解脲脲原体感染对大鼠生殖细胞的影响及干预治疗的研究

发布时间：2017-06-04 02:07

  本文关键词：解脲脲原体感染对大鼠生殖细胞的影响及干预治疗的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)对生殖细胞的影响及抗生素治疗对解脲脲原体感染的作用。为探讨UU导致男性不育的机制提供依据及为临床治疗男性不育提供新思路。方法:(1)选用清洁级成年SD大鼠,随机分为对照组、7天组、14天组和治疗组,对照组24只大鼠,其余各组12只。7天组、14天组和治疗组每只大鼠经膀胱注射0.6ml的107CCU/ml UU菌液,对照组给予等体积的UU液体培养基。治疗组于注射后第七天给予美满霉素灌胃治疗。对照组和7天组于注射后7天,对照组、14天组和治疗组于注射后14天,分别用20%乌拉坦麻醉大鼠后打开腹腔,获取血液及睾丸组织进行研究。(2)用电子天平称取大鼠左右侧睾丸的重量。(3)提取各组睾丸组织DNA,经PCR扩增UU特异性的脲酶基因片段,琼脂糖电泳检测。(4)各组睾丸组织用Bouin’s固定液固定16~18小时,HE染色观察睾丸组织病理变化;TUNEL法检测细胞凋亡;免疫组化法检测凋亡蛋白Bak、Bax、Fas L。(5)用化学发光法检测各组大鼠血浆及睾丸间质液中睾酮水平。(6)各组睾丸组织用2%戊二醛固定2小时以上,透射电镜观察睾丸生精细胞的超微结构。结果:(1)UU感染后,在7天组、14天组和治疗组大鼠的睾丸组织中检测到UU特异性脲酶基因片段,而对照组未见。(2)UU感染7天组大鼠的睾丸重量稍低于其它各组,然而各组间睾丸的重量并无统计学意义。(3)HE染色显示7天组和14天组大鼠的睾丸组织呈炎症性病理变化,曲细精管生精细胞层次和数量减少,基底膜破坏,炎细胞浸润,成熟精子减少,但14天组睾丸组织炎症性病变较7天组轻,而治疗组睾丸组织结构接近正常。(4)UU感染后,7天组大鼠睾丸间质液中睾酮水平明显低于其它各组(P0.01),14天组、治疗组和对照组之间睾酮水平无统计学意义。(5)UU感染后,7天组和14天组大鼠血浆中睾酮水平明显低于对照组和治疗组(P0.01),14天组血浆中睾酮水平高于7天组(P0.05)。(6)TUNEL法检测发现,7天组、14天组和治疗组大鼠生精细胞凋亡率较对照组明显升高(P0.01);与治疗组相比,7天组和14天组生精细胞凋亡率均明显升高(P0.01),且7天组生精细胞凋亡率明显高于14天组(P0.01)。(7)透射电镜检测发现,UU感染7天组和14天组生精细胞的细胞核染色质出现浓缩、聚集化等凋亡表现,7天组生精细胞核膜皱缩,细胞核破裂,14天组细胞核染色质浓缩、聚集化有减轻的趋势。治疗组生精细胞形态结构较为完整。(8)免疫组化检测大鼠睾丸组织的凋亡蛋白Bak、Bax、Fas L发现:7天组、14天组和治疗组Bak蛋白均较对照组明显升高(P0.01),且7天组和14天组Bak蛋白表达均高于治疗组(P0.01或P0.05);与对照组和治疗组相比,7天组和14天组Bax蛋白表达均明显升高(P0.01),且7天组明显高于14天组(P0.05);与对照组相比,7天组、14天组和治疗组Fas L蛋白表达均升高(P0.01或P0.05),但7天组和14天组的Fas L蛋白表达高于治疗组(P0.01或P0.05),且7天组明显高于14天组(P0.01)。结论:(1)UU感染可导致大鼠睾丸组织出现病理性改变。(2)UU感染可导致大鼠睾丸组织生精细胞的细胞凋亡率及凋亡蛋白表达升高,表明UU感染能够诱导生精细胞发生凋亡。(3)UU感染可降低大鼠睾丸间质液及血浆中睾酮水平,表明UU感染可能与男性不育有关。(4)UU感染后经抗生素干预治疗有助于减轻睾丸组织炎症性病理损伤,减少生精细胞的凋亡和提高睾酮水平。
【关键词】：解脲脲原体 生精细胞 凋亡 睾酮
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R698.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 引言10-14
• 材料与方法14-21
• 结果21-29
• 讨论29-35
• 结论35-36
• 参考文献36-40
• 致谢40-41
• 附录A：英中文术语缩略语对照表41-42
• 附录B：常用试剂配制42-43
• 附录C：个人简历43
• 附录D：已发表的论文43-44
• 附录E：综述44-52
• 参考文献50-52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：419736