浓度(0.1,0.2,0.5,1.0,1.5,2.0mg/mL)、海兔素浓度(1,2,5,10,20,40,80mg/L)对代谢反应的影响,并采用双倒数作图法计算海兔素的酶促反应动力学参数(Km、Vmax、CLint);观察不同浓度酮康唑(0.5,2,5,10,20,40mg/L)对海兔素体外代谢的影响。2、50只雄性Wistar大鼠随机分为5组。正常对照组,每日灌胃生理盐水1次；酒精模型组,每日给予50%乙醇8mL/(kg·bw·d)灌胃,2周后把50%乙醇剂量递增为12mL/(kg·bw·d),继续...

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第1章 海兔素在大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学研究
    1 材料与方法
        1.1 仪器
        1.2 主要试剂
        1.3 实验动物
        1.4 主要试剂的配制
        1.5 实验方法
        1.6 方法学验证
        1.7 孵育时间对海兔素体外代谢的影响
        1.8 肝微粒体蛋白浓度对海兔素体外代谢的影响
        1.9 海兔素浓度对代谢反应的影响及酶促动力学参数
        1.10 酮康唑对海兔素体外代谢的影响
    2 结果
        2.1 大鼠肝微粒体蛋白浓度测定
        2.2 方法学验证
        2.3 孵育时间对海兔素体外代谢的影响
        2.4 肝微粒体蛋白浓度对海兔素体外代谢的影响
        2.5 海兔素浓度对代谢反应的影响及酶促动力学参数
        2.6 酮康唑对海兔素体外代谢的影响
    3 讨论
第2章 海兔素对酒精性肝损伤大鼠Fas/FasL及TNF-a表达的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验动物
        1.2 实验药物
        1.3 主要仪器
        1.4 主要试剂
        1.5 动物模型的建立
        1.6 海兔素对酒精性肝损伤大鼠肝指数的影响
        1.7 HE染色观察大鼠肝脏组织的病理学改变
        1.8 免疫组化法检测海兔素对大鼠肝脏组织Fas、FasL表达的影响
        1.9 ELISA法检测海兔素对大鼠血清中TNF-a水平的影响
        1.10 统计学分析
    2 结果
        2.1 海兔素对酒精性肝损伤大鼠肝指数的影响
        2.2 大鼠肝组织病理学观察
        2.3 海兔素对大鼠肝脏组织Fas、FasL表达的影响
        2.4 海兔素对大鼠血清中TNF-α水平的影响
    3 讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词对照表
致谢



本文编号：3881395