IGF-1在Mets大鼠和DM大鼠膀胱中的表达

发布时间：2017-06-30 01:00

  本文关键词：IGF-1在Mets大鼠和DM大鼠膀胱中的表达，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本实验通过建立代谢综合征和2型糖尿病大鼠模型,研究大鼠代谢综合征及2型糖尿病膀胱病变的镜下结构表现,运用免疫组化方法检测代谢综合征及2型糖尿病大鼠膀胱中胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)表达的变化,来探讨IGF-1在代谢综合征及糖尿病膀胱病变发生发展中的作用,为进一步阻止和治疗其病变提供实验基础。方法:成年雄性Wistar大鼠19只,体重150-200g,适应性喂养1周后随机分为三组:正常对照组5只,代谢综合征组7只,2型糖尿病组7只,正常对照组予以普通饲料喂养,代谢综合征组及糖尿病组予以高糖高脂饲料(基础饲料53.5%,猪油20%,蔗糖20%,蛋黄粉25%,胆盐0.5%,及胆固醇1%组成)喂养。第8周末,测定三组动物空腹血糖、空腹胰岛素水平,正常组及代谢综合征组的空腹血脂水平,应用稳态模型评估法(HOMA-IR)=空腹血糖(FBG)×空腹胰岛素(FINS)/22.5评价个体的胰岛素抵抗水平。糖尿病组大鼠禁食不禁水12h后,按照30mg/Kg单次腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ),其余两组腹腔注射等量的枸橼酸缓冲液。注射STZ 72小时后,测尾静脉空腹血糖,以空腹血糖16.7mmol/L为糖尿病成功模型,筛选符合条件的糖尿病组大鼠。继续正常组普通饲料,代谢综合征和糖尿病组高糖高脂饲料喂养,每周测定三组大鼠体重、尾静脉血葡萄糖浓度。饲养至第16周末,测量各组大鼠代谢笼24h饮水量及尿量。将各组大鼠称重后麻醉(10%水合氯醛,0.3ml/100g,腹腔注射),仰卧位固定后,完整切除膀胱,排净残余尿液后称量膀胱湿重,立即将标本放入固定液,剔除大鼠双侧肠系膜,附睾旁脂肪及肾周脂肪,滤纸吸干后称重,代表内脏脂肪重量。应用HE染色方法,光镜下观察三组大鼠膀胱逼尿肌结构,应用免疫组化方法,检测三组大鼠膀胱IGF-1的表达变化。统计学分析:采用SPSS19.0软件进行统计分析,所有数据以均数加减标准差(?x±SD)表示,两两均数的比较采用t检验或者t’检验,三组均数的比较采用单因素的方差分析(one way analysis of variance,one way ANOVA)。设定P0.05无统计学意义,P0.05表示差异具有统计学意义。结果:1代谢综合征大鼠模型的建立代谢综合征组大鼠8周的高脂饲料喂养后,与正常组相比,胰岛素抵抗指数(9.00±0.49VS4.96±0.74),空腹血糖(6.03±0.70VS3.74±0.51 mmol/L),空腹胰岛素(33.83±2.92VS29.82±0.79 u IU/ml),总胆固醇(2.05±0.16VS1.77±0.19 mmol/L)明显高于对照组(P0.05),表现出了高胆固醇、高血糖(尚未达到糖尿病诊断标准)、高胰岛素血症、胰岛素抵抗的状态,提示代谢综合征模型的成立。继续高脂饲料喂养至16周,在第8周的基础上,与正常组相比,甘油三酯(1.13±0.24VS0.74±0.34 mmol/L),低密度脂蛋白(0.38±0.04VS0.32±0.05 mmol/L),内脏脂肪/体重(6.82±0.63VS3.03±0.50%),明显高于对照组(P0.05),出现了高甘油三酯、高低密度脂蛋白及内脏型肥胖表现,提示高脂饲料喂养时间越长,诱导出现代谢综合征的要素越多。2 2型糖尿病模型的建立糖尿病组大鼠8周的高脂饲料喂养后,与正常组相比,空腹胰岛素(34.64±4.17VS29.82±0.79 u IU/ml),胰岛素抵抗指数(8.67±1.67VS4.96±0.74)明显高于对照组(P0.05),提示高胰岛素血症、胰岛素抵抗建立,给予腹腔注射STZ,72h后,所有糖尿病组大鼠空腹血糖均16.7mmol/L;此时大鼠满足高胰岛素血症、胰岛素抵抗、高血糖(达到糖尿病的诊断标准)状态,提示2型糖尿病大鼠模型形成。继续高脂饲料喂养至16周,24h饮水量(ml)及尿量(ml)相对于对照组明显增高(132.40±24.35VS41.60±8.89;P0.05)、(92.60±9.56VS5.36±0.58;P0.05);表现出多饮多尿状态,胰岛素抵抗指数相对于正常组仍增高(29.02±6.50VS6.04±0.78;P0.05),但血清胰岛素水平(u IU/ml)相对于正常组下降(24.83±3.76VS33.36±0.87;P0.05),提示随着糖尿病进展胰岛功能受损加重,胰岛素分泌降低。3膀胱湿重第16周三组大鼠膀胱湿重比较:正常组、代谢综合征组、糖尿病组(0.10±0.02、0.10±0.02、0.26±0.07 g),正常组和代谢综合征组均低于糖尿病组,均有统计学意义(P0.05),正常组与代谢综合征组比较,无统计学意义(P0.05)。4组织学变化糖尿病组:粘膜下可见少许炎细胞浸润,肌束排列松散,结构紊乱,肌束之间间隙明显增宽,肌束间血管扩张充血,逼尿肌肌细胞肥大明显,形态不一,胞浆空,部分可见淡染颗粒。代谢综合征组表现出了糖尿病组趋势。5 IGF-1的表达三组大鼠膀胱IGF-1表达比较:正常组、代谢综合征组、糖尿病组(0.336±0.011、0.314±0.018、0.212±0.032),糖尿病组均低于正常组和代谢综合征组,有统计学意义(P0.05),代谢综合征组与正常组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:1通过高脂喂养大鼠,可以引起胰岛素抵抗/高胰岛素血症、血脂紊乱状态,即代谢综合征。2代谢综合征能够使膀胱逼尿肌细胞轻度肥大及肌束排列松散,产生糖尿病膀胱病变,IGF-1在代谢综合征膀胱组织中表达无明显减少。3 2型糖尿病能够使膀胱逼尿肌细胞肥大及肌束排列紊乱,造成糖尿病膀胱病变,IGF-1在2型糖尿病膀胱组织中表达明显降低。4 IGF-1在2型糖尿病大鼠膀胱组织中表达减少,在2型糖尿病膀胱病变的发生发展中起了重要的作用。
【关键词】：胰岛素样生长因子-1 代谢综合征 2型糖尿病 膀胱 大鼠 免疫组化
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R589;R587.1
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-12
• 英文缩写12-13
• 前言13-14
• 材料与方法14-18
• 结果18-21
• 附图21-28
• 附表28-31
• 讨论31-38
• 结论38
• 参考文献38-42
• 综述 胰岛素样生长因子 -1 的临床应用进展42-51
• 参考文献48-51
• 致谢51-52
• 个人简历52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李祥;;代谢综合征与血清胰岛素样生长因子-1和高敏C反应蛋白之间的关系[J];中国医药科学;2013年01期

2 杨姗姗;胡秀芬;温宇;;脂毒性-炎症反应与胰岛素抵抗的关系研究进展[J];生理科学进展;2011年02期

3 武海亮;刘雅娟;刘芳;杨锐英;;代谢综合征患者胰岛素样生长因子-1及胰岛素抵抗与内皮损害的关系[J];宁夏医学杂志;2011年02期

4 王巍;于世家;于彩娜;;糖末宁颗粒剂对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经NGF、IGF-1表达的影响[J];北京中医药大学学报;2010年05期

5 常玲;王伟;孙伟娜;王鲁雁;;高胰岛素血症与心血管病危险因素研究[J];中国现代医学杂志;2009年19期

6 双卫兵;王东文;吴博威;;糖尿病大鼠逼尿肌细胞内游离钙离子浓度的变化[J];中华实验外科杂志;2006年04期

7 双卫兵;王东文;张炜芳;吴博威;;糖尿病大鼠逼尿肌线粒体超微结构及基质的改变[J];现代泌尿外科杂志;2006年01期

8 中华医学会糖尿病学分会代谢综合征研究协作组;中华医学会糖尿病学分会关于代谢综合征的建议[J];中华糖尿病杂志;2004年03期

9 许光武,俞茂华,叶红英,颜贻谦;小剂量牛初乳短链胰岛素样生长因子-Ⅰ可改善糖尿病大鼠周围神经病变[J];中华内分泌代谢杂志;2000年04期

10 蒋玉清;李晓伟;王秀丽;郭跃先;;胰岛素生长因子-1在糖尿病大鼠膀胱和腰骶背根神经节中的表达[J];中华实验外科杂志;2013年09期

  本文关键词：IGF-1在Mets大鼠和DM大鼠膀胱中的表达，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：499936